温度胁迫下沙葱萤叶甲小热激蛋白基因GdHsp20.6的克隆及表达分析

为明确小热激蛋白在沙葱萤叶甲Galeruca daurica应对温度胁迫中的作用,采用PCR方法克隆沙葱萤叶甲小热激蛋白基因Hsp20（GdHsp20.6）完整的开放阅读框（open reading frame,ORF）序列,应用在线软件对GdHsp20.6基因进行生物信息学分析,通过原核表达技术诱导表达及纯化其编码蛋白,并通过实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）技术分析不同温度胁迫下GdHsp20.6基因的表达量。结果显示,GdHsp20.6基因ORF序列长度为543 bp,编码180个氨基酸,预测分子量为20.6 kD,无跨膜区和信号肽。GdHsp20.6氨基酸序列有高度保守的α-结构域。GdHsp20.6氨基酸序列与其它鞘翅目昆虫的Hsp20氨基酸序列有较高的一致性,其中与花绒寄甲Dastarcus helophoroides的Hsp20.99氨基酸序列的一致性最高,为63%。GdHsp20.6基因在大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）细胞系中成功表达,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG）诱导后GdHsp20.6蛋白成功表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）和Western-blot分析表明融合蛋白大小与预测大小一致,并纯化获得了纯度较高的目的蛋白GdHsp20.6。低温（-10~5℃）和高温（35~40℃）处理1 h以及处理后25℃恢复30 min均能诱导GdHsp20.6基因表达上调,并且0℃处理30~120 min也能诱导GdHsp20.6基因表达上调。表明GdHsp20.6基因在沙葱萤叶甲应对低温和高温胁迫中可能起着重要作用。     

斑节对虾基因组微卫星分离及其序列特征研究

采用(CA)_(12)(AG)_(12)及(TA)_(16)生物素标记探针及磁珠富集法构建了斑节对虾Penaeus monodon基因组微卫星富集文库。随机挑选254个克隆进行PCR筛选,得到51个候选克隆(20．1%)。其中,32个克隆来源于CA-文库,另19个克隆来源于AG-文库。测序发现48个克隆含有微卫星重复单元,通过序列比对,最终获得40个具有特异微卫星序列的阳性克隆。微卫星(GA/CT)_N及(CA/GT)_n 2碱基重复序列分别占所有分离的微卫星数目的20．7%及60．4%。此外,还检测到其它多种微卫星重复类型,如(AT)_n、(GC)_n、(TGG)_n、(AAG)_n、(AAT)_n、(GAA)_n、(GTGC)_n、(GCGT)_n、(GGTTA)_n、(GTGCGT)_n,占检测到的微卫星数目的18．9%。获得的微卫星序列中属于完全型序列的有76条(68．5%),不完全型序列的有22条(19．8%),另有13条属于复合型序列(11．7%)。微卫星(GT/CA)_n 2碱基重复次数(3～52次)要远大于(GA/CT)_n 2碱基次数(3～27次)。获得的微卫星序列长度大小范围为129～601 bp,平均为286 bp。研究为进一步开展斑节对虾分子育种及资源评价分析提供了基础资料。     

4种鲷科鱼类的线粒体细胞色素b基因序列及分子系统学分析

从鲷科鱼类中黄猪鲷(Sparus latus)、黑鲷(S.macrocephalusM)、真鲷(Pagrosomus major)和平鲷(Rhabdosargus sarba)的线粒体DNA扩增出约430bp的细胞色素b(Cytb)基因，经Clastal X同源排序后得408bp序列，对该序列进行分析并结合GeneBank中黄鲷(Taius turnifrons)、灰鳍鲷(S.berda)、犁齿鲷(Evynnis japonica)和高背四长棘鲷(Argyrops spinifer)的该区段DNA序列比较，共发现126个核苷酸位点存在变异(30．7％)，序列中的转换大于颠换，碱基替换多发生在密码子的第3位点。黑鲷和灰鳍鲷亲缘关系最近，序列差异为3.8％；而黄鲷和平鲷的亲缘关系最远，序列差异为21．7％。用MEGA2．1软件中的NJ法构建的分子系统树，将上述8种类分为4组，其中黄鲷属、平鲷属和鲷属分类的结果与形态分类学的观点一致；而传统分类上把犁齿鲷、真鲷和高背四长棘鲷归为3个不同属，在本研究分子系统树中，这3个属却聚成一支。本研究目的在于从分子水平上阐明鲷科鱼类的分类与系统进化关系。     

金乌贼人工育苗中应注意的问题

金乌贼（Sepia esculenta）具有食用价值高、口味鲜美、营养丰富和生长期短等特点,是海洋和海水养殖种类中颇具潜在价值的蛋白质资源。金乌贼在我国北方海域中广泛分布,但随着海洋捕捞强度的增加,自然资源量锐减。近几年,我们进行了金乌贼人工育苗技术的初步探索,总结出了一些育苗中应注意的技术问题,现探讨如下。     

