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为了表达牛环形泰勒虫(Theileria annulata)截短HSP70基因编码蛋白并研究该蛋白的结构与功能特性,本研究扩增牛环形泰勒虫HSP70目的基因并构建重组质粒pMD18-T-HSP70,选取其他种的同源HSP70蛋白序列构建系统进化树;利用生物信息学方法分析HSP70基因编码蛋白的氨基酸组成、基本理化性质、亲疏水性、跨膜区结构、信号肽、可能的磷酸化位点、亚细胞定位及蛋白的二级结构和三级结构;对重组蛋白HSP70进行蛋白互作网络分析;构建原核表达载体pET28a-HSP70,筛选诱导表达条件,镍柱纯化重组蛋白及检测反应原性。结果显示,牛环形泰勒虫HSP70蛋白序列与小泰勒虫的序列同源性较高,蛋白分子质量为42 ku,理论等电点(pI)为5.61,属于酸性亲水性蛋白,无跨膜区及信号肽;蛋白功能预测结果显示,HSP70包含32个可能的磷酸化位点,亚细胞定位分析显示该蛋白主要分布于细胞质。蛋白质二级结构中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲、延伸链分别占39.18%、8.51%、30.41%和21.91%。蛋白互作网络构建结果显示,与HSP70相互作用的蛋白主要为HSP90家族成员,另外还有伴侣蛋白GrpE同系物,预示着HSP70可能在细胞内与HSP90形成复合体发挥作用。本试验成功构建原核表达载体,获得了大小约为48 ku的融合蛋白,以0.6 mmol/L IPTG于37 ℃诱导5 h,蛋白表达较好;点状印迹及Western blotting结果表明,表达产物可被自然感染的牛环形泰勒虫阳性血清识别,具有良好的反应原性。本试验结果为进一步探讨牛环形泰勒虫HSP70功能机制提供了理论依据。 相似文献
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Luis A. Bello‐Prez Pamela C. Flores‐Silva Gustavo A. Camelo‐Mndez Octavio Paredes‐Lpez Juan de Dios Figueroa‐Crdenas 《Cereal Chemistry》2015,92(3):265-270
Nixtamalization is an ancient process developed by the Mesoamerican cultures. Initially, volcanic ashes were used and then calcium hydroxide in commercial production, and more recently nixtamalization with calcium salts (NCS) has been proposed. The aim of this study was to evaluate the effect of NCS on carbohydrate digestibility and antioxidant capacity in the elaboration of blue maize tortillas. NCS in blue tortillas showed a high amount of total dietary fiber (14.27 g/100 g), the main fraction being insoluble dietary fiber. The contents of resistant starch and slowly digestible starch did not change with the nixtamalization process. The predicted glycemic index value was lower in blue tortillas with the NCS process (58) than with the traditional nixtamalization process (71). In general, NCS in blue tortillas presented a higher antioxidant capacity than traditional tortillas (ferric reducing antioxidant power method), indicating that phenolics present in blue maize maintain their activity after cooking. It can be concluded that the nutraceutical features (high dietary fiber content and antioxidant capacity) of blue maize tortillas are enhanced when they are elaborated with the NCS process. 相似文献
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Influence of Breed Size,Age, Fecal Quality,and Enteropathogen Shedding on Fecal Calprotectin and Immunoglobulin A Concentrations in Puppies During the Weaning Period 下载免费PDF全文
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以种植年限3年的盐渍化土壤为研究对象,采用模拟土柱淋溶法,研究了不同用量和配比的KCl和MgCl_2营养液对土壤盐渍化离子的影响,以期为盐渍化土壤的修复提供参考依据。结果表明:随着营养液施用量的增加,土壤中K~+、Mg~(2+)、Cl~-含量提高,Na~+、Ca~(2+)、HCO_3~-的含量降低,土壤中总盐分增高。与原土壤相比,土壤中K~+、Na~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Cl~-和土壤盐分总量下降,HCO_3~-和SO_4~(2-)较原土壤有所提高。从土壤盐分离子总电荷变化来看,在1∶1型的营养液配方中各处理间差异较小,而在2∶1型营养液配方中,随施钾用量的增加使土壤阳离子的存留量降低。表明次生盐渍化土壤中,平衡及低浓度的施用量可缓解土壤盐渍化,降低养分的淋溶作用,促进离子间平衡。 相似文献