猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究

以猪附红细胞体和多种血营养菌16S rRNA基因的保守区设计合成引物HM-f/HM-r,在反向引物的5′端用生物素标记,以猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针,探针的5′端用地高辛标记,成功地建立了猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法。通过测定不同浓度PCR产物对应的微孔板杂交-酶反应显色OD值,用SPSS统计软件进行回归分析,得到回归方程为y=2.1012-0.4492×logx,其相关系数R为0.977,显示对未知样品可进行定量检测。该方法与猪的多种细菌性病原、猫血巴尔通氏体CA株和E.wenyonii无交叉反应,其敏感性比常规PCR琼脂糖电泳检测提高了近100倍。用建立的方法对38份临床样品进行检测,结果有12份检测结果为阳性。     

牛冷冻精液质量评估研究进展

人工授精(AI)是第一代动物繁殖生物技术,最近几十年以来,研究人员已经探索出了许多评估冷冻-解冻后精液品质的新技术。由于精子质膜在低渗条件下的功能状态、离子分布及浓度和各种细胞器的功能都与冷冻解冻后精子的存活能力相关,冻精质量的评定也从最初的形态和主观活率分析,发展到更精确的染色质、质膜完整性及分解代谢活性的分子变化分析。但是,在实际应用当中,许多方法花费很大,况且单个的评估参数都与动物精子实际的受精力相关性不强。因此,要提高牛冻精质量的预言强度,应该将这些独立的参数结合起来,利用多元回归分析,建立一套更完美更精确的评估体系。     

玉米高直链淀粉基因ae的特异性PCR鉴定

根据ae基因序列设计21对引物,对4个常规玉米自交系和4个具有aeae纯合基因型的高直链淀粉玉米自交系及其杂交种进行特异性PCR鉴定。结果表明,引物8可将具有AeAe基因型的普通玉米自交系与具有aeae基因型高直链淀粉玉米区分开来,为将普通玉米自交系快速改良成高直链淀粉玉米自交系提供了一种有效的分子标记检测技术。     

淳安县2006年夏茧产低质差原因分析与对策

淳安县随着蚕桑生产规模的不断扩大,夏蚕饲养量逐年增加.2006年全县夏蚕实际饲养量23306张,比上年同期增长28.7%,占春蚕总量的40.3%,占全省夏蚕饲养量的18.8%,饲养量和增幅是历史同期最高的一年.     

固化茧丝的丝胶稳定性检测和染色性试验

固化茧丝的丝胶稳定性及染色性直接关系丝胶固着丝绸产品的市场开发前景。通过测定丝胶溶失率、耐洗涤性能和上染率及红外光谱,研究了固化茧丝的丝胶稳定性及适用的染料和部分染色工艺条件。检测结果表明固化茧丝的丝胶溶失率比普通茧丝低,丝胶性能稳定,90℃条件下固化茧丝的丝胶溶失率只有1.6%;红外光谱显示固化茧丝的分子结构发生了一定改变;活性染料和酸性染料对固化茧丝的上染试验显示酸性染料的上染率高于活性染料,但其染色均匀性不及活性染料,活性染料和酸性染料对固化茧丝的最高上染率分别为67.9%、68.5%;适宜固化茧丝纤维上染的温度为70℃,用酸性染料上染固化茧丝不宜采用强酸性浴。     

菁松皓月的种性维持及系统改良

本文通过对浙江省蚕种公司和中国农业科学院蚕业研究所提供的菁松、皓月品种的原原种和杂交种27年的历年饲育成绩和经济性状分析,认为菁松、皓月的主要经济性状没有改变,仍保持推广初期的饲育成绩水平,且某些经济眭状有所提高;同时阐述了菁松、皓月品种的种性维持及系统改良的方法和经验。     

