鸭MyoG基因编码区的克隆及其在鸭心肌组织发育中的表达研究

肌细胞生成素(myogenin,MyoG)在胚胎发育中发挥作用,并能与在心脏发育过程中起重要作用的MEF2基因家族协同促进肌肉的分化,而其在心肌发育中的作用却鲜有报道。为研究其在胚胎心肌组织发育过程中的作用,本研究扩增了鸭MyoG基因CDS序列,并采用实时荧光定量PCR法检测了MyoG在鸭E10、E14、E18、E22、E27 d及出生后1周雏鸭(P7 d)心肌组织中共6个阶段的表达变化。基因扩增得到鸭MyoG基因CDS序列共684bp,编码227个氨基酸,预测其含有碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)结构域。结果表明:MyoG在鸭E10 d中的表达量最高,显著高于E14、E18、E22和E27 d(P0.05);E14 d与E18 d,E22 d和E27 d之间的表达差异不显著(P0.05);MyoG在鸭出壳前心肌组织中的表达量整体呈现下降趋势,出生后1周,表达量又明显上升,与E22 d和E27 d差异显著(P0.05)。MyoG在鸭心肌组织的发育中起作用,其机理可能是通过MyoG的bHLH结构域直接或以MEF2基因家族介导间接实现对心脏发育的调控。     

犬瘟热、犬细小病毒胶体金二联检测卡研制

本研究通过细胞融合、间接ELISA方法筛选出4株可稳定分泌犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以此为基础研制了一种可同时检测CDV和CPV的胶体金二联检测卡,并对其特异性、灵敏度及准确性进行了测试。结果显示：4株杂交瘤细胞可稳定传代,分泌的单克隆抗体纯度高,效价均在1:320以上。制备的胶体金二联检测卡特异性强,只与CDV和CPV产生特异性条带,而不与其他犬类病毒反应;灵敏度高,最低检测限可达到10²拷贝/μL;准确性好,与荧光定量PCR结果的符合率高于88.0%,与市面上单一病毒检测卡的符合率高于97.2%。结果表明,本研究制备的CDV、CPV胶体金二联检测卡特异性强、灵敏度高、准确性好,兼具操作简便、肉眼可判读、结果易保存和无需特殊仪器设备等优势,可用于两种疾病的临床快速诊断和大规模检测工作。     

奶牛场荧光定量PCR检测实验室建设实践与思考——以原生态牧业奶牛场实验室建设为例

荧光定量PCR技术用于病原微生物基因表达、基因组变异和多态性检测等,具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,已广泛用于临床诊断和畜禽疫病诊断。本文以黑龙江原生态牧业奶牛场荧光定量PCR检测实验室建设为例,从设计规划、配套设备、人员配备、环境控制及存在问题解决五大方面进行论述,提出PCR实验室建设要根据奶牛场场地实际情况,规划适合PCR实验检测区域;根据PCR检测需求及奶牛场费用预算配置实验设备;根据奶牛场预计检测样品量配备检测人员及培养储备人员;在建立严格的操作规范基础上,严格执行实验分区管理及检测过程中消毒流程,避免实验过程中产生气溶胶污染环境。     

牛胚胎移植技术的产业化研究

本文探讨了引进国外优质奶、肉牛冷冻胚胎建立核心群，以及供体牛选择、超数排卵、胚胎冷冻保存和分割等相关技术，为牛胚胎移植产业化奠定基础。     

应用PCR-RFLP及PCR-SSCP技术检测猪RN基因的研究

RN(Rendement Napole)基因是影响猪肉肉质性状的一个主效基因，已被定位在猪的15号染色体上(15q25)，该基因在猪肉品质上存在严重的负面效应。应用限制性片段长度多态性(RFLP)和单链构象多态性(SSCP)分析技术快速检测猪RN基因，根据RN向200Q突变的原理设计引物，PCR扩增后得到一段长约577bp的片段，两种方法得到相同的结果。     

新江汉鸡的饲养管理

1新江汉鸡（土鸡） 新江汉鸡作为地方品种之一，具有开产早、产蛋多、耗料少等优点。成鸡一般体重约1．5千克，64周龄产蛋210个。产蛋期日平均耗料85～90克，平均蛋重50克。     

一起饲料未落实留样观察制度案的查处

2019年7月,A市农业综合执法支队执法人员在执法检查中发现,×宠物饲料有限公司涉嫌未落实留样观察制度而从事饲料生产。经立案调查,认定当事人违法事实存在,证据确凿。根据《饲料和饲料添加剂管理条例》规定,依法给予了行政处罚。本文重点介绍了案件的发生、查处经过、法律适用及处理情况等执法内容,讨论了饲料留样目的和意义、调查取证注意事项、违法物品的处理以及责令改正的正确适用等问题,指出了办理此类案件时的取证依据、处罚前置条件,以期为行政执法人员办理同类案件提供参考。     

早开堇菜组织培养及植株再生体系的建立

以野生早开堇菜为材料,研究了不同外植体类型(子叶节、叶片、叶柄)和不同激素配比对其不定芽诱导、愈伤组织诱导和分化的影响,成功建立了早开堇菜组织培养植株再生体系。结果表明,1) 诱导子叶节和叶柄不定芽诱导的最适培养基为 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,叶片不适合作为直接诱导不定芽的外植体。2) 3种外植体均能诱导愈伤组织,子叶节愈伤组织诱导的时间最短,其次为叶柄,叶片最晚。子叶节和叶柄愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D,诱导率分别为98.3%和96.7%;叶片愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L NAA,诱导率可达88.3%。3) 最适愈伤组织分化培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,分化率为100%。4)不定芽增殖的最佳培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.075 mg/L NAA,增殖率为4.68。 5)再生苗移植到添加1.0 mg/L 6-BA的1/2 MS培养基上,生根率92.3%。6)组培苗移栽到珍珠岩∶河沙∶腐殖质(1∶2∶2)的混合基质时,100%成活,且植株长势好。     

脂肪酸调控奶牛乳腺microRNAs研究进展

脂类是一种可以为动物体储存和提供能量的物质,大量研究证实,日粮中脂类的改变可以改变microRNAs（miRNAs）的表达从而影响机体生命活动。本综述主要概括了脂肪酸对奶牛乳腺miRNAs的调控作用,从奶牛乳腺miRNAs表达特征、调控乳脂合成的miRNAs及外源添加脂肪酸对乳腺miRNAs的调控三个方面进行概述,旨在从转录后调控角度,建立营养物质与乳腺功能的联系,为未来相关研究提供参考。     

Bone metabolic effects of single-dose zoledronate in healthy dogs

Zoledronate, an aminobisphosphonate with potent antiresorptive activity in bone, has the potential for treatment of malignant osteolysis and hypercalcemia in dogs. The purpose of this study was to evaluate the bone metabolic effects of a single dose of zoledronate in healthy dogs. Four skeletally mature, male, intact dogs received a 15-minute i.v. infusion of zoledronate at a dosage of 0.25 mg/kg. Urine N-telopeptide of type I collagen (NTx) excretion decreased significantly from baseline by 76, 63, 77, and 73% on days 7, 14, 21, and 28, respectively (P < .0125). Serum bone-specific alkaline phosphatase (bALP) decreased significantly from baseline by 36 and 42% on days 21 and 28, respectively (P < .0125). No changes were detected in indices of calcium homeostasis (ionized calcium, intact PTH, or urine calcium excretion). Single-dose i.v. zoledronate at 0.25 mg/kg appears to inhibit homeostatic osteolytic activity in healthy, skeletally mature dogs. Prospective studies should assess repeated-dose safety and activity in healthy and diseased animals of various age groups.