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采用RT-PCR技术从小反刍兽疫病毒(PPRV)中扩增出C基因。将C基因亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,构建出重组表达质粒pGEX-6P-1-PPRV-C。将重组质粒转化Rosetta感受态细胞后,经IPTG诱导表达目的蛋白。表达出的重组蛋白经SDS-PAGE和Western-blot鉴定正确后,免疫6周龄BALB/c雌鼠,制备多克隆抗体血清。结果表明:C蛋白在大肠埃希菌中主要以包涵体的形式表达,分子量大小约为42ku;Western-blot结果表明重组C蛋白具有良好的反应原性;琼脂扩散试验结果表明制备的抗C蛋白多抗血清效价为1∶2。这一研究成功克隆出C基因,制备出多克隆抗体血清,为今后进一步深入研究C蛋白的功能提供了生物材料。 相似文献
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一、调查区的概况蒸腾作用是树木生长的重要生理现象,尤其在干旱瘠薄的山区,更是反应林木水分生理特点和生长发育的主要指标之一。辽西地区地势起伏、植被稀少、冬季漫长、夏季炎热,年温差可达70℃以上。年降水量一般在400—600mm之间,分布极不均匀,多集中于7—8月份,为全年降水量的65—70%,冬春雨雪稀少而干旱,年蒸发量在1,700—1,900mm以上,年平均相对湿度为55%,春季平均为44%,最少月份可在20%以下。由于1980—83年的连续大旱,油松纯林曾发生枯 相似文献
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采用YWG-C18色谱分析柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),Waters TM486可变波长紫外检测器,甲醇-水(4060)为流动相,香草醛为内标;血液样品用乙醚提取纯化后进样,220 nm波长处检测,建立了反相HPLC法检测猪血浆中六茜素(pyroline,PL)含量的方法,同时对PL静脉单次给药(30 mg/kg)后在猪体内的药代动力学进行了分析.结果表明,PL在血液中的线性范围为1.0~100.0 mg/L(r=0.995 3),最低检测量0.1 μg,最低检出质量浓度2.0 mg/L,平均方法回收率为98.36%,精密度考察PL日内、日间相对标准偏差小于4%.所得的PL血药时程符合二室开放模型,药物动力学参数为T1/2a=1.52 min,T1/2β=66.05 min,AUC=880.07 mg/(min@L).表明PL单次给药后,在体内分布广泛而迅速,消除快.试验所建立的HPLC检测法专属性高,快速、准确、重复性好. 相似文献
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为了更全面地了解和掌握喹烯酮对鸡的促生长效应,设计试验了喹烯酮的剂量优化试验和药效比较试验。不同水平喹烯酮对肉鸡促生长的研究,采用单因子随机分组试验设计,喹烯酮的添加水平分别为0.0,25.0,50.0,75.0,90.0mg/kg,共5组;不同种类药物饲料添加剂对肉鸡的促生长作用研究,采用随机分组设计,各组基础日粮相同,采用它们的推荐剂量,药物分别为喹烯酮、喹乙醇和黄霉素。结果表明,饲料中添加75.0mg/kg喹烯酮在提高肉鸡平均日增重、采食量和饲料转化率方面效果最佳;与黄霉素、喹乙醇相比,喹烯酮提高日增重和改善饲喂效率效果最显著,且与黄霉素一样能显著地降低死亡率。 相似文献
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分别以非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白特异性单克隆抗体3E1株和7A7株作为检测抗体和捕获抗体,建立了ASFV抗原试纸条检测方法。该方法与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)均无交叉反应;对ASFV P72重组蛋白的最低检测量为2.50μg/L;稳定性试验结果表明,试纸条可在2~8℃条件下保存15个月。对100份临床样品的检测结果显示,该方法与荧光定量PCR的符合率为85%。本研究建立的ASFV抗原检测试纸条特异性强、灵敏度高,可用于临床样品中ASFV抗原的检测。 相似文献