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A subtractive cDNA library was developed to study genes associated with bud dormancy release in tree peonies.In order to identify genes that are highly expressed in buds released from dormancy,588 clones were examined by differential screening.Of these,185 clones were selected to be sequenced.A total of 37 unique sequences were obtained of which only 31 sequences have matches in the NCBI database or the Arabidopsis thaliana protein database.Semi-quantitative RT-PCR was used to confirm further the expression... 相似文献
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Zhiqi Zhang Gang Shu Xiaotong Zhu Junming Guo Han Cai Songbo Wang Lina Wang Ping Gao Qianyun Xi Yongliang Zhang Li Yuan Qingyan Jiang 《畜牧与生物技术杂志(英文版)》2014,(4):406-413
Background:Fatty acid(FA) composition is the most important parameter affecting the flavor and nutritional value of the meat.The final and the only committed step in the biosynthesis of triglycerides is catalyzed by diacylglycerol acyltransferase 2(DGAT2).The role of DGAT2 in lipid accumulation has been demonstrated in adipocytes,However,little is known about the effect of DGAT2 on the FA composition of these cells.Methods:To investigate the role of DGAT2 in regulating lipid accumulation,FA composition and the expression of adipogenic genes,we cloned the open reading frame of the porcine DGAT2 gene and established 3T3-L1 cells that overexpressed DGAT2.Cells were then cultured in differentiation medium(DM) without FA,with a mixture of FAs(FA-DM),or containing a ~(13)C stable isotope-labeled FA mixture(IFA-DM).The FA composition of adipocytes was analyzed by gas chromatography-mass spectrometry and gas chromatography-isotope ratio mass spectrometry.Quantitative PCR and western blotting were employed to detect expression of adipogenic genes in 3T3-L1 adipocytes cultured with FA-DM for 12 d.Results:The triacylglyceride(TAG) content was significantly higher in 3T3-L1 adipocytes overexpressing DGAT2 than in control cells.When cultured in DM or FA-DM for 12 d,cells overexpressing DGAT2 showed a higher proportion of unsaturated FAs(C16:1 and C18:1).However,when cells overexpressing DGAT2 were cultured with FA-DM for30 min,the FA composition was almost identical to that of controls.Further,the proportion of stable isotope-labeled FAs were similar in 3T3-L1 adipocytes overexpressing DGAT2 and control cells cultured in IFA-DM for 12 d.These results collectively indicate that the higher proportion of mono-unsaturated FAs,C16:1 and C18:1,may originate from de novo FA synthesis but not from the uptake of specific FAs from the medium.This hypothesis is further supported by evidence that both mRNA and protein expression of genes involved in FA synthesis(ACACA,FASN,SCD1,and A-FABP? 相似文献
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玉米品种早期抗旱性分析 总被引:6,自引:1,他引:6
对山东省主推的9个玉米品种进行了萌发期PEG模拟水分胁迫试验。结果表明:水分胁迫对每个玉米品种的发芽势、发芽率、胚根长、胚根干重等都有影响,但不同杂交种在抗旱性上存在明显差异。本研究使用隶属函数法对参试材料抗旱性进行了定量评价,其中莱农14、农大108、登海701为早期典型抗旱型品种;浚单20、金海5号、青农105、中科11为早期较抗旱型品种;登海662、郑单958为早期不抗旱型品种。其它各抗旱筛选指标中,种子萌发抗旱指数与隶属函数对品种抗旱性分析结果较为一致。 相似文献
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应用线粒体DNA中的NADH脱氢酶亚基Ⅰ(ND1)基因作为分子标记,对我国甘肃省景泰和平凉地区10个绵羊源脑多头蚴进行分析,构建系统进化树,分析其种内变异.结果表明,所有多头带绦虫(T.multiceps)分离株均成功扩增出约0.5kb的ND1基因片段.序列分析显示,去除引物序列后多头带绦虫的ND1基因片段长为488bp,可以分为9类,共有22个核苷酸变异位点,变异率为0.20%~2.66%.基于ND1序列的系统进化树表明所有T.multiceps分离株构成1个分支,可分为3个亚群,国内分离株分别处在不同的亚群中.国内分离株中除了与已知的遗传变异型Tm1(AY669089/Tm-JT081204/Tm-JT090331)和Tm3(DQ077820/Tm-JT080526)相同外,还存 在新的遗传变异型(Tm-JT081008/Tm-JT090603/Tm-JT090115-2),独立为一支,与其他分离株亲缘关系较远;表明ND1基因片段适合作为研究T.multiceps分离株种内变异的分子标记. 相似文献
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为原核表达Tml6和Tm18重组蛋白,本研究以自然感染羊源脑多头坳原头节基因组DNA为模板分别扩增Tml6和Tm 18杭原基因全基因片段,测序鉴定后合成其开放阅读框架DNA片段,将基因组序列中的内含子去除并对其稀有密码子进行改造优化,构建重组表达质粒pGEX-Tm 16和pGEX-Tml8.转化大肠杆菌BL21后以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物并进行纯化.结果显示:在大肠杆菌中表达出带有GST标签的大小约为39.6 ku和39.4 ku的重组蛋白,经谷胱甘肤琼脂糖树脂纯化得到高纯度的可溶性的GST-Tm 16及GST-Tml8重组蛋白,western blot分析表明重组蛋白均能够被兔抗GST单克隆杭体特异性识别. 相似文献
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为探明云南烟草上烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus, TMV)的群体遗传多样性特征, 本研究使用TMV外壳蛋白(coat protein, CP)基因的特异性引物对采自云南各烟区的疑似烟草花叶病样品进行检测, 通过克隆测序获得138个TMV CP基因序列, 对其进行了一致性比对, 及系统发育、错配分布、遗传变异、群体多样性等分析。变异分析显示, 138条CP基因序列共有变异位点数122个, 占总位点数的25.42%, 变异类型只有核苷酸替换, 核酸多样性为0.018, 单倍型多样性为0.970;一致性比对结果显示, 138条序列的核苷酸和氨基酸序列一致性均为96%~100%; 重组分析未检测到重组信号;对来自云南烟草, NCBI上其他地区烟草及云南地区其他寄主的TMV分离物的CP基因进行系统发育分析, 结果显示, 所有TMV分离物在进化上可分为4个组, 本试验获得的分离物分布在1、2、3组, 其中只有来源昭通地区的分离物倾向于聚成簇, 表明云南烟草TMV分离物的适应性进化受地理适应性所驱动, 与寄主适应性基本无关;错配分布分析显示, 云南烟草TMV群体呈多峰分布, 表明该群体近期未经历群体扩张事件; 群体间遗传分化分析结果表明, 除昭通和曲靖烟草TMV群体与其他TMV群体之间很容易发生遗传漂变促使群体发生遗传分化外, 其余大部分TMV群体之间的基因流都可以抵制遗传漂变。本研究首次报道了云南各烟区TMV分离物群体遗传变异情况, 研究结果可为TMV的抗病育种和制定更为有效的防治策略提供重要参考。 相似文献