piggyBac转座子介导的牛A-FABP表达载体的构建与鉴定

【目的】构建以piggyBac(PB)转座子为载体元件,绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,Neomycin(NEO)为抗性基因,alpha-肌动蛋白(α-actin)为启动子的A-FABP基因特异性表达载体pPB-AFABP,并验证其转座活性。【方法】通过PCR方法合成PB转座子骨架序列、NEO-EGFP、α-actin启动子以及A-FABP基因序列,并将各个序列连接构建成转基因载体pPB-AFABP;用脂质体法将供体质粒pPB-AFABP和辅助质粒pCAG-PBase组成的PB二元系统及质粒pPB-AFABP分别转染牛成纤维细胞,通过G418筛选得到转基因细胞。【结果】经过酶切和测序鉴定,载体pPB-AFABP构建正确;PB二元系统的阳性克隆数明显多于转座子载体pPB-AFABP的克隆数;PCR鉴定结果表明,牛成纤维细胞中存在目的基因A-FABP。【结论】成功构建了转基因表达载体pPB-AFABP,且证实PB转座子在牛成纤维细胞中具有较高的转座活性。     

二氯喹啉酸在几种矿物上的吸附特性及其机理

采用批量平衡振荡法,研究二氯喹啉酸在3种不同结构矿物中的吸附特性,并通过FTIR和XRD分析,探讨其吸附机理。结果表明:1)二氯喹啉酸在3种供试矿物中的吸附动力学过程均包含了快速反应阶段和慢速平衡阶段,其吸附动力学曲线均符合准二级动力学方程、颗粒扩散方程和Elovich方程,其中以准二级动力学方程的拟合程度最好,在颗粒扩散方程中的常数项(c值)不为零,这表明颗粒内的扩散速率不是决定二氯喹啉酸在供试矿物中吸附快慢的唯一因素。2)二氯喹啉酸在供试矿物中的吸附等温线均符合线性模型和Freundlich模型。3)FTIR分析表明,二氯喹啉酸通过氢键、电荷–偶极键、络合作用和电荷转移吸附在高岭石中,通过氢键、电荷–偶极键和络合作用吸附在沸石和海泡石中。4)XRD分析表明,二氯喹啉酸在海泡石中的吸附均发生在其表层,而未进入其内层,但在高岭石和沸石中的吸附不仅发生在其表层,而且还能进入其内层。     

上海市规模化猪场猪流感的血清学调查

采用HI和EHSA方法，于1999—2002年间对上海市规模化猪场猪群进行了猪流感的血清学调查，通过对猪血清HI、ELISA试验的同步检测，表明本市规模化猪场猪血清仅对流感病毒的H3、H1亚型易感，能产生特异性血凝抑制现象或显色反应，表明存有针对H3、H1亚型流感病毒的血清抗体，阳性率31．8％至94．9％不等，而且种猪的阳性率及抗体滴度明显高于肉猪和保育猪。     

秦川母牛不同年龄阶段体尺和体重的主成分分析

对陕西蒲城县和渭南市临渭区 5个不同年龄阶段 815头秦川母牛的 5项体尺和体重性状进行了主成分分析。结果表明 ,在不同年龄阶段 ,秦川母牛的 6个性状之间存在着不同程度的正相关 ;其生长发育过程中的第一主成分均为增重因子 ,其次是增高因子和宽度因子。     

茶叶儿茶素提取和纯化研究

选用不同极性的溶剂，综合提取粗老绿茶中的粗脂类和粗儿茶素；用正交试验设计，优化各提取工艺参数，得到得率为２．３２％～２．４％的粗咖啡碱，２．６％～２．７％的脂溶性色素和得率为２３．８７％，含量为４７．５％，儿茶素相对提取率为８３．５％的粗儿茶素制品Ｉ。用活性碳对制品Ｉ进行纯化，得到得率为１５．０６％，儿茶素回收率为８６．９％，含量为６４．０％的儿茶制品Ⅱ，再用硅胶吸附纯化，得到儿茶素回收率为９０．     

华北平原主要农作物灌溉需水量的估算

本文根据华北平原农田水分循环特点,建立了一个农田土壤水分平衡模型.利用研究区内30个气象台站20～40年的气象资料,模拟计算了华北平原主要农作物(冬小麦、夏玉米和棉花)的历年灌溉需水量.在模拟过程中,考虑到华北平原土壤质地层次排列复杂,土壤持水特性不一,将土壤的最大有效含水量划分了5个等级.根据统计排频分析,确定了在干旱年、中等年及湿润年型下冬小麦、夏玉米和棉花的灌溉需水量.并分析了华北平原的1m 土层土壤最大有效含水量为180～240mm 范围时,3种作物多年平均的及不同年型的灌溉需水量在华北平原的区域分布特征.     