凡纳滨对虾6个养殖群体遗传多样性的比较分析

中国多批次引进凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei并结合生产开展了相对独立的育苗工作,但对引进群体及引进后留种形成的本地群体的遗传变异水平缺乏了解,不利于种质管理及利用。此研究采用AFLP技术对抽查的6个养殖群体进行分析,发现进口群体具有相对较高的遗传多样性水平;养殖性能较好的东方、海星和旭明群体遗传多样性水平与进口群体相近;而乾塘群体遗传变异水平最高,推测可能是与其种质混杂有关;广益群体遗传多样性水平最低,可能已出现近交衰退。通过对各个群体间的遗传距离进行分析,为下一步根据亲缘关系的远近开展群体问杂交育种提供技术依据。     

竹荚鱼属鱼类线粒体DNA控制区结构及其系统发育分析

采用PCR产物直接测序法测定了2尾来自中国南海的日本竹煲鱼（Trachurus japonicus）线粒体DNA控制区基因全序列,并结合从GenBank中下载的8种竹笑鱼属相应序列,对竹煲鱼属控制区序列进行了结构分析,识别出终止序列区、中央区和保守序列区3个区域,并找到了2个与DNA复制终止相关的序列TAS和中央保守区的保守序列CSB—F、CSB—E和CSB—D,以及保守序列区的保守序列CSBl、CSB2和CSB3。以鳜（Sinipercachuatsi）作为外群,使用邻接法和最大简约法构建了9种竹荚鱼属的系统发育树。竹笑鱼属鱼类为单系类群,蓝竹煲鱼（rpicturatus）、智利竹笑鱼（zmurphyi）、太平洋竹笑鱼（zsymmetricus）、南非竹荚鱼（rcapensis）和竹荚鱼（rtrachurus）构成一支,地中海竹笑鱼（zmediterraneus）、青背竹笑鱼（zdeclivis）、日本竹荚鱼（rjaponicus）和新西兰竹荚鱼（rnovaezelandiae）为另一支;日本竹笑鱼未单独成一支,而是聚人青背竹笑鱼和新西兰竹笑鱼之间,初步猜测日本竹笑鱼和新西兰竹荚鱼为同种异名。     

中国蛤蜊生态养殖技术

目前,中国蛤蜊滩涂养殖一直靠自然繁衍加以保护,没有形成规模化养殖,为净化海洋环境和发展生态养殖,促进水产养殖业的健康、稳定、可持续发展,2011-2012年文登市水产技术推广站进行了中国蛤蜊养殖试验,现将养殖情况总结如下:一、养殖场条件中国蛤蜊养殖场选择在五垒岛湾西部滩涂(小观外海区),该海域属于开放型内湾,水质无污染、潮流畅通、滩涂平坦、滩面稳定、底质含沙量70%～80%,有少量淡水注入,黄垒河入海口离养殖区3千米左右,盐度在28～30,雨季时期最低出现23。养     

开放获取——促进水产科技文献交流与共享的有效途径

论述了科技文献开放存取产生的背景和中文科技文献开放获取的现状,分析了水产科技文献开放获取的必要性和可行性。中文开放获取科技文献的发布形式主要有电子版科技期刊、e-印本文献网站和专业机构数据库,其中电子科技期刊数量最多。根据在因特网上的搜索结果,截至2007年11月,通过因特网可免费查阅全文的中文科技期刊有475种,与上一年的搜索结果相比增加了80种;以《2007年版中国科技期刊引证报告(核心版)》收录的1723种核心期刊为基础,将其中与水产科学相关的期刊进行分类统计,对开放获取期刊和非开放获取期刊的总被引频次和影响因子进行比较分析,结果显示:开放获取期刊的总被引频次和影响因子明显高于非开放获取期刊。认为水产科技文献信息的出版发布应该积极采取开放获取的策略,此举对促进国内水产科技文献交流共享,提升水产科技期刊影响力和渔业科技创新具有重要作用。     

宁波地区桃花水母的脂肪酸组成研究

2004年10月、2005年7月于浙江省宁波市七塔寺、江北区、天童寺采得多个桃花水母标本.用GC/MS法分析后的结果表明,三地桃花水母总脂含量平均值为16.30%.共检测到加种脂肪酸,饱和脂肪酸(SFA)8种、单不饱和脂肪酸(MUFA)5种,多不饱和脂肪酸(PUFA)7种.其中PUFA含量最高,占总脂肪酸的44.37%～50.59%,而SFA和MUFA分别占总脂肪酸的33.96%～39.14%和11.32%～21.67%.     

双峰农机走俏越南国际展览会

5月28～31日,双峰县组织湖南省农友机械集团、永旺机械有限公司等农机企业参加了在越南河内举办的2009年高新技术产品国际展览会暨第八届越南国际工业设备展。展会期间,双峰