两种免疫增强制剂对早期断乳仔猪红细胞免疫功能的影响

选取28日龄断奶的三元[杜×(大×长)]杂交仔猪15头,平均初始体重为(5.22±0.89)kg,随机分为3组:活性卵白组、活性酵母组和对照组,每组5头。对照组饲喂基础日粮,两个处理组在相同的基础日粮中分别口服卵白制剂及酵母制剂,剂量为10 mL/只,连续服用10 d。应用红细胞C3b受体花环(Erythrocyte C3bR,E-C3bR)试验和红细胞免疫复合物花环(ErythrocyteICR,E-ICR)试验,探讨两种免疫增强制剂在服药不同时间对断乳仔猪红细胞免疫功能的影响。结果显示,活性卵白组和活性酵母组的E-C3bRR和E-ICRR在服药后第1周、第2周都极显著的高于对照组(P<0.01),并于第2周达最高值。服药后第3周活性卵白组的E-C3bRR和E-ICRR均维持在较高水平,与对照组差异极显著(P<0.01);而活性酵母组呈现明显下降趋势,与对照组无明显差异。结果表明,活性卵白组较活性酵母组具有更加持续稳定的红细胞免疫促进功能。     

Identification and molecular characterization of a novel flavivirus isolated from Pekin ducklings in China

A flavivirus-associated disease of egg-laying ducks was observed in eastern China in 2010, and a novel mosquito-borne flavivirus, Tembusu virus (TMUV), was isolated (Cao et al., 2011). Following up on the earlier study, a virus similar to TMUV was isolated recently from ducklings and characterized. We report that (1) the recently isolated virus, TMUV ZJ-6, replicated in vertebrate cells (DF-1, BHK-21) as well as in mosquito cells (C6/36) and caused cytopathic effect (CPE) in the cell lines tested; (2) extracellular viral particles examined by electron microscopy were approximately 45 nm in diameter and enveloped; (3) the full-length genome of the virus was determined, showing that the TMUV ZJ-6 is more closely related to the Ntaya group of viruses than other members of the Flaviviridae based on the data of phylogenetic analyses. Most importantly, the disease of ducklings was reproducible after administration of plaque-purified virus by intracerebral (i.c.), subcutaneous (s.c.) or intranasal (i.n.) inoculation. This is the first report that TMUV infects not only egg-laying ducks but also 3-21 days-old ducklings. The findings extend our understanding of how the virus spreads and causes disease.     

马立克氏病病毒感染鸡羽髓上皮细胞差异蛋白质组学研究

为鉴定鸡羽髓上皮细胞感染马立克氏病病毒(MDV)前后差异表达的蛋白,本研究以MDV强毒GA株人工感染SPF鸡,并通过双向电泳技术进行分析.结果显示:在病毒感染后4 d、7 d、14 d和21 d显著差异表达的蛋白点分别有2个、8个、25个和9个;而通过质谱技术鉴定出29种蛋白质,其中包括能量代谢相关蛋白、增殖和凋亡相关蛋白、细胞骨架蛋白、信号传导蛋白、转录相关蛋白、免疫相关蛋白和其他功能蛋白质.本实验首次对鸡羽髓上皮细胞感染MDV后各时期蛋白表达水平的变化进行研究,鉴定了多种差异表达蛋白质,为进一步揭示MDV与宿主的相互关系、感染性病毒粒子的成熟和致病机制提供了依据.     

中国荷斯坦牛初产日龄遗传评估及全基因组关联分析

基于高通量SNPs测序的全基因组关联分析为奶牛繁殖性状相关基因的探索提供了契机。本研究基于课题组前期中国荷斯坦牛基因组测序芯片的结果,通过DMU(v 6.0)采用AI-REML结合EM算法的动物模型对北京地区2001-2011年10年间19 111头中国荷斯坦母牛初产日龄记录进行遗传参数估计,并应用PLINK(v 1.07)将大群估计的2 172头中国荷斯坦母牛初产日龄性状的育种值(EBV)作为表型值,进行基于无关群体设计的全基因组关联分析。通过全基因组水平的Bonferroni校正,共检测到1 700个SNPs与初产日龄显著相关。选取P值达到10-15的43个SNPs进行初步分析,其中12个位于X染色体上。显著SNPs上下游200kb范围内存在KLHL4、TRAM1、TRAM2、ZNF438、MATK等繁殖障碍疾病相关基因。7号染色体1 Mb(20.42~21.52 Mb)区域内多个SNPs位点与初产日龄显著相关。这些基因和区域可以作为影响初产日龄性状的重要候选基因和区域,为揭示奶牛繁殖性状的分子遗传基础积累了素材。     

