生防木霉SS003菌株(Trichoderma atroviride)的固体发酵工艺研究

为了探索酷绿木霉SS003菌株固体发酵产孢子的较优工艺条件.分别以酷绿木霉SS003菌株为供试菌和以玉米秸秆、麦麸发酵基质,分别进行了固体发酵培养基配方和固体发酵条件的优化筛选,试验设计均采用单因索试验.试验最终检测方法采用血球计数板倍量稀释法镜检孢子量(108个/g).分别获得了酷绿木霉SS003菌株产孢固体发酵的较优培养基配方和较优固体发酵条件,即80目的玉米秸秆与麦麸配比1:3,接种1×106个/mL的SS003孢子液,保持含水量55％和充分通气,培养11d后,酷绿木霉SS003菌株固体发酵产孢量达到最大(76.14×108个/g).初步探索到绿木霉SS003菌株固体发酵产孢的较优工艺条件,为该菌的深入研发提供了有益的试验数据.     

3株茶蔗生柱锈重寄生木霉菌的形态鉴定及ITS序列分析

[目的]探讨更为客观的木霉菌鉴定手段.[方法]在形态分类的基础上结合分子鉴定手段(rDNA-ITS序列分析),对3株茶藨生柱锈重寄生木霉菌进行分类鉴定.[结果]依据TR1的培养性状和显微特征描述,初步鉴定该菌株为深绿木霉(T.atroviride);TR2、TR3的培养性状和显微特征在一定程度上相似,依据其形态特征,初步鉴定这2个菌株为绿色木霉(T.viride Pers.ex Fr.).从Genbank中深绿木霉和绿色木霉的6个菌株与TR1、TR2、TR3所作的系统发育树可知,TR1应该归为深绿木霉,TR2和TR3属同种真菌,应该归为绿色木霉,这与形态学观察结果一致.[结论]形态特征结合ITS序列分析可作为木霉菌分类鉴定的依据.     

菊科4种植物萃取物对核桃病原真菌的抑菌活性研究

以菊科4种植物为实验材料,分别用石油醚和乙酸乙酯对菊科4种植物的提取物进行萃取,采用生长速率法测定了不同萃取物对5种核桃病源的抑菌活性,通过SPSS 19软件计算了不同的萃取物对5种核桃病原真菌的毒力回归方程和半抑制浓度。结果表明:菊科4种植物的有机溶剂萃取物对5种核桃病原真菌的生长均有不同程度的抑制效果。小飞蓬石油醚萃取物对壳梭孢、壳二孢、炭疽菌的抑制效果最好,抑制率到达了77.5%、81.6%、79.5%,EC50值分别为1.31、1.34、0.71 mg/mL。波斯菊石油醚萃取物对叶点霉病原菌抑制效果最好,抑制率为74.1%,EC50值为0.56 mg/mL。小飞蓬乙酸乙酯萃取物对拟茎点霉病原菌的抑制效果最好,抑制率为61.8%,EC50值为3.63 mg/mL。     

松材线虫侵染对马尾松、黑松水分及其相关代谢的影响

 以盆栽马尾松(Pinus massoniana)幼苗和离体水培黑松(P.thunbergii)、马尾松为材料,研究了松材线虫(Bursaphe-lenchus xylophilus)侵染对寄主水分、游离脯氨酸及叶绿素含量的影响以及由此引起的幼苗萎蔫与干旱萎蔫间的差异。松苗和离体枝接种松材线虫后,茎部相对含水量逐渐下降,早期下降缓慢,中后期加快。叶片变化滞后于茎部,相对含水量的明显下降发生在叶片褐变萎蔫症状出现之后(病害发展后期)。游离脯氨酸含量、叶绿素含量变化完全随叶片相对含水量的变化而变化。水分状况是影响受侵植株叶片脯氨酸和叶绿素含量的决定因子。自然干旱枯萎和由松材线虫侵染引起枯萎的松幼苗,两者从枯萎方式到茎、叶相对含水量的变化均存在显著差异。     

