扩展青霉基因组DNA五种提取方法比较

为寻找一种适合于扩展青霉基因组DNA的提取方法,比较了固体培养、液体静置培养和液体振荡培养3种培养方式的提取效果,分别采用氯化苄法、蜗牛酶法、CTAB法、SDS法及异硫氰酸胍法提取扩展青霉菌基因组DNA,经DNA质量浓度测定及电泳分析,比较5种方法的差异,并利用扩展青霉的多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase)基因内一段保守序列,设计PCR引物,扩增大小为288 bp的特异目的基因,检测其灵敏性.结果表明:固体培养的方式较适合扩展青霉基因组DNA的提取,另外5种提取方法均能提取出扩展青霉菌基因组DNA,扩增出目的条带,其中氯化苄法和蜗牛酶法所提DNA的纯度均较好,但蜗牛酶法所提DNA量较少.因此,氯化苄法是5种提取方法中最可靠的DNA提取方法,所提DNA浓度高、纯度好、结果稳定,可作为PCR反应的模板进行特异性扩增,且该方法的最低检测限大约为1.01×10-1μg/mL.     

南水北调西线一期工程研究

南水北调西线工程是一项非常宏大的水利工程,工程建设对我国经济发展和社会进步具有十分重要意义。概述了南水北调西线一期工程从论证、超前期规划研究到工程实施的发展过程,介绍了调水工程区地质条件、主要活动断裂及其组合特征,分析了可用水量、存在的主要地质问题以及工程建设对环境和社会的影响,并提出了今后研究应注意的几个问题。     

红树林生态景观型护岸的营造——以广州市大角山海滨公园项目为例

红树林具有独特的景观价值和防护价值。广州市大角山海滨公园项目在红树林防护与公园护岸工程相结合。营造红树林景观方面进行了尝试。本文介绍了大角山海滨公园项目的规划设计、实施和后期管理,拟为其它类似项目提供技术和管理经验。     

化学计量学在化学中的应用进展

化学计量学(Chemometrics)是一门化学与统计学、数学、计算机科学交叉所产生的新兴的化学学科分支。它运用数学、统计学、计算机科学以及其他相关学科的理论与方法,优化化学测量过程,并从化学测量数据中最大限度地提取有用的化学信息。其内容涉及到统计学与统计方法、实验设计与优化、分析信号处理、多元校正、化学模式识别、定量构效关系(QSAR)、数据库及专家系统。在我国的发展已经有20多年的历史,为化学各分支学科特别是分析化学、环境化学、药物化学、有机化学、化学工程等提供了不少解决问题的新思路、新途径和新方法。1化学计量学发…     

金铁锁种子繁殖技术研究

对金铁锁种子繁殖技术进行研究,为其人工引种驯化、规范化种植提供依据。研究结果表明：金铁锁种子千粒重为2．26g,种子无后熟休眠特性,在室温条件下贮藏,寿命至少在2年以上,其种子萌发的最适温度为20～25℃,最适出苗湿度为50％～60％,种子最适覆土厚度为0．5～1．0cm。金铁锁种子发芽率高,种子繁殖是金铁锁大面积人工种植的最佳繁殖方式。     

镜鲤△6脂肪酸脱氢酶CDNA的克隆与表达

利用RT-PCR和RACE方法克隆得到镜鲤Cyprinus carpio肝脏中高不饱和脂肪酸(HUFA)合成代谢的脂肪酸去饱和酶(△6FAD)基因c DNA全序列。结果表明:镜鲤△6FAD基因c DNA全长为1 446bp,开放阅读框(ORF)为1 332bp,编码444个氨基酸。编码的蛋白序列包含FAD全部特征结构区,包括1个细胞色素b5结构域、2个跨膜区和3个组氨酸簇,与其他鱼类的Δ6FAD氨基酸序列具有69.0%~92.0%的同源性。系统树分析显示:与斑马鱼Danio rerio的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测发现:脂肪酸延长酶基因在镜鲤肝脏中表达量最高,背部肌次之,在血液中表达最低。本研究结果为进一步研究镜鲤HUFA的合成途径及调控机理提供了基础资料。     

