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含PRRS病毒ORF5的伪狂犬病病毒TK基因缺失转移载体的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
提取伪狂犬病病毒(PRV)BarthaK61株基因组DNA,用限制性内切酶KpnI充分消化,回收5.9kb片段(J片段),将其克隆于质粒pUC119 KpnI位点上,获得pBKJ。用两对针对PRV TK基因的特异性引物对重组质粒进行PCR鉴定,证明其中含有PRV TK基因。然后用KpnI、PstI和BamHI等限制性内切酶对其进行酶切分析,确定了克隆片段的物理图谱。进一步研究证实TK基因位于其中的 相似文献
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接受式探究教学是一种介于接受式教学和探究式教学之间的折中的教学方式,在饲料学课程教学中成为一种可行的教学方式。通过在饲料学教学中尝试有目的地引导学生利用提供的资源去探究问题,有助于解决学生基础知识储备不足与生成性思维习惯之间的矛盾。为配合接受式探究教学的有效实施,饲料学课程教学中综合应用了多种教学法。 相似文献
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沙门氏菌属是饲料中污染最高、危害最大的病原性细菌,此菌属种多,分布广,已知的血清型株有2449种。沙门氏菌对人和动物有致病力,如伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌等,动物通过饲料摄人大量菌体后,细菌在肠道繁殖并产生内毒素,对肠道产生刺激作用,引起严重的胃肠炎症状。该菌能引起动物的多种疾病,如禽霍乱、鸡白痢、马流产等,并造成沙门氏菌的传播循环即:饲料一动物一食品原料一人。饲料原料被沙门氏菌污染是造成饲料产品沙门氏菌污染的主要途径,因此国家农业部饲料中心把沙门氏菌的检测作为饲料原料抽检的必检的卫生指标之一。然而饲料中沙门氏菌的检验采用国标方法则相当复杂。为了探索更准确、快捷的检验方法,我们分别采用国标方法和参照法国生物梅里埃公司AOAC食品中沙门氏菌属的生物化学工具鉴定法进行。 相似文献
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重组GP5AB蛋白间接ELISA检测PRRSV抗体方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用GST-GP5AB重组蛋白作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法。抗原最适包被浓度为2μg/mL,最佳封闭液为0.15%BSA,37℃封闭2 h后,再4℃封闭24 h,血清最适稀释度为1∶200,其作用时间为60m in,酶标抗体最适稀释度为1∶20 000,最适作用时间为90 m in,37℃显色10 m in,S/P≥0.284为阳性,S/P≤0.26为阴性,介于二者之间为可疑的判定标准。该抗原与猪其他4种临床症状类似的疾病的阳性血清反应呈阴性。批内和批间重复性试验结果,变异系数均小于7%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用本方法初步检测了一些疫苗免疫仔猪血清样品,并与重组N蛋白和PRRSV抗原同时进行比较,结果显示3种抗原检测的结果基本一致。 相似文献
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株的基因序列,设计U1和U6两套PCR引物和荧光探针,建立了扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR用于检测美洲型PRRSV。用10倍倍比稀释的质粒DNA、cDNA、RNA进行扩增以检测其灵敏度,同时对猪瘟(HCV)、猪伪狂犬(PRV)等7种病毒进行特异性检测。结果显示建立的扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR可用于检测PRRSV,其灵敏度为10个拷贝的质粒DNA,而与HCV等非PRRSV无交叉反应。本研究所建立的荧光RT-PCR具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,可用于PRRSV样品的检测。 相似文献
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40.
自然感染日本血吸虫病耕牛血清循环抗原消长规律的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了观察疫区自然感染日本血吸虫病耕牛血清循环抗原消长规律,本试验将血吸虫病非疫区的水、黄牛各10头,转运至安徽省血吸虫病疫区,接受为期8周的自然感染。用斑点酶联免疫吸附试验测定牛血清循环抗原。结果,水、黄牛血清循环抗原滴度均于自然感染第4周后明显上升,水、黄牛自然感染第8周的血清循环抗原最高滴度分为1∶10240和1∶5120,最低滴度则分别为1∶1280和1∶640,水牛循环抗原滴度高于黄牛。虫荷数与血清循环抗原滴度未见有相关性。 相似文献