重寄生枝孢菌的鉴定及转录组学分析

从感石楠叶锈病病菌的球花石楠叶片上获得的3株重寄生菌SYC4、SYC23和SYC63,为确定其分类地位及在锈菌孢子诱导下菌丝体基因的表达情况，采用形态学特征结合分子序列分析将菌株鉴定到种，并对重寄生效果较好的菌株SYC63进行转录组测序。结果表明，经鉴定SYC4、SYC23为Cladosporium anthropophilum,SYC63为枝状枝孢菌(C.cladosporioides)。对菌株SYC63获得的转录组数据与不同数据库进行比对，在Nr数据库中有11 002个基因被注释到，除其他物种外，枝孢菌SYC63与南极枝孢菌(Rachicladosporium antarcticum)有2 130个基因相似，所占物种匹配最高；在GO数据库中注释到8 088个基因，基因数量最多的是生物学过程，其次是分子功能和细胞组分。在差异表达基因中发现，与重寄生相关的凝集素、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路及抗性次级代谢物有关的基因经锈菌孢子诱导后显著上调表达。以上研究为重寄生枝孢菌在植物病害的生物防治应用中提供了菌株来源，并为其重寄生机制的深入研究提供了理论基础。     

昭通天麻种子萌发菌的筛选

自昭通本地野生乌天麻原球茎上分离获得的两株天麻种子萌发菌（SNm-01、SNm-02）。研究了它们的生长特性及促进天麻种子萌发的效果。结果显示,两株菌的生长特性相似。在PDA上生长时,菌落白色、绒毛状,菌丝分枝、无色透明,具有分隔和锁状联合,均具有气生菌丝。SNm-01菌落生长速度较快,室内促天麻种子萌发效果好。与传统的天麻种子播种方法相比,SNm-01在野外林间大田萌发试验中表现优良,天麻种子的萌发率较高,空穴率为零,原球茎平均达100个/塘,而且对萌发后原球茎的生长也具有较好的促进作用,所以菌株SNm-01是一株优良的昭通本地萌发菌.     

过氧化物酶同工酶在黑蛋巢菌属分类上的应用研究

采用电泳方法分析过氧化物酶同工酶在黑蛋巢菌属种级分类中的意义．结果表明：组间过氧化物酶同工酶相似系数集中在0．20～0．40；种间相似系数多在0．30～0．57；同一个种不同菌株之间相似系数为0．89～1．00，且过氧化物酶同工酶不受地理种源的影响．鸟巢菌科黑蛋巢茵属过氧化物酶同工酶具有种的稳定性，而在组间、组内种间差异较明显，对该属真菌的分类和疑难标本鉴定有一定意义．     

石楠锈孢锈菌重寄生现象及其重寄生菌的种类鉴定1）

研究了昆明地区石楠锈孢锈菌（ Aecidium pourthiaea）上的重寄生现象并对重寄生菌进行了分离、回接验证和鉴定。结果显示：石楠锈孢锈上的重寄生菌在7月底逐渐发生,其自然重寄生率从10月中旬开始快速增长,12月中旬达到高峰。石楠锈孢锈的重寄生菌包括链格孢属（ Alternaria spp．）、拟盘多毛孢属（ Pestalotiopsis spp．）、枝孢属（Cladosporium spp．）、镰刀菌属（Fusarium spp．）、木霉属（Trichoderma sp．）的真菌及粉红单端孢（Tri-chothecium roseum）等多种,其中重寄生效果及对锈菌寄主植物安全性最好的菌株为拟盘多毛孢属的SYP22菌株和枝孢属的SYC23菌株。     

思茅松增脂研究

采用割面喷施增脂剂、本底产量对比法计算增脂率，对增脂剂l^#、2^#进行了连续4个月的思茅松增脂试验。结果显示：增脂剂l^#、2^#使思茅松流脂时间延长、松脂含油率增加、最高增脂率分别达28．6％和22．1％。同时，松树长势更好。     

松材线虫侵染对马尾松苯丙烷类代谢的影响

1.5年生马尾松植株接种松材线虫后,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性水平均高于对照,活性高峰通常出现在症状表现前夕,并在植株发病后下降.叶内PAL和POD活性高峰的出现晚于茎,与叶部病害发展一致.茎中酚类物质的含量随着线虫侵染时间的延长逐渐增加,至发病时达到高峰.酚类物质含量的变化与PAL、POD、PPO 3种酶活性的变化趋势基本一致.松材线虫的侵染明显影响寄主植物的苯丙烷类代谢,由此可知,松材线虫病的发生发展与松材线虫诱导感病寄主苯丙烷类代谢的异常变化有关.