猪链球菌耐药性产生对其毒力的影响

为探讨猪链球菌2型菌株耐药性产生对其毒力的影响,作者采用次抑菌浓度的青霉素和红霉素诱导猪链球菌2型临床分离敏感株HA9801成为青霉素、红霉素耐药株,并对亲本株与诱导耐药株的半数致死量（LD50）、溶血环、毒力因子溶菌酶释放蛋白（MRP）、胞外蛋白因子（EF）和荚膜多糖（CPS）及对小鼠的组织损伤进行比较。结果显示：次抑菌浓度的红霉素和青霉素可以诱导耐药性的产生,但耐药株与亲本株比较,溶血性、LD50、MRP、CPS、EF及对组织的损伤程度均与亲本株无显著差异（P〈0．05）。结果表明：猪链球菌2型HA9801株在获得耐药性的同时,仍能保持与亲本株相似的毒力,其毒力不会因耐药性的获得而降低。     

H3亚型猪流感病毒荧光定量PCR检测方法的建立

通过RT-PCR方法克隆了H3亚型猪流感病毒HA基因一段靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板.根据GenBank中的H3亚型猪流感病毒HA基因保守序列设计了用于FQ-PCR的1对引物和1条TaqMan探针.通过条件优化,以10倍系列稀释的质粒为标准品进行荧光定量PCR扩增,并制作标准曲线,建立了检测H3亚型猪流感的荧光定量PCR方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μL,线性范围为109～100,达10个数量级;对起始浓度为1.0×109、1.0×108、1.0×107拷贝/μL的标准品的最终实际测得值(Ct)分别为13.68,18.21和20.57;变异系数分别为0.31%、0.17%和0.12%,均小于5%,说明此方法具有良好的准确性和重现性.对阳性组织病料的检测表明,该方法的检测灵敏度高出常规PCR,与套式PCR具有相近的灵敏度.     

N-甲基-D-天冬氨酸对猪生长激素和生长抑素动态分泌模式及特征的影响

本试验通过在日粮中添加一定水平的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)研究其对猪生长激素(GH)和生长抑素(SS)动态分泌模式及特征的影响.选取体重为(53.0±3.6)kg的杜长大三元杂交猪60头,随机分为2组,每组3个重复,每个重复10头猪(公母各1/2,公猪已阉割),分别饲喂添加0、100 mg/kg NMDA的日粮,猪体重接近90 kg时结束试验,分析猪的生长性能并测定GH和SS.结果显示,在日粮中添加100 mg/kg的NMDA,猪的日增重显著增加(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05);GH分泌的总体水平、基线水平和峰强度显著提高(P<0.05).从性别角度而言,阉公猪GH分泌总体水平增加36.91%(P<0.05);基线水平提高了55.69%(P<0.05);母猪GH分泌总体水平提高了45.95%(P<0.05);基线水平提高了50.10%(P<0.05).100 mg/kg NMDA组阉公猪与母猪SS的分泌水平有所提高,但与对照组差异不显著(P>0.05).以上结果表明:日粮添加100 mg/kg的NMDA可以促进猪的生长、提高猪GH的分泌水平,使GH分泌表现出较强的脉冲分泌规律;而NMDA对SS的分泌模式和分泌水平未产生明显影响.     

HoneyWell太岁强蜂活菌液蜂群实验初报

针对EM制剂的不足研发了HoneyWell太岁强蜂活菌液,并将之与EM原露、EM生命液进行了蜂群的应用实验.结果表明:饲喂蜂群太岁活菌液5、15、30天后中蜂囊状幼虫病和意蜂爬蜂病的治疗效果均高于80%、97%、99%;即使经历繁重的采蜜工作,群势依然控制在±1.5%范围内;蜂产品意蜂、中蜂平均增产31.20%、28.94%,所有指标均显著优于EM原露和EM生命液,说明HoneyWell太岁强蜂活菌液作为EM制剂升级换代产品,具有无需活化、增强免疫、防治疾病、保障群势、增产创收的巨大功效,非常值得大力推广应用.