农杆枪法基因遗传转化技术初报

为提高遗传转化的效率,克服受体范围的限制,采用农杆枪法进行基因的遗传转化。根据已报导的VirD1和VirD2基因的序列设计特异引物,以农杆菌C58菌株的质粒为模板进行PCR扩增．对VirD1和VirD2基因进行克隆。将序列正确的VirD1和VirD2基因连接到植物表达载体PBI121启动子CaMV35S和终止子nos之间,构建VirDl和VirD2基因的表达载体pB-VirD1及pB-VirD2。经PCR及酶切鉴定,基因已成功构建到表达载体上,为农杆枪法进行目的基因转化的研究奠定了基础。     

云南蔷薇属部分种质资源的SSR遗传多样性研究

利用简单重复序列SSR标记技术对蔷薇属（Rosa L．）13份野生种、变种、变型及29份栽培品种的遗传多样性进行了研究。用筛选出的18对SSR引物对42份材料DNA进行PCR扩增,在18个位点共检测到148个等位基因,每一位点的等位基因变幅为6～14个,平均8．2个。材料问遗传相似系数为0．282—0．892,表明在分子水平上具有丰富的遗传多样性。在相似系数为0．456时,基于SSR标记的聚类分析将13个蔷薇野生种分为5个组,这与植物形态学分类结果大体一致。在遗传相似系数为0．43水平上,聚类分析将42份供试材料分为5大组群。初步探讨了野生种之间以及野生种与栽培品种之间的亲缘关系。     

四川西南地区凤仙花属植物花粉微形态研究

以四川西南地区20种凤仙花属（Impatiens L.）植物为材料，通过扫描电镜对其花粉形状、外壁纹饰以及萌发沟类型等特征进行观察，并采用主成分和聚类分析，探讨其花粉的形态特征及其在分类学上的意义。结果表明：20种凤仙花的花粉大多为单粒4沟类型（占75.00%），少数为单粒3沟类型（占20.00%），仅1种为单粒5沟类型。不同种花粉在大小、赤道面观、极面观等性状上差异显著；极面观多为椭圆形、距圆形和胶囊状，少数为三角状圆形和五边形；花粉外壁纹饰均为网状纹饰，其网眼稀疏程度、大小、网眼内颗粒物密度等存在较大差异。综合上述特征将20种凤仙花属植物分为7个亚类型。通过主成分分析确定4个主成分因子，基于花粉形态的聚类分析可将20种凤仙花属植物分为3大组，其中康定凤仙花、波缘凤仙花和天全凤仙花等聚为第1支；贝苞凤仙花、滇南凤仙花和山地凤仙花等聚为第2支；白花凤仙花、纤袅凤仙花和菱叶凤仙花等聚为第3支。     

任务驱动法在实践型人力资源管理教学中的应用研究

结合人力资源管理课程的实践型教学特点，大胆创新，尝试提出将“任务驱动法”应用于人力资源管理系列课程的教学体系之中，并详细论述了从任务的设计、分配、执行、完成到点评的全过程，以满足人力资源管理课程实践性教学的需要。     

浅谈提高母牛冷配受胎率的技术措施

1适时配种1.1根据品种确定初配年龄不同品种育成母牛初配年龄应有区别。我国黄牛在饲养条件好的情况下,约为14～16月龄,饲养差的情况下约为18～24月龄,我国母水牛初配年龄,一般应控制在3～4岁;营养好的可提前到2～2.5岁,其他品种也应视具体情况而定。1.2勤观察黄牛发情周期平均     

海洋与渔业应急预案的编制基础与理论初探

主要论述了海洋与渔业应急预案编制的指导思想与理论基础,并就海洋与渔业应急预案编制的程序体系,以及四类不同的海洋与渔业突发公共事件应急预案的编制内容等问题进行了较为全面地归纳与系统地阐述。     

马铃薯prp1-1启动子的克隆及转基因研究

采用PCR技术，从云南马铃薯叶片DNA中分离克隆到了马铃薯病程相关蛋白（prpl-1)基因启动子，与国外文献报道序列完全一致。将这一启动子亚克隆到中间载体pUC18中，再构建到植物表达载体pBI121上，以取代其原有的CaMV35S启动子，得到重组植物表达载体pBI121M；用电脉冲法将pBI121M转入农杆菌LBA4404。应用农杆菌介导法，将携带有pBI121M重组质粒的农杆菌转化烟草，经卡那霉素筛选，得到了一批转基因植株。转基因植株的PCR鉴定表明，启动子整合到了烟草植株基因组中。本研究为下一步通过X－Glu染色法检测启动子下GUS基因的表达情况，研究该启动子的病原菌特异性诱导活性，并建立新的植物转基因系统奠定了基础。     

香石竹ACC氧化酶基因的克隆及其正义反义表达载体的构建

利用在Genebank上已报道的香石竹ACC氧化酶(ACO)基因的CDNA序列设计特异引物,以香石竹品种'MASTER'的eDNA为模板进行PCR扩增,克隆香石竹ACC氧化酶(AC0)基因.测序结果显示,克隆基因的序列与报道序列完全一致.将克隆的ACC氧化酶(AC0)基因分别连接到植物表达载体PBI121启动子CaMV 35S的上游及下游,构建香石竹ACC氧化酶(Aco)基因的正义表达栽体PBI121-ACO及反义表达载体PBI121-anti ACO.经PCR鉴定,基因已成功构建到表达裁体上.为香石竹抗衰老基因工程育种奠定了基础.     

将重组质粒高效导入农杆菌的电脉冲转化研究

利用电脉冲法将重组质粒PBI121/α-PAP导入农杆菌LBA4404,获得3.5×106转化子/μ g质粒DNA的转化效率.探讨了不同电激条件及农杆菌细胞生长状态对转化率的影响.结果表明,农杆菌LBA4404电脉冲转化的最适电激条件为电场强度18kv/cm,电容25μF,电阻200Ω;农杆菌最适细胞生长状态为OD600＝0.4～0.5.在一定范围DNA浓度与转化率成正比关系.     

云南疣粒野生稻细菌人工染色体（BAC）文库的构建与分析

我国有3种野生稻,即普通野生稻(oryza rufipogon)、药用野生稻(O.officinalis)、疣粒野生稻(O.granulata).野生稻由于长期处于野生状态,经受了各种灾害和不良环境的自然选择,抗逆性较强,是天然的基因库,保持有栽培稻不具有或已经消失了的遗传基因,它在水稻育种中具有独特的作用,是水稻育种的宏厚物质基础.