FQ-PCR在转基因产品检测中的应用研究进展

实时荧光定量PCR（real-time fuoreseent quantitative PCR,FQ—PCR）是近年来定量PCR技术中兴起的最新定量检测技术,因其具有灵敏性高、特异性强、结果精确、反应快速、安全可靠等优点,现已广泛应用于医学和生命科学的各个研究领域,论文就实时荧光PCR技术的主要原理、分类方法以及在转基因产品检测中的应用等进行简要综述。     

大米糖浆替代乳糖对早期断奶仔猪生长性能及胰岛素样生长因子轴的影响

本文旨在研究大米糖浆取代乳糖后对早期断奶仔猪生产性能及胰岛素样生长因子轴的影响.选用7 d断奶的二元杂交仔猪(长白×大白)32头,随机分为2个处理组,每组设16个重复,每个重复1只.日粮成分除乳糖水平外(乳糖组和大米糖浆组分别为43.5%和0),其他成分均一致.试验期14 d,在试验第7天、第14天和第21天对试验猪进行空腹8 h称重,计算试验期日增重及日耗料,并分别于试验第7天和第14天每组随机抽取5头,颈静脉采血,屠宰速取肝脏和背最长肌组织.结果表明,大米糖浆取代乳糖后对仔猪的日增重及肉料比均没有显著影响(P>0.05),14 d大米糖浆组血清GH水平与乳糖组差异不显著(P>0.05),21 d大米糖浆组血清GH水平极显著低于乳糖组(P<0.01);但大米糖浆组14 d和21 d血清IGF-Ⅰ的水平,及肝脏和背最长肌IGF-Ⅰ mRNA相对表达量与乳糖组差异均不显著(P>0.05).综合分析认为,大米糖浆替代乳糖后对早期断奶仔猪的生长性能和胰岛素样生长因子轴没有影响.     

犬猫3种冠状病毒基因克隆的构建与芯片检测技术

蔗糖密度梯度离心纯化浓缩犬冠状病毒(CCV)、猫冠状病毒(FCV)和猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的细胞培养物,分别设计7、17、11对引物,对病毒RNA进行反转录和PCR扩增,回收PCR产物连接pGEM-T载体并转化大肠杆菌TGI,构建35个基因片段的克隆。煮沸裂解法制备质粒DNA,回收PCR扩增产物,点制冠状病毒基因芯片。抽提病毒总RNA,利用Cy3-dCTP随机渗入反转录PCR标记,与芯片进行杂交检测,淘汰交叉的克隆片段,每种病毒只选择其4对引物克隆的基因片段。将特异克隆扩增片段重新点制基因芯片,与病毒样品PCR扩增产物杂交,未发现交叉现象。基因芯片检测比传统PCR敏感1000倍,可有效应用于3种病毒的检测与区分。     

贺兰山高山草甸的群落生态学研究

在群落调查的基础上，对贺兰山高山草甸进行数量分析。主要的结果如下：（1）贺兰山高山草甸可分为三个群系，分别为珠芽蓼群系、高山嵩草群系和矮嵩草群系，而高山嵩草群系和矮嵩草群系可进一步划分为两个亚群系，不同群系（或亚群系）的群落结构和环境特征之间存在显著的差异；（2）高山嵩草群系和矮嵩草群系之间的界限约为海拔3200m，而珠芽蓼群系主要分布于研究区的偏阴坡，与海拔关系不大；（3）14个频次大于50％的物种在排序图上的空间分布反映了这些物种最适宜生境的位置，而且与群落类型的空间分布一致。     

冰草的远缘杂交及杂种分析

蒙古冰草隶属于冰草属的二倍体种，原产于内蒙古。航道冰草是从北美引进的栽培品种隶属于扁穗冰草种，亦为二倍体种，为了将蒙古冰草的优良抗性基因和航道冰草的优良品质基因相结合，进行二倍体种间的远缘杂交。杂种Ｆ１全部为二倍体，其形态学特征介于双亲之间。杂种Ｆ１ ＰＭＣ ＭⅠ的染色体平均配对构型为：２．０９Ⅰ，４．８６Ⅱ，０．４８Ⅲ，０．２４Ⅳ及０．２９Ⅴ。     

贵州香羊MSTN基因的多态性

肌肉生长抑制素（Myostatin,MSTN）是一种在骨骼肌中广泛存在的糖蛋白,是骨骼肌生长的负调控因子,其基因的缺失、插入或突变会引起肌细胞增生与肌纤维肥大从而提高产肉力。采用PCR-RFLP方法对67只贵州香羊MSTN基因进行了多态性分析。结果显示,5′UTR和外显子1没有出现变异,内含子1和外显子2中存在BspLⅠ、XmnⅠ、BmrⅠ、Hpy188Ⅰ4个酶切多态位点。纯合野生型（AA、CC、EE、MM）为优势基因型,杂合型（AB、CD、EF、MN）和纯合突变型（BB、DD、FF、NN）为非优势基因型,A、C、E、M等位基因为优势基因。