利用CRISPR/Cas9敲除葡萄VviPDS1基因的研究

选择葡萄八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase)基因VviPDS1为靶标,利用CRISPR/Cas9系统构建基因敲除载体,瞬时转化葡萄叶片原生质体,检测到不同类型的突变。通过农杆菌介导转化‘无核白’葡萄胚性愈伤组织,筛选获得卡那霉素抗性植株71株。经PCR鉴定,其中53株为阳性植株,阳性率为74.64%。测序结果表明,共有20株在靶点发生不同类型的突变,编辑效率为37.74%;其中9株产生了双等位基因突变。对其进行氨基酸序列预测,在第202位氨基酸之后发生了不同程度的变异。利用CRISPR/Cas9系统敲除VviPDS1获得的突变体植株呈现整体矮化,其叶片出现不同程度白化。表明CRISPR/Cas9系统可以通过细胞中的瞬时或稳定表达进行基因编辑,可以实现在葡萄编辑植株中产生纯合敲除。     

Role of TLR4-TRPC6 in LPS-induced NF-κB P65 expression and nuclear translocation in airway epithelial 16HBE cells

AIM: To investigate the role of Toll-like receptor 4 (TLR4) and transient receptor potential channel 6 (TRPC6) signaling pathway in lipopolysaccharide (LPS)-induced nuclear factor-κB (NF-κB) P65 expression and nuclear translocation in airway epithelial cells (16HBE) for supplementing the mechanism for airway inflammation. METHODS: After stimulating the 16HBE cells with LPS at 1 mg/L for 0, 0.5, 2, 6, 12 and 24 h, the expression of NF-κB P65 at mRNA and protein levels in the 16HBE cells were determined by RT-PCR and Western blot respectively, and the nuclear translocation of NF-κB P65 was detected by immunocytochemical staining method. The effects of TLR4 inhibitor CLI-095 at 5 μmol/L and TRPC6 agonist Hyp9 at 10 μmol/L on LPS (1 mg/L)-induced NF-κB P65 expression and nuclear translocation in the 16HBE cells were determined by RT-PCR, Western blot and immunocytochemical staining. RESULTS: LPS increased the mRNA and protein expression of NF-κB P65 and nuclear translocation in the 16HBE cells(P<0.05). TLR4 inhibitor CLI-095 reduced the mRNA and protein expression of NF-κB P65 and nuclear translocation induced by LPS, while Hyp9 enhanced the mRNA and protein expression of NF-κB P65 and nuclear translocation induced by LPS in the 16HBE cells(P<0.05). CONCLUSION: LPS induces the expression and nuclear translocation of NF-κB P65 in the 16HBE cells via TLR4-TRPC6 signaling pathway.     

数字环境下农业科研档案资源开发与发展路径

当前,农业科学技术研究档案面临数字经济带来的历史性变革.文章基于农业科研档案的内涵价值,探讨数字环境下农业科研档案创新发展的模式与路径.以深化农业科研档案资源价值为导向,分析应用数字技术解决传统农业科研档案数字化数据与现行数字农业科研档案融合管理的实践策略与技术方案.分别分析传统载体数字化数据与现行数字农业科研档案的优...     

海南辣椒、樱桃番茄病毒病调查及病原dot-ELISA鉴定

[目的]调查和鉴定海南省辣椒和樱桃番茄病毒病发生情况和病毒种类,明确病毒病发生为害程度及毒源种类.[方法]2018—2019年,通过5点取样法对海南省10个市县的辣椒和樱桃番茄进行病毒症状类型、发病率和病情指数统计.采集辣椒和樱桃番茄主产区病毒病样本593份,通过斑点酶联免疫吸附法(dot-ELISA)对黄瓜花叶病毒(...     

355份粳稻种质资源在新疆的遗传多样性分析及综合评价

为筛选出适合新疆种植的综合性状较优的水稻种质资源,对国、内外355份水稻资源的17个质量性状和20个数量性状进行综合评价。结果表明：在质量性状指标中穗抽出度、二次枝梗、穗立形态、叶片茸毛和分蘖力上表现出丰富的变异类型;数量性状变异范围为3.906%～57.519%,遗传多样性指数为1.713～2.067。通过对数量性状进行聚类分析将355份水稻种质资源划分为4大类群,类群Ⅰ属于极端粒型的特异性种质,共97份;类群Ⅱ属于潜在增产种质,共81份;类群Ⅲ属于晚熟极端种质,共94份;类群Ⅳ属于优质高产种质,共83份。20个数量性状利用主成分分析提取5个综合因子,累计贡献率为74.989%,各成分的贡献率分别为17.472%(PC1)、17.071%(PC2)、15.738%(PC3)、15.237%(PC4)和9.429%(PC5);水稻种质资源的综合得分范围为0.416 8～1.240 8,综合得分前10名的种质资源依次为‘21Y137’‘21Y271’‘21Y162’‘21Y280’‘21Y276’‘21Y87’‘21Y132’‘21Y254’‘21Y294’‘21Y318’,均属于类群Ⅳ...     

