布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白的原核表达及对鼠源树突状细胞的作用

为了研究和探讨布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白对鼠源树突状细胞(BM-DCs)分化和成熟的影响,用布鲁氏菌S2疫苗株为模板扩增L7/L12基因,构建重组质粒pET30a-L7/L12,用大肠埃希菌原核表达系统进行诱导表达,并用Ni柱对表达的蛋白进行纯化.用IL-4和GM-CSF诱导培养鼠源DCs,用脂多糖(LPS)和L7...     

应用拟杆菌作为水体粪源污染指示菌的研究进展

粪源污染是水环境安全的重要威胁。传统的指示微生物在水体粪源检测中存在较多局限性,难以准确溯源水体所受粪源污染。拟杆菌属微生物因其具有在人畜肠道中的绝对数量优势和突出的粪源指示作用等优点,在粪源污染监测中日渐受到重视。该文阐述了拟杆菌作为指示微生物在应用于示踪水体粪源污染时的优势,并针对水环境中拟杆菌的检测方法及其在受污...     

轮套作对黄瓜土壤微生物多样性及产量的影响

 【目的】研究轮套作对黄瓜各个时期的土壤微生物多样性及黄瓜产量的影响。【方法】采用随机扩增多态性DNA分析（random amplified polymorphism DNA,RAPD）方法。【结果】轮作处理中,小麦和大豆轮作处理可以显著提高黄瓜土壤微生物群落DNA序列多样性各指数（P＜0.05）,其黄瓜产量极显著高于对照（P＜0.01）;与对照相比,毛葱套作处理显著提高黄瓜土壤微生物群落DNA序列多样性各指数,其黄瓜产量极显著高于对照（P＜0.01）。【结论】小麦、大豆轮作和毛葱套作有利于改善土壤微生态环境,提高黄瓜产量。     

苹果黑星病菌的分子检测

【目的】建立苹果黑星病菌(Venturia inaequalis(Cooke)Wint)的分子检测方法,以提高检测精确度,缩短检测时间。【方法】根据苹果黑星病菌与其他苹果病原真菌核糖体基因转录间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)序列间的差异,设计了1对特异性引物320A/320B,用于苹果黑星病菌的分子检测,对特异性引物扩增条件进行了优化,并验证和检验了引物的特异性和灵敏度。【结果】特异性引物的扩增条带约为320bp,优化的反应体系为:2μL MgCl2(25mmol/L),2.5μL 10×buffer,3μL dNTP(2.5mmol/L),1.2 μL引物320A/320B(10μmol/L),0.5μL聚合酶(5U/μL),1μL模版DNA(30ng/μL),加ddH2O至总体积25μL;反应程序为:94℃3min;94℃变性30s,60℃退火30s,72℃延伸30s,35个循环;72℃延伸10min。利用该对特异性引物对包括苹果黑星病菌在内的26个苹果病原菌菌株基因组DNA进行的PCR扩增表明,只有苹果黑星病菌能扩增到1条约320bp的特异性条带,其他菌株及阴性对照的扩增产物均未检测到特异性条带。对接种苹果黑星病菌的苹果组织的检测表明,该对引物能特异性地检测到苹果黑星病菌的存在,其对苹果黑星病菌基因组DNA检测的灵敏度为100fp/μL。【结论】利用设计的特异性引物320A/320B,参考正交试验优化的体系和程序,结合简单的SDS法提取苹果黑星病菌基因组DNA,在1个工作日内即可完成对该病原菌的分子检测。     

华北地区几种常见园林绿化树种节水性和抗旱性评价

以压力-容积(PV)技术和切枝蒸腾法测定了华北地区6种常见绿化树种叶片的多项水分参数值(ψ_s~(sat)、ψ_w~(tlp)、RWC~(tlp)、V_a/V_p、ε~(max)、气孔关闭前后的组织相对含水率、d值、最大气孔蒸腾速率),并结合隶属函数法和聚类分析对各树种的节水性、抗旱性、保水能力、渗透调节能力进行了综合分析、比较和分类。结果表明:①针叶树为了保持光合作用的进行导致了低的保水能力,使得它们具有弱的节水性和强的抗旱性;阔叶灌木与此相反。②3种针叶树的节水性相近,圆柏抗旱性最佳,侧柏抗旱性居中,沙地柏抗旱性较差。③阔叶灌木中,大叶黄杨节水性最佳,金叶女贞和紫叶小檗的节水性相近;而大叶黄杨和紫叶小檗的抗旱性相近,均优于抗旱性最差的金叶女贞。     

