小熊猫源犬瘟热病毒全基因序列的克隆及序列分析

本研究对军事兽医研究所病毒二室分离驯化后的小熊猫源犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)基因组进行全序列测定,并对其基因组特征及H基因遗传稳定性进行比较分析。根据GenBank公布的犬瘟热病毒全长基因组序列设计合成17对特异性引物,以小熊猫源犬瘟热病毒总RNA为模板,RT-PCR进行分段扩增,并克隆到pEASY-Blunt Simple载体中,经测序、拼接获得全长cDNA序列。结果显示,小熊猫源犬瘟热病毒全基因序列与GenBank登录号分别为AF014953、AY445077、AY542312、AY466011、AY386316、AF164967、EU716337、EU726268、AY443350、AB474397、GU138403和AY649446的12个不同毒株全基因序列的同源性分别为86.6%、92.4%、92.5%、92.5%、94.3%、96.3%、95.9%、87.1%、94.5%、92.3%、87.4%和94.6%,与标准强毒株A75/17株(AF164967)的亲缘关系最近,全基因同源性达96.3%,但与疫苗株Onderstepoort(AF014953)亲缘关系相对较远,同源性为86.6%。小熊猫源犬瘟热病毒H基因与其他不同地区具有代表性的30株CDV进化树分析显示,小熊猫源犬瘟热病毒属于Asia Ⅰ型,H蛋白中309－311位氨基酸残基所形成的潜在糖基化位点,为疫苗株没有而野毒株所共有的,并且可能与病毒的免疫原性有关。因此,致弱的小熊猫源CDV在预防免疫的针对性上可能强于已有的疫苗株。     

浅析集约化鸡场鸡肾脏病变的病因及防治

禽痛风是由于家禽体内蛋白质代谢障碍产生大量的尿酸或肾脏受损伤导致尿酸及尿酸盐排泄障碍,大量尿酸及尿酸盐在肝脏、胃肠、肠系膜、心脏、输尿     

扁蓿豆的抗性研究进展

综述了扁蓿豆（Medicago ruthenica）抗旱性、耐盐性、抗寒性和抗病虫等四方面的研究工作进展,包括植物学特性、种子特性、物候期及根、茎、叶的生长发育、利用价值及分布和抗逆性方面的研究概况。并针对扁蓿豆研究存在的问题,提出今后研究应当集中在扁蓿豆的适应区域、抗逆基因的筛选、荚果开裂问题以及进一步的建立栽培草地等方面,以期对我国扁蓿豆种质资源的收集、保存、开发利用、新品种选育及北方生态建设提供理论依据。     

AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达

利用杆状病毒表达系统对Asia Ⅰ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VPl基因在Sf9昆虫细胞中进行表达,为研究Asia Ⅰ型FMDV VP1蛋白功能及建立Asia Ⅰ型FMDV血清学诊断方法奠定基础.采用PCR方法从pGEM-T-Easy-Asia Ⅰ型VP1质粒中扩增VP1基因,将其插入杆状病毒转座载体pFastBacHTA,构建的重组质粒pFast-BaeHTA-VPl再转入DH10Bae感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Baemid-VPl,然后转染Sf9昆虫细胞.PCR鉴定证实VP1基因正确地插入到Bacmid中,成功构建了杆状病毒重组质粒Baemid-VP1,SDS-PAGE和West-ern-blotting检测结果表明,VP1基因在Sf9昆虫细胞中表达出约26.5 ku的VP1蛋白.将可溶性表达的融合蛋白用Ni-NTA亲和层析方法进行纯化,通过ELISA分析,能特异性地检测出Asia Ⅰ型口蹄疫病毒阳性血清.Asia Ⅰ型FMDV VP1基因在杆状病毒表达系统中的成功表达为Asia Ⅰ型FMDV VP1蛋白的抗原性及血清学抗体水平检测研究奠定了基础.     

流感病毒诱导细胞凋亡的相关因子研究进展

流感病毒能够引起多种禽类、哺乳动物、以及人的流行性感冒。禽类是流感病毒的主要自然宿主，禽流感因造成的经济损失重大，已被国际兽疫局（OIE）列为A类传染病，并被列入国际生物公约动物类传染病名单。至今，国内外已相继报道了流感病毒与细胞凋亡存在密切关系，1993年，Takizawa等人首次证明流感病毒感染可诱导宿主细胞凋亡，从而为揭示流感病毒致病机理迈出了重要的一步，但是流感病毒致病的生物学机理至今还是未能研究清楚。而流感病毒诱导凋亡的相关基凶或蛋白及其分子机制也处于探索阶段。本文将针对这些相关因子的最新研究进展做简要综述，从而有助于增进对流感病毒致病机制的深入研究。     

磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及特性鉴定

采用重氮化法合成磺胺二甲嘧啶(SM_2)-人血清白蛋白(HSA)免疫抗原和SM_2~-卵清白蛋白(OVA)包被抗原。经紫外光谱扫描法确认SM_2与载体蛋白偶联成功；经计算SM_2与HSA、OVA的结合比分别为9：1和15：1。利用杂交瘤技术和有限稀释法经过5次亚克隆,得到三株特异性稳定分泌SM_2抗体的杂交瘤细胞,经鉴定该单克隆抗体免疫球蛋白亚类为IgG_1,为入链,分子量为162Ku,染色体数目90条左右,亲和常数为6．1×10~(12)M~(-1)。与其他四种磺胺药和两种载体蛋白HSA、OVA均无交叉反应。     

黑龙江省中国荷斯坦奶牛群体分娩月龄和分娩月互作对产奶量影响的研究

在应用现场奶牛的产奶记录进行公牛或母牛的遗传能力评估时 ,要对影响产奶记录的种种环境因素进行校正 ,产奶量的变化一般和遗传、分娩月龄、分娩月份、干乳天数、空怀天数、牛群、年度、地域及其它要因有关。有人指出其中分娩月龄和分娩月份占有重要位置 ,而且两者之间存在互作。我国在产奶记录的校正开展了一些工作 ,做过泌乳天数 ,胎次 ,产犊月份校正系数的估计 ,黑龙江省还开展了产犊月龄校正系数的研究 ,但是同时对分娩月龄和分娩月进行校正的研究报道较少 ,本研究的目的是对过去 17年间黑龙江省中国荷斯坦奶牛群泌乳记录用动物模型进…     

三聚氰胺对小鼠肾脏病理损伤的初步观察

为观察三聚氰胺对小鼠肾脏病理损伤情况,以浓度700、350、175mg/kg体重给28天昆明小鼠连续灌胃,玉米油做溶剂,观察肾脏组织病理学变化及细胞化学变化。结果发现,三聚氰胺可引起小鼠肾脏肾小管管腔中出现黄色或棕黄色结晶,肾小管上皮细胞变性、坏死,细胞核固缩,肾小管管腔扩张,上皮细胞脱离基底膜。试验表明高剂量的三聚氰胺可引起小鼠肾脏的严重损伤,造成肾小管上皮细胞变性、坏死,特征性的变化是肾小管管腔中三聚氰胺产物结晶沉积,此变化具有证病意义。     

Epidemiological Cut-off Values (ECOFFs) of Salmonella from Chicken Intestinal Tract for Three Animal-specific Antibiotics

In order to establish epidemiological cut-off values (ECOFFs) of Salmonella for three animal-specific antibiotics (florfenicol,apramycin and danofloxacin) in Guangdong province.A total of 166 strains of Salmonella isolates from chicken intestinal tract from veterinary clinics and farms in Guangdong province in 2017 were recruited in this study,the minimum inhibitory concentrations (MIC) of florfenicol,apramycin and danofloxacin were determined in triplicate for each bacterial strain using the agar dilution method on Mueller-Hinton agar plates according to the CLSI reference method (CLSI-M100-S26).ECOFFs were calculated for the MIC data sets by application of nonlinear regression analysis,NRI(normalized resistance interpretation) and ECOFFinder software.MIC distribution of florfenicol,apramycin and danofloxacin against Salmonella from 2 to >512,4 to >512 and 0.015 to 64 μg/mL,respectively.MIC₅₀ and MIC₉₀ for apramycin,florfenicol and danofloxacin were 256 and >512,16 and >512,0.5 and 16 μg/mL,respectively.MIC distribution of apramycin and florfenicol presented obvious unimodal shape,while that of danofloxacin was a discontinuous multi-peak.The ECOFFs of florfenicol,apramycin and danofloxacin were recommended to be 16,16 and 0.125 μg/mL,respectively.In present study,the ECOFFs of Salmonella from chicken intestinal tract for apramycin,florfenicol and danofloxacin were determined,which provided scientific basis for resistance surveillance.     

规模化肉鸭场污水污染物排放及其影响分析

为了解规模化肉鸭场污水污染物排放及其对水环境污染现状,本试验选择河南省5个有代表性的规模化肉鸭场,对其所排放污水以及附近水体中的化学需氧量(COD)、五日生化需氧量(BOD5)、氨氮(NH3-N)、总磷(TP)、悬浮物(SS)等污染物含量进行了分析,并利用单因子污染指数法对其污染程度进行评价.结果表明:鸭场排放污水中COD、BOD5、NH3-N、TP、SS的平均含量均超出《畜禽养殖业污染物排放标准》.其中COD、BOD5、NH3-N、TP属于较严重污染,而SS属于严重污染.鸭场下游水体中COD、BOD5、NH3-N、TP的平均含量均高出《地表水环境质量标准》,其中COD、BOD5、TP污染较严重,而NH3-N为严重污染.因此,规模化肉鸭场污水排放污染物指标全部超标,并且排放的污水对周围水环境造成不同程度的污染.