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根据GenBank中已发表的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)HuN4株全基因组序列,设计合成一对引物,对PRRSV HuN4株非结构蛋白Nsp4(Nonstructural protein 4基因进行RT-PCR扩增,克隆到原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达载体pET30a-Nsp4,经酶切测序鉴定。将pET30a-Nsp4转化表达菌株BL21(DE3),诱导可表达分子量约为27kDa重组蛋白。Westernblot显示其具有较好的反应原性,经镍离子亲和层析(Ni-NTA)纯化获得了高纯度的可溶性重组蛋白。将纯化的Nsp4蛋白免疫BALB/c小鼠,抗血清ELISA效价达1:16000,Western blot和IFA表明,所制备的抗血清能够特异性识别PRRSV自身表达的Nsp4蛋白。本研究获得了可溶性的PRRSV Nsp4蛋白,制备了Nsp4特异性多抗血清,为进一步研究Nsp4蛋白的亚细胞定位及功能奠定了基础。 相似文献
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为了调查宁夏地区流产肉用母牛5种流产相关病原的流行情况,通过采集不同地区92份有流产史的基础母牛血清样本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对5种流产相关病原抗体/抗原进行检测和分析。ELISA检测结果表明,92份样品中,5种病原抗体阳性率为98.91%(91/92),抗体阳性率由高到低分别为牛犬新孢子虫(82.61%)、牛传染性鼻气管炎病毒(69.57%)、衣原体(44.57%)、布鲁氏菌(30.43%);未检出牛病毒性腹泻病毒。混合抗体阳性率中主要以2种病原混合抗体阳性率最高(50.00%),其中牛传染性鼻气管炎病毒和牛犬新孢子虫混合抗体阳性率最高。研究结果表明,宁夏主要肉牛养殖地区均出现不同流产相关病原感染的情况,主要以混合感染为主。在肉用母牛养殖过程中,应加强对以上病原的检疫并采取相应的防控措施。 相似文献
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<正>对广大养殖户来说,动物疫病的预防一直是个难题。许多养殖户疫苗没少打,消毒药也没少用,管理上也没少费心,但疫病却还是照样光顾了,该怎样才能做到有效预防呢?1要定期进行消毒、杀虫、灭鼠蚊蝇、老鼠是许多疫病的传播媒 相似文献
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分析了我国当前木材干燥生产中常规干燥室存在的问题,探讨了干燥室的改进措施,提出了合理建议和意见。 相似文献
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