木瓜凝乳蛋白酶基因的克隆及在原核细胞中的表达

以青番木瓜总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出木瓜凝乳蛋白酶基因CHY(chymopapain),构建带有His-tag的原核表达载体p EASY-E1-CHY。将该重组载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,重组菌株用IPTG诱导表达,在诱导6 h,IPTG浓度为0.05 mmol/L时重组蛋白表达量最高。SDS-PAGE凝胶电泳和West-ern-Blot杂交分析结果表明蛋白大小为45 k Da。用脱脂奶粉进行凝乳分析,证明此木瓜凝乳蛋白酶具有凝乳活性,此结果为今后利用生物技术进行木瓜凝乳蛋白酶工程化生产奠定了基础。     

小偃系列小麦品种对条锈病的高温抗病性研究

小麦高温抗条锈性是在较高温度下所诱导的一种低反应型抗病性。苗期接种条锈菌（Puccinia striiformis West.）后,分别采用高温（21±1）℃和常温（14±1）℃处理,测定小偃系列小麦品种的高温抗条锈性。结果表明,小偃系列品种中具有较多的高温抗条锈性资源。另外,以高温抗锈品种小偃6号为试材,以高感品种铭贤169为对照,分别接种不同条锈菌生理小种和类型,证实小麦高温抗条锈性不具有小种专化性。     

不同播种期对马铃薯产量的影响

2007年对不同播种期马铃薯产量的影响进行研究。结果表明,马铃薯在不同时期播种,产量差异明显。4月下旬至5月上旬,适当推迟播种期,产量增加,且以5月10日播种的产量最高,为20 987.71 kg/hm2。     

草-烟轮作高效栽培技术试验初报

为解决贵州山区烤烟地水土流失和农民增收,实现关键技术突破,采用贵州当前推广的优良牧草品种,试验研究了草-烟两熟轮作和草-烟 草一年三熟轮作两种栽培模式的异同。结果表明:草-烟轮作后烤烟单价提高了0.53元/kg;草-烟两熟轮作模式比草-烟 草一年三熟轮作模式纯收入高出10794.54元/hm2,达18709.57元/hm2,投产比达1∶2.58,经济效益显著,远高于当地烟农14263.86元/hm2的纯收入;草-烟轮作对土壤肥力的影响不大。选择优良牧草品种,合理施肥,进行草-烟轮作,可改进山区农作物传统的耕作制度,提高土地利用率,减轻烤烟病虫害,涵养水源,促进畜牧产业和农村经济的发展,具有良好的经济、生态和社会效益。     

宁夏养鸡场粪污及周边土壤重金属和细菌群落特征研究

为了解宁夏蛋鸡养殖场粪污和周边土壤中重金属及细菌群落状况,在宁夏最大的蛋鸡养殖区采集了不同养殖期新鲜鸡粪和相关土壤样品,测定了7种重金属含量和细菌群落组成及多样性。结果表明:该地区鸡粪中Cu、Cd、Cr、Pb、Hg和As含量低于全国平均值26.83%～93.23%,而Zn含量高于全国平均值28.74%,与德国有机肥料中重金属限量标准相比Zn超标6.94%。随着养殖期的推移,鸡粪中Cu、Cd、As含量均先减少后增加;育雏期Cu、Zn、Cd、Hg含量在全养殖期都相对最高,育成期鸡粪Cu、Zn、Cr、Pb和As含量均最低。鸡粪重金属综合污染指数除育成期属于安全水平外,其他4个时期均属于警戒限水平;高产期鸡粪重金属综合污染指数最高。养殖场周边土壤和施用了鸡粪的土壤Cu、Zn含量均高于对照土壤;各土壤重金属综合污染指数均处于安全水平。鸡粪中优势菌门是Firmicutes、Proteobacteria和Bacteroidetes。土壤中相对丰度较高的是Proteobacteria、Bacteroidetes、Actinobacteria、Acidobacteria和Planctomycetes。施用鸡粪后土壤细菌在门水平上数量发生变化,但并不显著。在鸡粪基本理化性质中,pH和全钾对细菌群落多样性和优势菌门有显著的促进作用,重金属中Zn的影响较大。土壤基本理化性质中有机质对土壤细菌优势菌门丰度影响最大,重金属中Cu和Zn对细菌多样性和优势菌门普遍具有显著影响。