喷施新型腐植酸对谷子籽粒产量和品质的影响

为探究灌浆初期喷施新型腐植酸对谷子产量和品质的影响,以清水喷施为对照（NC）,设置腐植酸低（0.75 L/hm², 600×,LC）,中 （3.75 L/hm², 120× ,MC）,高（7.50 L/hm², 60× ,HC）3个浓度梯度,在谷子灌浆初期喷施于叶面,测定产量、穗部性状以及籽粒蛋白质、氨基酸、脂肪、碳水化合物、直链淀粉、黄色素、总黄酮、多酚等多个指标,分析谷子产量及营养品质的变化。结果表明：1） 灌浆初期叶面喷施新型腐植酸可以通过增加千粒重来增加产量,各处理的谷子产量增加幅度由高到低为HC>MC>LC>NC,MC和 HC处理分别比NC增产18.5%和19.4%,谷子增产的最适新型腐植酸浓度介于60~120 ×。2） 灌浆期喷施新型腐植酸可改善谷子籽粒品质,显著提高蛋白质、氨基酸、黄色素、多酚含量（P<0.05）。3）通过主成分分析对不同处理的多个品质指标进行综合分析,总得分由高到低为MC>LC>HC>NC,中浓度（3.75 L/hm², 120×,MC）处理对品质提升效果最好。综上,叶面喷施新型腐植酸可以提升谷子产量,改善籽粒品质,中浓度处理综合表现最好。     

中国辣椒BCAT基因家族鉴定、表达分析及克隆

【目的】了解中国辣椒（Capsicum chinense Jacq.）BCAT基因家族成员的分布、性质及表达模式。中国辣椒是辣椒的5个主要栽培种之一,果实通常具有由支链酯类形成的浓郁果香。支链氨基酸转氨酶（BCAT,Branched-chain Aminotransferase）负责催化支链氨基酸合成相应2-氧代酸,是催化合成支链酯类的第一步反应酶。【方法】使用生物信息学分析和实时荧光定量PCR等方法对中国辣椒的BCAT基因家族成员进行鉴定、表达分析和克隆。【结果】获得5个BCAT基因家族成员,分别命名为CcBCAT1、CcBCAT2、CcBCAT3、CcBCAT4和CcBCAT5,随后对其进行生物信息学分析并克隆CcBCAT1～CcBCAT4。生物信息学分析显示,这些基因分布于辣椒的4条染色体上,蛋白均为亲水性蛋白,氨基酸长度在184～557 aa,分子量为20.29～89.60 ku,等电点为5.57～8.34。亚细胞定位预测结果显示,CcBCAT1定位于叶绿体和线粒体,其他基因家族成员均位于叶绿体。CcBCATs基因时空表达分析显示,CcBCAT1-4基因具有组织表达特异性,Cc...     

猪胸膜肺炎放线杆菌Apx毒素的分子生物学与致病机理

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(App)引起的猪的一种呼吸道传染病.到目前为止,APP已经被分离鉴定出了15种血清型(1～15).15种血清型的APP能产生属于RTX毒素家族的4种Apx毒素,分别为ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ和ApxⅣ.ApxⅠ操纵子包含有ApxⅠ C、A、B、D 4个基因;ApxⅠ毒素含有13个富含甘氨酸的重复区.ApxⅡ操纵子仅包括结构基因ApxⅡA和激活基因ApxⅡC,而无分泌基因;ApxⅡ蛋白含有8个甘氨酸的序列重复.ApxⅢ操纵子与ApxⅠ操纵子相同,具有一个完整的操纵子;ApxⅢ在N～末端有3个疏水区,在C末端部分有13个富含甘氨酸的区域.Apx毒素的致病机理为先由没有活性的前体蛋白转变为有活性的ApxA蛋白,再由有活性的ApxA蛋白侵害细胞.     

籼型恢复系郴R92-225的杂交和辐射选育及应用

本文介绍了籼型恢复系郴R92-225的杂交和辐射选育过程、特征特性及配制杂交组合应用于生产的情况。对选育的郴R92-225的有利变异和选育方法及应用进行了讨论。