农业分子育种 授粉后外源DNA导入植物的技术

一个外源DNA导入植物的技术已在我国棉花和水稻育种上应用多年,成功地转移了不同来源的抗病或其它性状基因。由此得到的稳定遗传新品系在大田中已繁殖7-10代,有的已扩种200公顷。应用这一技术使供体DNA片段加入到栽培种的基因组中,育成一个新品种只需要3-4代,比常规育种6-8代的时间缩短一半。这一技术的要点是：授粉后使外源DNA能沿着花粉管经过的珠心通道进入胚囊,转化尚不具备正常细胞壁的卵、合子或早期胚胎细胞。转化率可高达10#+（-2）,不需要原生质体的制备、细胞培养和再生植株。所用的DNA系带有目的基因的供体总DNA片段（10#+6-10#+7道尔顿）。这一技术的原理可以应用于任何开花植物。但针对不同植物的具体技术细则必需根据植物的花器结构以及授粉受精时间和过程来决定。这一生物工程技术简单,育种工作者容易掌握,而且任何基因源都可能用来进行基因转化,只要基因的结构与受体基因组相容,基因的产物能适应受体植物的代谢。应用这一技术就能筛选出有用的基因改良品种。     

同步授粉对玉米穗粒数和籽粒早期生长的影响

为探明同步授粉(SP)与自然授粉(NP)玉米果穗不同部位籽粒生育特性,以‘郑单958’为材料,设置5和11株/m~2 2个种植密度处理,比较2种授粉方式对玉米穗粒数的影响以及授粉前子房与授粉后籽粒的早期发育动态变化。结果表明:2个密度处理下同步授粉的玉米穗粒数分别较自然授粉2017年提高1.1%和30.0%,2018年提高1.4%和26.2%。自然授粉果穗顶部子房重和籽粒重在整个早期发育过程中均显著低于果穗底部,而同步授粉处理在吐丝至授粉前,顶部和底部子房重量差异随着授粉时间的延长而逐渐减小,使得授粉当天的二者重量差异不显著。同步授粉显著提高授粉后15 d果穗的生长速率。可见,低密度(5株/m~2)条件下同步授粉对玉米穗粒数影响不显著,但在高密度(11株/m~2)条件下使玉米的穗粒数与果穗生长速率显著提高,这可能是由于同步授粉导致果穗顶部与底部子房与籽粒生长差异变小,同化物向"库"端分配增强有关。     

降雨和凋落物对人工杨树林土壤温室气体通量的影响

本研究以科尔沁沙丘-草甸梯级生态系统中人工杨树林为研究对象,于2017年5—10月采用静态箱-气相色谱法,对CO_2、CH_4和N_2O进行了原位观测,探究降雨和凋落物对森林生态系统土壤温室气体通量的影响,实验共设3个处理:"Ⅰ-去除凋落物"、"Ⅱ-维持原状"和"Ⅲ-加倍凋落物"。结果表明:土壤状态较干燥的5月23日及7月20日雨后CH_4吸收值在短时间内均有所增加,土壤温度较高的7月20日雨后CH_4吸收值增长率远大于土壤温度较低的5月23日,土壤状态较湿润的8月4日雨后CH_4吸收值呈明显降低趋势;降雨前后CH_4通量均表现为吸收,且其吸收强度表现为:处理Ⅰ处理Ⅱ处理Ⅲ。生长季N_2O排放与CH_4吸收之间呈现显著的线性负相关关系(P0.05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ处理后生长季CO_2通量平均值分别为243.47、357.14、406.36 mg·m~(-2)·h~(-1),去除凋落物使土壤CO_2通量显著降低30.81%,加倍凋落物则使CO_2通量显著提高13.78%,去除凋落物处理对土壤CO_2通量的降低幅度远大于加倍凋落物对土壤CO_2通量的提高幅度;生长季土壤CO_2的温度敏感性(Q10)表现为:处理Ⅰ(1.070)处理Ⅱ(1.046)处理Ⅲ(1.011),不同凋落物处理下林地土壤CO_2通量对土壤温度响应的差异不显著。     

浅论我省优质稻种植配套模式及栽培要点

通过对部分优质稻基地县优质稻生产情况的调查与分析，归纳了5种配套模式：（1）中熟早籼中档优质稻配迟良晚籼高档优质稻模式，该模型适合于我省优质稻基地县及商品粮基地县种植；（2）中熟中档优质早稻配中良中档优质晚稻模式，适合广大双季稻区种植；（3）优质饲料稻早稻配中高档优质晚稻模式；（4）中稻优质再生稻模式；（5）经济作物配－季高档优质晚稻模式。对于第（3）、（4）、（5）种模式，各地可根据本地市场需求、品种特性和种植面积大小来选择。