苦参碱对低钾致兔左心室流出道细胞电生理异常保护作用及其机制

目的探讨苦参碱对低钾致兔左心室流出道细胞电生理异常保护作用及其机制.方法应用常规玻璃微电极细胞内记录技术,观察正常灌流液、低钾灌流液、低钾＋苦参碱（50μmol/L）灌流液对兔左心室流出道慢反应自律细胞最大舒张电位（MDP）,动作电位0相幅值（APA）,50%复极化时间（APD50）,90%复极化时间（APD90）,4...     

盘锦芦苇湿地凋落物土壤微生物量碳研究

基于盘锦湿地生态系统野外观测站芦苇群落6-10月的定位观测资料,分析了芦苇湿地凋落物土壤微生物量C的动态变化.结果表明,盘锦芦苇湿地凋落物土壤微生物量C未收割区大于河岸区;未收割区和河岸区垂直层次变化不明显.并进行了未收割区和河岸区土壤微生物量C与环境因子的相关分析和通径分析.     

基于SLAF-BSA技术的蝴蝶兰花底色关联SNP分子标记开发与验证

为筛选与蝴蝶兰花黄白底色相关的单核苷酸多态性(Single-nucleotide polymorphism,SNP)位点,以'黄金豹'蝴蝶兰(♀)和'白天使'蝴蝶兰(♂)及其杂交后代为实验材料,选择33个分布在5个不同颜色分布类型组群中的黄色底色杂交后代和仅有的2个纯黄色个体作为黄色底色群体,35个分布在对应5个颜色分布类型组群中的白色底色杂交后代作为白色底色群体,分别提取DNA并等量混合后构建2个不同底色DNA混池,采用特异位点扩增片段测序(SLAF-seq)结合BSA技术,对与花底色密切相关的候选标记进行鉴定。结果表明:共获得164 874个SLAF标签,其中含21 031个多态性SLAF标签,多态率为12.76%。SLAF标记在亲本中的平均序列深度为42×,在子代中的平均序列深度为46×。关联分析表明,在阈值0.745 5时,筛选得到15个与花底色相关的SLAF候选标记,具27个SNP位点。采用SNaPshot测序技术在2个亲本、11个子代和4个不同的种质资源中验证SNP位点,筛选发现,Marker35886和Marker70907的2个SNP位点与相关SLAF序列中的SNP位点一致,对花底色的鉴定准确率分别为66.67%和73.33%,组合准确率达93.33%。本研究筛选到的2个SNP位点可作为有效的分子标记位点在蝴蝶兰育种早期进行辅助选择。     

Expression of DNA repair gene ERCC1 and its relationship with PAH-DNA adducts in lung cancer tissues

AIM: To investigate the expression of nucleotide excision repair gene ERCC1 and its relationship with PAH (polycyclic aromatic hydrocarbons)-DNA adducts in lung cancer tissues. METHODS: ERCC1 mRNA expression and the PAH-induced DNA adducts were detected in 150 lung cancer tissues, 120 adjacent lung tissues without cancer cells, 40 benign lung lesions and 40 normal lung tissues. The effects of some exposure factors on the expression of ERCC1 gene and the connection between ERCC1 and PAH-DNA adduct was analyzed. RESULTS: Reduced expression levels of ERCC1 were observed in 46 of 150 (30.7%) lung cancer specimens and 1 of 40 (2.5%) normal lung tissues. Smoking may suppress the expression of ERCC1 gene. The level of PAH-DNA adduct was negatively correlated with the expression of ERCC1 gene, the Spearman coefficient was -0.648, P<0.01. CONCLUSION: ERCC1 is an important nucleotide excision repair gene and may participate in the repair of DNA damage, such as PAH-DNA adduct. Low expression of ERCC1 may play an important role in the development of human lung cancer.