PRRSV重组N蛋白表达、纯化及间接ELISA检测试剂盒的研制

采用RT-PCR扩增出大小409bp猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因（PRRSV N gene）,将该基因克隆到表达载体pGEX-KG,构建重组表达载体pGEX-KG-N,转化表达菌株BL21（DM3）诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,重组N蛋白获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为41 000,并具有良好的免疫学活性。扩大诱导培养,收集菌体,提取包涵体,用GST-Protein Purtification Kit亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳检测纯度达到90%以上,可满足诊断抗原质量要求。用纯化PRRSV重组核衣壳蛋白GST-N为包被抗原,建立检测PRRSV血清的间接ELISA诊断方法,并组装ELISA试剂盒。优化后抗原最适包被质量浓度为2.5mg/L;血清最适稀释度为1∶100;对血清样本检测临界值为0.224;与美国IDEXX公司的HerdChek ELISA试剂盒符合率为92%,特异性为95%,敏感性为90%;与猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒等常见猪繁殖障碍病标准阳性血清无交叉反应。ELISA试剂盒批内和批间变异系数分别为3.44%～6.34%和5.04%～7.64%。置4℃条件保存12个月,试剂盒稳定性无明显改变。该试剂盒对350份临床疑似血清检出率为88.6%。研制的ELISA试剂盒为PRRSV临床血清抗体检测及流行病学调查提供了技术手段。     

不同宿主来源犬瘟热病毒的分离及致病相关基因序列分析

利用Vero-DST细胞从死亡犬、狐狸肺、脾内分离到4株犬瘟热病毒-CDV-TM-CC、CDV-Dog-SCh、CDV-Fox-SY、CDV-Fox-WF,在Vero-DST细胞上传5代没有细胞病变,5代细胞培养物经电镜、间接免疫荧光及PCR鉴定为阳性。与本实验室保存的CDV-Monkey-BJ进行基因测序,并对与致病相关的F蛋白、V蛋白进行分析,F蛋白分析5株毒具有6个潜在N-末端糖基化位点,与强毒株同源性在92%～99.7%,与疫苗株不高于93.3%,在F1亚基内有7个特有氨基酸位点,这可能与其对灵长类致病有关。V蛋白分析表明,其与强毒株同源性在94%～99.7%之间,而与疫苗株不高于93.3%,CDV-Monkey-BJ C272R突变使其Zn结合能力丧失。试验结果显示,所有分离株均为强毒株,不同宿主毒株序列存在差异,值得进一步研究。     

微生物饲料添加剂的主要功能及其研究进展

益生菌是当摄入量足够时能对机体产生有益作用的活性微生物.人们常把应用于畜牧业生产上的益生菌称为微生物饲料添加剂.以往研究表明,微生物饲料添加剂具有维护动物肠道健康、缓解不良应激、改善畜舍环境、调节机体脂肪代谢和改善畜产品品质的功能.还有研究者认为,微生物饲料添加剂具有替代抗生素功能的作用.本文旨在就微生物饲料添加剂的主要功能及其研究进展进行综述,为其今后在畜牧业生产上的科学应用及相关研究提供参考.     

紫苏籽提取物对育肥牛生产性能和免疫功能的影响

本研究旨在探讨在饲粮中添加紫苏籽提取物(PSE)对育肥牛生产性能和免疫功能的影响.选择体重为(376.7±37.0) kg的西杂阉公牛19头,随机分为2组,对照组10头,PSE组9头.对照组饲喂基础饲粮,PSE组饲粮为基础饲粮中添加0.03% PSE.结果表明:1)在育肥牛饲粮中添加PSE使日增重和干物质采食量分别提高...     

放牧强度对混播草地群落数量特征的影响(简报)

放牧强度对人工草地群落数量特征的影响,国内外学者已有报道^[1~2],而有关青藏高原的研究则很少^[3]。Reategui^[4]认为,载畜量增大将使丛生禾草向矮生禾草演替,而导致草地退化。另外,放牧强度对植物群落组成和生物多样性也有很大影响,随着放牧强度的增加,一些适口性高、再生性强、不耐牧的种类减少,而适口性差、耐牧的种类增多^[5]。本试验研究放牧强度对垂穗披碱草(Elymus nutans)/星星草(Puccinellia tenuflora)混播草地群落数量特征的影响,旨在为人工草地的放牧利用提供科学依据。     

植物病原真菌尖孢镰刀菌检测与定量研究进展

尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)是一种危害严重的土传病原真菌,被列为世界十大植物病原真菌之一.该菌能够侵染棉花(Gossypium hirsutum)、大豆(Glycine max)、西瓜(Citrullus lanatus)、香蕉(Musa nana)、番茄(Lycopersicon esculen...     

犬黄嘌呤尿结石症的诊断:36例临床病理报告

36只尿石症病犬表现体温下降,剧烈呕吐,食欲废绝,血清尿酸、肌酐、尿素氮升高,尿沉渣中有众多结晶体析出,经尿液和血清生化指标测定、B超探察、X线影像并结合饮食结构调查,确诊为黄嘌呤结石症。     

不同外植体对多年生黑麦草愈伤组织诱导的影响

对多年生黑麦草的3个品种进行愈伤组织诱导,选取成熟种子、成熟胚、胚轴、胚根4种外植体。结果表明,胚轴、胚根诱导效果较差,成熟胚在愈伤组织的诱导率、鲜重及愈伤质量方面均优于成熟种子。2,4-D浓度在2~4mg/L,6-BA浓度为0.025mg/L时有利于成熟胚诱导产生愈伤组织;成熟种子为外植体时,2,4-D浓度在5~8mg/L,6-BA浓度在0.025mg/L或0.2mg/L有利于成熟种子诱导产生愈伤组织。2,4-D浓度为2mg/L,6-BA浓度为0.5mg/L时成熟胚和成熟种子诱导的愈伤组织鲜重均达到最大。特拉华在愈伤组织的诱导率、增殖速度及愈伤质量方面表现较优,托亚次之,尤文图斯较差。AC和LH有利于植株的再生。     

蜂胶高生物活性黄酮组分的研究

本文探讨了蜂胶总黄酮中最具活性的黄酮类物质的提取分离、官能结构特征与功能关系、可能的功效,进而提出了如何看待蜂胶总黄酮含量高低的问题.