Cloning and Expression of CMKLR1 Gene and Its Correlation with Intramuscular Fat in Goat (Capra hirus)

In order to enrich basic date in goat (Capra hirus) CMKLR1 gene and investigate the correlation between CMKLR1 gene expression and intramuscular fat (IMF) content in muscles, the CMKLR1 gene was cloned from the goat of subcutaneous adipose tissue by RT-PCR, characterized by bioinformatics methods. The expression profiles of CMKLR1 gene of goat in various tissues were constructed liver was benchmark, the GAPDH (GenBank accession No.: AJ431207.1) as a reference gene.Then, the correlation between CMKLR1 mRNA expression and IMF content in muscles was analyzed. The results showed that the CMKLR1 gene CDS of goat (GenBank accession No.: KT165374) was 1 089 bp. Real-time PCR indicated that CMKLR1 was widely expressed in various tissues, including heart, liver, spleen, lung, kidney, adipose, longissimus dorsi, biceps femoris and triceps brachii, and was the highest in lung (P< 0.05). Similar expression variation trend of CMKLR1 was observed between the muscles from 1 to 3 and 24 months old goat, and was the highest in biceps femoris. Reversely, in 8 to 10 months old CMKLR1 was the highest in triceps brachii. The IMF of longissimus dorsi from 24 months old was the highest. Correlation analysis demonstrated that different correlations were observed between expression of CMKLR1 mRNA and IMF content in longissimus dorsi, biceps femoris, and triceps brachii in goat. The CMKLR1 gene did not participate in the deposition of IMF in goats. The research built the theoretical basis for further studies about the CMKLR1 gene.     

地衣芽孢杆菌CP-16脂类水解酶的研究

本试验旨在通过异源表达获得地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)CP-16的脂类水解酶,并探究其在羽毛降解过程中的作用。试验以地衣芽孢杆菌CP-16基因组DNA为模板,扩增脂类水解酶基因,转化入大肠杆菌中表达,获得重组酶L-4。研究重组酶L-4的适宜p H、p H稳定性、适宜温度、温度稳定性以及有机溶剂和金属离子对其相对活性的影响,同时探究其对角蛋白酶K水解天然羽毛角蛋白的作用。结果显示,获得的脂类水解酶基因大小为747 bp,编码248个氨基酸,在大肠杆菌中成功表达出重组酶L-4,其分子质量约为28.3 ku,酯酶活性为0.42 U/m L,适宜p H为6.5,适宜温度为50℃;在p H 6.5~9.5条件下处理30 min相对活性保持80%以上,在低于50℃温度条件下处理30 min相对活性保持70%以上。二价铁离子(Fe~(2+))、钠离子(Na~+)、锰离子(Mn~(2+))、钙离子(Ca~(2+))对重组酶L-4相对活性具有激发作用,钡离子(Ba~(2+))、锌离子(Zn~(2+))、铜离子(Cu~(2+))、镍离子(Ni~(2+))对重组酶L-4相对活性具有抑制作用。当有机溶剂浓度为30%时,重组酶L-4在二甲基亚砜(DMSO)和甲醇中保存97%和85%的相对活性,在丙酮、乙醇中保存45%以上的相对活性,在异丙醇中保存不到20%的相对活性,而在乙腈中相对活性基本完全丧失。用重组酶L-4预处理天然羽毛底物,可提高角蛋白酶K对底物的水解效率,促进率为4.32%。由此可见,脂类水解酶可降解羽毛表层脂质,可在促进角蛋白酶水解羽毛角蛋白中发挥作用。     

牛奶中褪黑素含量的检测方法

褪黑素作为一种多功能活性因子,在畜牧生产中具有十分重要的作用。近年来,有关天然高褪黑素奶的研究大规模开展,对奶中褪黑素含量测定需求也有所增加。目前比较常见的褪黑素检测方法有气相色谱法（GC）、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）、高效液相色谱法（HPLC）、高效液相色谱-质谱联用法（LC-MS）、放射免疫测定法（RIA）、酶联免疫吸附测定法（ELISA）、紫外分光光度法（UV）。本文从原理、特点及优缺点等方面对这几种方法展开介绍,并对各方法的应用进行简单的比较,为后续相关研究与应用提供一定参考。     

