HC Pro 3个参与抑制RNA沉默氨基酸位点的鉴定

 马铃薯Y病毒属病毒编码的辅助成分-蛋白酶（helper component-proteinase,HC-Pro）是第一个被鉴定的RNA沉默抑制因子。本研究通过定点突变的方法获得了马铃薯A病毒（Potato virus A,PVA）HC-Pro的3个突变体, 利用农杆菌共浸润的方法分析了这些突变对HC-Pro抑制RNA沉默活性的影响。与野生型HC-Pro处理相比,Phe⁶、Asn¹¹ 缺失突变体的处理中绿色荧光减弱,而Ile²⁵⁰-Gly²⁵¹-Asn²⁵²（IGN）基序中的Ile和Gly分别突变为Asp和Glu的处理中观察不到绿色荧光。该结果表明Phe⁶、Asn¹¹ 和IGN²⁵⁰  3个位点均参与调控HC-Pro的抑制RNA沉默活性。     

奶牛乳房炎6种主要致病菌多重PCR检测方法的建立及初步应用

为了同时检测奶牛乳房炎中的6种主要致病菌,本试验分别针对金黄色葡萄球菌的nuc基因、无乳链球菌的ef-tu基因、绿脓杆菌的eta基因、停乳链球菌的16srRNA基因、致病性大肠杆菌的Phoa基因、牛支原体的opp D/F基因设计合成了6对特异性引物.在建立并验证单一PCR的基础上,构建多重PCR反应体系,对其反应体系进...     

抗虫耐除草剂玉米杂交种瑞丰1号-双抗12-5对3种主要鳞翅目害虫的抗性

本试验用田间接虫和室内生测方法,研究国产转基因玉米杂交种瑞丰1号-双抗12-5(RF1-12-5)对3种主要的玉米鳞翅目害虫亚洲玉米螟、黏虫、棉铃虫的抗性。田间结果表明:RF1-12-5对亚洲玉米螟、棉铃虫的抗性在相应的鉴定时期均达到高抗水平,RF1-12-5心叶期对黏虫的抗性为抗性水平。室内鉴定结果表明:心叶期,RF1-12-5对亚洲玉米螟抗性起效较慢,饲喂48~72 h后校正死亡率分别为63.97%、77.14%、88.00%;吐丝期饲喂48 h后校正死亡率达100%,抗性显著;籽粒期饲喂24、48、72 h后校正死亡率分别为68.86%、83.96%、98.03%。心叶期饲喂24 h后对黏虫基本无抗性效果,但48、72 h后的校正死亡率分别达到94.64%、100%。吐丝期饲喂24 h后对棉铃虫抗性达到87.59%,48 h后对棉铃虫校正死亡率达到100%,抗性较强。总体来看,RF1-12-5田间对亚洲玉米螟、棉铃虫抗性较高,对黏虫抗性略低;室内心叶期对亚洲玉米螟抗性较弱,但在其他时期对亚洲玉米螟、黏虫、棉铃虫均表现了较好的抗性。因此RF-12-5具有推广应用的潜力。     

中国西北地区甜樱桃设施栽培问题及对策

2017～2018年,针对中国西北地区设施甜樱桃栽培过程中存在的问题进行了调研,从选址建设、设施结构、品种选择、配套技术管理等方面提出了建议。     

微生物菌肥对秦薯5号产量、品质及经济效益的影响

2022年,在延安市安塞区以甘薯主栽品种秦薯5号为材料,以施用传统化肥为对照,探讨化肥与微生物菌肥配施及单施微生物菌肥对甘薯产量、品质及经济效益的影响,从而为当地甘薯的提质增效栽培提供参考。结果表明：施用微生物菌肥增产效果明显;单施微生物菌肥1 500 kg/hm²时,甘薯单株结薯数显著高于对照,但与单施微生物菌肥1 200 kg/hm²处理差异不显著;单施微生物菌肥处理的单株薯质量显著高于其他处理;施用微生物菌肥对甘薯的商品率以及干物质率没有明显影响。化肥与微生物菌肥配施以及单施微生物菌肥都显著提高了秦薯5号的粗淀粉、还原糖含量;在传统化肥减量40%+900 kg/hm²菌肥以及单施微生物菌肥条件下,甘薯的蛋白质含量和可溶性糖含量均显著增加;而单施1 200 kg/hm²微生物菌肥处理的经济效益最高。综合分析,本试验条件下,秦薯5号的栽培以单施1 200 kg/hm²微生物菌肥比较合适。     

