茶树RAPD反应系统和扩增程序优化

以龙井43为材料,使用国产PCR仪,对茶树RAPD分析中影响PCR扩增结果的因素进行了研究,确定了茶树RAPD的最适反应系统和扩增程序,即在25μl反应体系中,含25～50ng模板DNA、2mmol／LMgCl2、各0．2mmo／LdNTPs、0．2μmol／L引物和0．5～1．0UTanDNA聚合酶;扩增程序为：94℃预变性180s,94℃变性60s,38℃退火90s,72℃延伸120s,共进行40～45个循环,最后72℃延伸300～600s,这样可以取得较好的扩增结果。     

茶树新梢cDNA文库的构建和ESTs测序成功率初步分析

报道了国内第一个茶树cDNA文库的构建及其EST测序成功率分析。以Trizol一步法从龙井43春茶新梢中提取总RNA,分离纯化富含Poly (A)的mRNA,LD-PCR反转录合成双链cDNA,以λTripEX2为载体,构建了龙井43新梢cDNA文库。以XL1-Blue为受体菌测定原始文库的滴度为6.8×10⁵ pfu/ml,总克隆数为3.5×10⁵个,重组率为98.05%,扩增后文库总滴度为7.2×10⁹ pfu/ml。对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0.5-2.0 kb之间,绝大部分在1.0-1.5 kb左右。文库质量鉴定结果表明,构建的茶树新梢cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段。对4320个克隆的序列测定表明,获得有用序列2963个,测序成功率为68.5%,剔除短序列后,首批共获得1687个茶树ESTs。     

几种低毒杀虫剂对蔗扁蛾的毒力及控制作用研究

对低毒化学农药吡虫啉、仿生农药阿维菌素及生物农药BT进行毒力测定,结果表明,这3种杀虫剂均对蔗扁蛾的幼虫有一定的毒杀作用,但吡虫啉、阿维菌素在早期和中期的效果明显,而BT在后期的杀虫效果较明显.经过分析,吡虫啉最适的杀虫浓度为1∶700,阿维菌素及BT的最适浓度均为1∶1 500.防治效果最好的为阿维菌素,1 000倍时平均死亡率为96.95%,其次是吡虫啉,700倍时平均死亡率为65.25%,BT效果不理想,1 000倍时死亡率仅18.1%.     

桑皱褶花叶病及皱褶螺原体的研究

桑皱褶花叶病是一种由螺原体寄生引起的桑树病害，通过嫁接，昆虫及汁液传病，近年在浙江省局部地区蔓延危害。病原螺原体在革兰氏染色反应中呈阳性反应，能在植物性液体培养基和固体培养基中培养成功。螺原体形态有圆形、椭圆形、螺旋形和线状等。圆形粒体直径为８３～７００ｎｍ，基本螺旋体大小为３６４～８３３ｎｍ×８２～１１９ｎｍ，线状体长为３．０～４．５μｍ，宽为１００ｎｍ。本病原寄主范围较广。土霉素（２５０～５００ｍｇ／ｋｇ）对本病具有明显的抑制作用。本病原螺原体的生活力及致病性均强，经液体培养１ａ后，能对无病实生苗传毒成功。     

ZNST-Ⅱ型凝胶电泳图像摄录分析系统简介

ＺＮＳＴ－Ｉ型凝胶电泳图象分析系统是专门为快速精确记录凝胶电泳图像而设计的，由图像摄录、监示、热敏打印、图像采集和图像处理分析软件等组成（图１）。它专门用于记录和拍摄紫外荧光显像胶（如ＥＢ染色的核酸电泳胶）、各种染色的蛋白电泳胶、银染胶、杂交膜及各种...     

瓠瓜果斑病症状及其病原菌的鉴定

为有效防控瓠瓜果斑病,自浙江省象山县田间采集具有典型果斑病症状的瓠瓜样本,对其进行病原菌分离、形态观察、致病性测定及分子生物学鉴定,并利用特异性引物PL1/PL2 PCR扩增和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight massspectrometry,MALDI-TOF-MS）技术对其病原菌进行亚群鉴定。结果表明：瓠瓜果斑病田间典型症状是发病叶片和果实上病斑由水渍状小斑点逐渐发展为伴有黄色晕圈的褐色不规则病斑,果实腐烂、有臭味。通过菌体形态和培养特性观察、PCR鉴定、16S rDNA序列分析和7个看家基因的系统发育分析将其病原菌鉴定为西瓜噬酸菌Acidovorax citrulli。从瓠瓜上分离的菌株均属于西瓜噬酸菌亚群I,从西瓜上分离的菌株均属于西瓜噬酸菌亚群II。