核黄素缺乏对1～28日龄北京鸭生长性能、器官指数和血浆生化指标的影响

本试验旨在研究核黄素缺乏对1~28日龄北京鸭生长性能、屠宰性能、器官指数、组织核黄素含量及血浆生化指标的影响。采用单因子完全随机试验设计,选取360只1日龄健康的雄性北京鸭,随机分为3个组,即核黄素缺乏组、采食配对组(人为控制该组采食量与核黄素缺乏组一致)和自由采食对照组,每组12个重复,每个重复10只鸭。核黄素缺乏组试验鸭饲喂核黄素缺乏饲粮(实测核黄素含量为1.38 mg/kg),采食配对组和自由采食对照组饲喂核黄素充足饲粮(在核黄素缺乏饲粮基础上添加10 mg/kg核黄素)。试验期为28 d。结果表明:与采食配对组和自由采食对照组相比,核黄素缺乏组试验鸭的平均日增重、胸肌率和腿肌率显著降低(P0.05),料重比和死亡率显著升高(P0.05),肝脏指数、心脏指数和胰腺指数显著提高(P0.05),血浆核黄素、肝脏核黄素和黄素单核苷酸含量显著降低(P0.05),血浆谷草转氨酶活性及总胆固醇和甘油三酯含量显著提高(P0.05)。由此得出,核黄素是北京鸭生长发育必需的营养素;饲粮中缺乏核黄素可降低1~28日龄北京鸭的生长性能和组织中核黄素含量,可提高肝脏指数并导致血浆总胆固醇和甘油三酯含量及谷草转氨酶活性升高。     

番鸭细小病毒安徽分离株结构蛋白基因的克隆及序列分析

为研究番鸭细小病毒(MDPV)安徽分离株的遗传变异特征,通过PCR扩增获得了MDPV结构蛋白(VP)基因全长序列AH-MDPV-VP,并将该序列与GenBank中登录的12条MDPV和鹅细小病毒(GPV)VP基因序列进行比对。结果显示,AH-MDPV-VP基因全长2 199bp,包括完整的VP1、VP2和VP3蛋白编码区。MDPV与GPV的VP基因部分序列一致,但具有明显的差异。进化分析显示,MDPV安徽分离株与基因重组型MDPV上海分离株SAAS-SHNH为同一分支,亲缘关系较近。同源性分析显示二者核苷酸序列同源性最高,为99.9%,且AH-MDPV-VP与GPV毒株SHFX1201的序列同源性也有89.5%。此外安徽分离株与其他MDPV的VP1、VP2和VP3基因同源性有逐步下降的趋势,而与GPV则相反呈上升趋势。进一步显示MDPV安徽分离株与基因重组型MDPV上海分离株SAAS-SHNH相似,可能为MDPV和GPV基因重组型水禽细小病毒。     

捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析

参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物，以H．contortuss ZJ株的总RNA为模板，进行RT—PCR扩增，成功扩增出H11基因。将PCR产物与pUCm—T载体连接后，转化DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆并测序。序列分析表明，其核苷酸序列与国外报道的H11基因的同源性为99．5％。编码氨基酸序列具有氨基肽酶的保守序列，推测可使虫体不能获得所必需的氨基酸而导致死亡。     

牛疱疹病毒Ⅰ型gB基因的原核表达及产物的抗原性分析

采用PCR方法，以牛疱疹病毒Ⅰ型基因组DNA为模板扩增gB基因，克隆至pGEM—T载体。将以克隆质粒pGEM-T-gB为模板扩增的gBⅠ、gBⅡ和gBⅢ基因片段分别连接至原核表达载体pET32a。获得的重组质粒分别转化感受态细胞BL21（DE3），在IPTG诱导下表达。经SDS-PAGE鉴定，gBⅠ、gBⅡ和gBⅢ基因片段在大肠埃希氏菌BL21（DE3）中以融合蛋白形式获得了表达。以磁化组氨酸蛋白纯化系统对融合蛋白纯化后，Western-blotting和ELISA分析结果表明，这些融合蛋白均与BHV-1标准阳性血清反应，可作为抗原用于牛传染性鼻气管炎ELISA检测方法的建立。     

Clinical characteristics and persistence of bovine mastitis caused by different species of coagulase-negative staphylococci identified with API or AFLP

The coagulase-negative staphylococcal species causing mastitis in lactating cattle were identified and possible differences in the clinical characteristics or persistence of mastitis caused by different CNS were evaluated. The effect of antimicrobial treatment was also assessed. In addition, AFLP-typing of CNS was compared with the phenotypic identification. A total of 133 clinical or subclinical quarter cases of intramammary infection caused by CNS from the practice area of the Ambulatory Clinic of the University of Helsinki were studied. Bacteriological diagnosis was based on biochemical (API) testing. Staphylococcus simulans (43.6%) followed by S. chromogenes (23.3%) were the most common CNS species isolated from the milk samples. Ninety-nine isolates were genotyped using AFLP-analysis. Only 75.0% of S. chromogenes and S. simulans isolates identified with API test were clustered with the type strains of these species. Approximately half of the mastitis cases were clinical, and in the majority clinical signs were mild. The severity and persistence of intramammary infection were unaffected by CNS species. Fifty-nine percent of the quarter cases were treated with antimicrobials, and the rest were left without treatment. Mastitis due to beta-lactamase-negative CNS was treated with penicillin G and that due to beta-lactamase-positive CNS with cloxacillin. Nineteen percent of the isolates were beta-lactamase-positive. The bacterial cure rate for quarters treated with antimicrobials was high, 85.9%, as opposed to only 45.5% for untreated quarters. Bacterial cure rates for the most common CNS species or AFLP clusters were not statistically different. Further studies on identification of CNS species are needed.     