新形势下中国林产品贸易面临的问题及对策研究

分析了我国林产品贸易现状,总结出新形势下我国林产品贸易所面临的3大问题:林产品贸易表现为进口市场对外依存度大、出口市场集中度高的特点;林产品贸易结构有待调整,非木质林产品市场份额不足,发展步伐缓慢;林产品出口贸易发展受到多重贸易壁垒的制约,呈现出传统贸易壁垒和新兴绿色贸易壁垒共存的局面。对此提出了改变发展模式、冲破贸易壁垒、调整产业结构等应对措施和建议。     

产气荚膜梭菌多重PCR检测方法的建立及初步应用

旨在建立一种高效、快速、准确的检测产气荚膜梭菌并分型的多重PCR方法。根据GenBank上公布的产气荚膜梭菌α、β、ε、ι毒素的基因序列,设计、合成4对针对4种毒素的特异性引物。并通过改变引物浓度、退火温度等反应条件,对多重PCR方法进行优化。结果显示,对产气荚膜梭菌α、β、ε、ι毒素基因均扩增出了预期大小的目的条带,而金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌、停乳链球菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌均未出现条带;当核酸质量浓度降至12.5μg/L时,仍可清晰地扩增出α、β、ε、ι毒素基因对应条带。在核酸质量浓度降至3.12μg/L时,仍可观察到α与ε毒素基因扩增出的条带。在核酸质量浓度降至0.78μg/L时,α毒素基因对应的条带仍可隐约可见。应用该方法对68份疑似产气荚膜梭菌导致猝死的牛鼻拭子样进行检测,其中有52份样品检测结果显示为C型产气荚膜梭菌,剩余16份样品均为非产气荚膜梭菌,阳性率为76%。结果表明,本研究建立的多重PCR方法特异性强、灵敏度高重复性好,可准确地鉴别区分5种类型的产气荚膜梭菌。在采样时仅需采取疑似病畜的鼻拭子,操作简便、快捷、安全。对临床检测病畜的产气荚膜梭菌病有较为重要的...     

VDAC1参与调控BCG感染RAW264.7细胞凋亡

旨在研究电压依赖性阴离子通道(voltage dependent anion channel1,VDAC1)对卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin, BCG)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡的调控作用及其机制。设计并合成VDAC1的小干扰RNA(si-VDAC1)转染小鼠巨噬细胞RAW264.7后,再用BCG感染。后续采用MTT法检测RAW264.7细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率、线粒体膜电位及细胞内ROS水平,进而通过实时荧光定量PCR和Western blot检测凋亡相关因子Cyt C、Caspase-3、PARP1、Caspase-9基因(mRNA)及其蛋白的表达。随后,通过使用VDAC1寡聚抑制剂VBIT-4对RAW264.7进行孵育2 h后感染BCG,并采用免疫荧光染色技术观察Caspase-3和Western blot检测凋亡相关因子Cyt C、Cleaved-Caspase 3、Cleaved-PARP1、Cleaved-Caspase 9的含量变化。BCG感染巨噬细胞12 h后,与对照相比,BCG感染后小鼠巨噬细胞存活率约下降至50%,而...     

上层土壤厚度对模拟指流水分运动的影响

“上细下粗”的层状土壤中有可能产生指流,在有指流产生条件下,上层土壤的厚度是影响指流发展特征的主要因素之一。该试验通过在下层砂中模拟指流来研究上层土壤厚度对层状土壤中水分运动的影响。结果表明：指流域内的湿润锋到达一定深度的时间随着上层土壤厚度的增大而增加;稳定入渗率随着上层土壤厚度的增大而减小;并得出稳渗率和上层土的厚度呈线性关系;分别用经验函数模型和连续函数模型来模拟层状结构土壤水分的入渗,发现2种模型有各自的优缺点：经验函数模型虽然计算得到的整体误差较小,但在理论上不能很好的解释层状土壤水分入渗过程;连续函数模型相比较经验函数模型的缺点在试验初期误差较大,但该模型属于连续函数模型,符合实际的层状水分入渗过程。