A亚群禽白血病病毒GD08株的分离与全基因组序列测定

通过DF-1细胞培养、ELISA抗原检测和特异聚合酶链式反应(PCR)从疑似禽白血病感染的黄羽肉种鸡中,分离并鉴定出1株A亚群禽白血病病毒(ALV-A),命名为GD08。依据A亚群原型株RAV-1前病毒全基因组序列设计并合成3对引物,首次完成了ALV-A中国分离株的全基因组序列测定。测序结果显示GD08株基因组序列全长7 704 bp,其中gp85全长为1 018 bp,预计编码339个氨基酸。序列分析发现GD08株的gp85与国内外各参考毒株的相应核苷酸序列相似性在44.2%～89.4%之间,其中与A亚群MAV-1株相似性最高(89.4%),与J亚群原型株HPRS-103相似性最低(44.2%)。基于ALVgp85核苷酸序列的系统发育进化树表明:GD08株与MAV-1株的亲缘关系最近。结果表明,在J亚群禽白血病普遍流行的情况下,ALV-A引起禽白血病病例在我国华南地区依然存在,提示了我国华南地区地方品种鸡禽白血病的流行呈现复杂化趋势。     

有毒有害物质及污染物在畜牧生态系统的循环与影响

本文介绍了我国现阶段畜牧生态系统的主要类型及其安全特点,归纳了常见有毒有害物质侵入畜牧生态系统的途径,以及所引发的畜禽产品安全问题.分析了有毒有害物质对畜禽产品安全影响的新趋势,并就养殖过程简要介绍了保障畜禽产品安全的基本措施.     

矿区复绿植物猪屎豆种子硬实率与萌发特性的研究

采用不同方法对猪屎豆种子进行处理,并测定了种子的硬实率、吸水率和发芽率.结果表明:猪屎豆种子有较高的硬实率,砂纸摩擦5 min可显著提高种子的吸水率;砂纸摩擦1～7 min均可提高种子的萌发率,摩擦5 min的发芽率达36％,而未摩擦种子发芽率只有11.3％.丙酮处理种子1、2、3、4h不能提高种子的发芽率,时间越长,种子的发芽率越低;过氧化氢处理对种子的催芽没有显著的效果;摩擦后种子在室温(10 ～27℃)、15、25、30、35℃条件下均能萌发;光照对种子的萌发没有显著的影响,说明猪屎豆种子是中光种子.     

广州市南沙红树植物无瓣海桑、木榄人工林生物量的研究

红树林是热带、亚热带海岸潮间带的木本植物群落,它是海湾河口地区生态系统最重要的生产者,对保护海湾河口地区的生态平衡起着十分重要的作用。湿地植物生物量是衡量湿地生态系统健康状况的重要标志。红树林生物量的研究,对于了     

三叉苦叶提取物的抑菌活性研究

以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、绿脓杆菌、青霉、黑曲霉为供试菌种,采用滤纸扩散法、平板稀释法,对三叉苦叶提取液的抑菌活性进行研究.结果表明,三叉苦叶提取液对细菌具有较强抑制作用,对两种真菌无抑菌作用;对细菌的最低抑制浓度(MIC)范围在0.125～0.5 g/mL之间;三叉苦叶提取液的抗菌活性具有热稳定性,并且在pH值3.5～9范围内均有抗菌活性,碱性条件下抑菌作用相对较强.     

燃煤烟气脱硫副产物对桉树生长影响的研究

通过盆栽和大田试验,探讨脱硫副产物及以其为原料制作的土壤调理剂对提高桉树生长量的作用,结果表明:(1)适量施用脱硫副产物可有效提高桉树生长量,将其制作成土壤调理剂施用,可进一步提高产量。(2)供试物量过高或过低会导致肥效下降而引起桉树生长量下降。(3)适量施用供试物可有效防治因桉树微量元素供应不足导致的缺素垂梢病。     

瓜类褪绿黄化病毒山东分离物全基因组序列扩增及分析

为明确分离自山东省寿光市甜瓜上的瓜类褪绿黄化病毒(cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)分离物的全基因组序列信息和遗传变异情况,利用毛形病毒属Crinivirus简并引物进行RTPCR检测,利用RACE技术结合RT-PCR方法克隆CCYV山东分离物2条RNA链的全基因组序列,通过与GenBank中其它地区CCYV分离物的全长序列进行比对分析其同源性,并基于CP基因序列构建系统进化树分析其遗传变异情况。结果表明,山东分离物经RT-PCR检测和测序后确定为CCYV。CCYV山东分离物与其它CCYV分离物的RNA1链和RNA2链的全基因组序列一致性的平均值分别为99.82%和99.88%,且2条链的5′末端均比较保守,没有碱基突变的情况发生;RNA1链3′末端存在2个碱基变异,RNA2链3′末端存在1个碱基变异。CCYV不同地区分离物主要分为3个簇群,其中山东分离物和中国其它地区分离物、日本分离物、苏丹分离物、黎巴嫩分离物和塞浦路斯分离物聚类在一起。研究表明CCYV基因组序列比较保守,该病毒的分化可能与地理来源存在一定的相关性。