乳酸菌发酵青贮对奶牛产奶量及乳成分的影响

利用从优质青贮饲料中分离鉴定并筛选的2株乳酸菌进行全株玉米的青贮中试试验,玉米青贮30天即可成熟。感官评定的结果表明,乳酸菌处理组的青贮饲料品质比对照组显著提高(p<0.05)饲喂添加乳酸菌的玉米青贮饲料对奶牛的产奶量没有显著影响,但是牛乳中蛋白质和非脂乳固体的含量也显著提高(p<0.05),而对乳脂肪的含量没有影响。     

猪泛素基因与PRRSV GP5基因融合表达质粒的构建及其免疫效果

构建了泛素（ubiquitin，Ub）基因与密码子优化的PRRSVGP5蛋白（optiGP5）基因融合表达质粒pIR—Ub—optiGP5。间接免疫荧光和Western—blot分析表明，重组质粒转染293T细胞后能够瞬时表达。将pIR—optiGP5和pIR—Ub—optiGP5两种质粒DNA肌肉注射免疫BALB／c小鼠后，分别检测小鼠血清中抗GP5抗体、T淋巴细胞的增殖能力以及CTL活性。结果显示，pIR—optiGP5质粒免疫组在二免后可以检测到荧光抗体，而pIR—Ub—optiGP5质粒免疫组一直未检测到抗GP5抗体，但该免疫组的T淋巴细胞增殖指数及针对GP5的特异性CTL反应数值明显高于pIR—optiGP5质粒免疫组。这表明泛素与GP5的融合表达可增强细胞免疫反应。     

黄土高原地形对苜蓿种子产量和质量的影响

对产自甘肃环县黄土高原沟壑区阴坡，阳坡、沟谷阶地和塬地4种地形的苜蓿种子产量和质量进行了研究分析，结果表明，地形对种子产量和质量均有显著影响，其中，阴坡种子产量最低，分别为1．86g/株和311．74kg/hm^2，阳坡单株种子产量最高，为6．41g/株，塬地单位种子产量最高，为650．65kg/hm^2，质量最低种子也产自阴坡，其发芽率只有23％，硬实率却高达66％，地形对种子产量构成因素无显著影响，4种地形的种子产量与其构成因素的相关性完全一致，即除千粒重外，种子产量与其他各因素均存在显著正相关，相关性强弱依次为：单株生殖枝数＞每生殖枝荚果数＞每荚粒数＞千粒重，单株生殖枝数对种子产量贡献最大。     

法氏囊活性肽对鸡体增重及饲料转化率的影响

把不同剂量的法氏囊活性肽 (BS)冻干粉与传染性法氏囊病 (IBD)活苗混合后 ,对 2 1日龄SPF鸡滴鼻点眼 ,同时另选一批同样生长状态的鸡 ,在颈部皮下接种IBD细胞毒油苗 ,同时肌肉注射上述不同剂量法氏囊活性肽 ,观察法氏囊活性肽对鸡生长性能的影响。结果发现 :免疫后7d ,活苗 0 2mLBS组增长最快 ,比免疫对照组多增 82 5 % ,并且饲料报酬高。但从整个试验期看 ,0 4mLBS组增重效果较好 ,比免疫对照组多增 1 9 8% ,并且有较高的饲料转化率。而肌肉注射BS组中 ,高剂量 (0 8mL)BS组的增重效果一直很好 ,比对照组总增重平均多增 7 2 3 % ,并有较高的饲料报酬。这说明滴鼻点眼或是肌肉注射 ,BS都有促生长的作用     

RACE法扩增梅花鹿β-防御素-1(siBD-1)全长cDNA

为了获得梅花鹿β-防御素-1（sika deer β-defensin-1,siBD-1）cDNA全序列,本试验以梅花鹿舌黏膜组织内提取的总RNA为模板,根据前期已获得的siBD-1 cDNA的已知部分序列设计引物,采用5'-RACE和3'-RACE技术分别扩增5'-和3'-末端序列,将此扩增产物克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切鉴定及序列测定与分析。结果表明,成功克隆出长度约为172和299 bp的siBD-1 cDNA 5'-和3'-末端序列,从而得到418 bp的siBD-1 cDNA全序列（GenBank登录号：HM588696.1）,其中包含89 bp 5'-非翻译区（UTR）、192 bp的开放阅读框（ORF）、终止密码子TAA、118 bp的3'-UTR和Poly（A）16。同源性比对结果显示,siBD-1 cDNA与水牛的肠防御素（BEBD）同源性最高,为90.6%,与牛（EBD、LAP、TAP、BNBD-4）、山羊（GBD-1、GBD-2）、驯鹿（reBD-1）、绵羊（sBD-1、sBD-2）和骆驼（caBD-1）的防御素cDNA的同源性较高,分别为83.2%、83.1%、87.3%、87.0%、87.5%、87.5%、84.4%、79.9%、77.1%和70.5%;与马（hoBD-1）和猪（pBD-1）的同源性较低,为60.3%和72.4%;而与人（hBD-2）的同源性最低,为16.0%。siBD-1成熟肽由38个氨基酸残基组成,其中包含9个带正电荷的氨基酸残基。