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正交设计优化狭叶坡垒ISSR-PCR反应体系 总被引:1,自引:1,他引:0
以狭叶坡垒DNA为模板,利用正交试验分别对ISSR-PCR反应的MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq聚合酶浓度、引物浓度、模板DNA浓度进行了优化,并通过梯度PCR确定最佳退火温度和循环次数,最终确定狭叶坡垒最佳反应体系及扩增条件为:25 μL体系中1×PCR buffer,2 mmol/L MgCl2,0.25 mmol/L dNTPs,0.04 U/μL Taq聚合酶,0.2 μmol/L引物,4 ng/μL DNA模板;最佳扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,53℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃最后延伸7 min。 相似文献
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桂林植物园地被植物种类繁多,据初步统计,园内地被种类达328种,隶属89个科,从园林观赏的角度对其进行了评价,对部分外来引入品种在园内的适应性进行了报道,探讨了地被植物的运用方式,并推荐8种用于园林绿化中。同时,就目前桂林市园林中地被植物品种较为单一的问题提出了一些建议。 相似文献
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以30个茶花品种为试材,采用5因素4水平正交实验以及单因素优化试验方法,研究Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度和模板DNA浓度对ISSR-PCR指纹图谱条带清晰度的影响,以进行茶花品种ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选。结果表明:茶花品种ISSR-PCR最适扩增条件为25μL反应体系中,Mg2+3.0mmol/L、dNTPs 0.2mmol/L、引物0.3mmol/L、Taq DNA聚合酶0.5U、模板DNA 80ng以及52.1℃退火温度;试验从100个ISSR引物中筛选出12个适用引物;并对12个ISSR引物的多态性和稳定性进行了检验。 相似文献
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广西境内的秋海棠属植物资源丰富,开发应用前景广阔。通过对广西野生秋海棠的调查和栽培实验,应用层次分析法和熵权法,对60种广西野生秋海棠进行综合评价,为秋海棠的引种驯化和园林应用等方面提供科学依据。评价体系由观赏特性、生物学特性及开发潜力3个准则层及16个评价因子构成。研究发现:1)伞叶秋海棠等8种植物具有观赏价值高、抗逆性强、适宜范围广、应用方式多样等特点,综合评级为I级;2)黑峰秋海棠等14种植物具有适应性强、养护简单等特点,开发潜力较好,但观赏性稍逊一筹,综合评级为II级;3)桂南秋海棠等18种植物具有养护简单、生长势强等特点,开发应用价值一般,综合评级为Ⅲ级;4)大新秋海棠等13种植物在适应性方面较低,在园林推广应用方面不占优势,但可在特定领域展现出自身价值,综合评级为Ⅳ级;5)崇左秋海棠等7种植物的园林应用价值较低,适应性也较差,可作为种质资源保存在基因库中,综合评级为Ⅴ级。研究建立的野生秋海棠植物资源综合评价体系,对广西乃至全国的野生秋海棠资源开发和利用具有重要的理论和现实意义。 相似文献