抗CPV-2a单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立

犬细小病毒病是危害养犬业的重要传染病之一,患病犬难以治愈。单克隆抗体治疗此病效果明显,本文介绍了制备抗CPV-2a单克隆抗体的方法。用纯化的犬细小病毒（canine parvovirus,CPV）2a型分离株免疫新西兰大白兔和Balb/c小鼠制备抗CPV-2a多克隆抗体及单克隆抗体。经亚克隆得到1H9、2B5、2B7和2C7共4株单抗,Western blotting鉴定单抗的免疫反应性;间接ELISA方法检测单抗的特异性。为了快速对犬细小病毒病作出诊断,建立了CPV-2a双抗夹心ELISA方法。兔多抗作为捕获抗体,鼠单抗作为示踪抗体,辣根过氧化物酶标记羊抗鼠IgG作为检测系统;捕获抗体和示踪抗体最佳稀释度分别为1：800和1：2000;检测系统最佳稀释度为1：4000。结果表明：所得4株单抗与pET-32a-VP2蛋白发生特异性反应,且与狂犬病毒（RV）、犬温热病毒（CDV）不交叉反应;建立的双抗夹心ELISA方法对病毒的最低检出量为4.375μg/mL,与美国RB试剂盒相比,符合率为95%。单抗制备为犬细小病毒病的治疗奠定了基础;双抗夹心ELISA方法的建立为疑似粪便样本提供了简单、快速和可靠的检测手段。     

盐胁迫对结缕草和高羊茅种子萌发的影响

用NaCl和Na2SO42种盐以9∶1的摩尔比配制浓度分别为30、60、90、120、150、180 mmol/L和210 mmol/L的混合盐溶液,作为盐胁迫处理液对结缕草和高羊茅种子进行盐胁迫发芽试验。结果表明,结缕草和高羊茅种子的发芽率均随着盐浓度的升高而呈"抛物线"型的曲线变化,结缕草的发芽率随着盐浓度的升高而降低,高羊茅的发芽率随着盐浓度的升高先升高后降低;当盐浓度达到120 mmol/L和90 mmol/L时,结缕草种子的发芽率和发芽势分别极显著地低于对照(p<0.01),当盐浓度达到150 mmol/L和120 mmol/L时,高羊茅种子的发芽率和发芽势分别显著地低于对照(p<0.01);结缕草种子萌发的耐盐半致死浓度为166.4 mmol/L,耐盐极限浓度为220.0 mmol/L,高羊茅种子萌发的耐盐半致死浓度、耐盐极限浓度分别为168.4、200.0 mmol/L;高羊茅种子萌发的耐盐性要强于结缕草。     

杨树腐烂病的发生与防治

杨树腐烂病,又称烂皮病,是由黑腐皮克属部分真菌引起的干枝病害,对杨、柳和榆等树种危害极大。该病是潜伏侵染性病害,当出现干旱、水涝、冻害、日灼等恶劣条件,以及苗木移植或强度修剪后不易恢复树木生机时,病害迅速发生,轻者影响树木生长,出现放叶晚、叶片变小、枯枝、枯干等病状,重者造成树木成片死亡。     

惠特曼《草叶集》主题分析

惠特曼的诗集——《草叶集》的主题很宽。惠特曼为自我高歌并热情地歌唱蓬勃发展的美国、美国民主和美国大众,同时也为死亡欢呼,认为死是生的转换。《草叶集》的主题有4个:自我,美国,死亡,民主。     

"性别控制液"在奶牛繁殖上的应用

利用性别控制液对奶牛进行性别控制,试验组产母犊率56.25％,对照组48.15％,χ~2检验差异不显著(p>0.05),说明此性别控制液时提高奶牛后代母犊率没有显著影响。     

优良植物根际促生菌的筛选及其生物学特性

为获得能应用于环保微生物肥料中性状优良的植物根际促生菌,根据菌株的固氮、溶磷和解钾能力,经过初筛和复筛从不同土壤样本中分离得到1株芽孢杆菌(Bacillus velezensis)(LPL-410.7)。全基因组分析结果显示,该菌株基因组的大小为3 907 842 bp, GC含量为46.66%,可编码3 743个基因/蛋白;生物信息学注释结果显示,LPL-410.7中与促进植物生长相关的功能基因59个,参与次级代谢产物的合成、辅酶运输和代谢、氨基酸运输与代谢等通路途径。进一步的菌株特性试验结果显示,LPL-410.7能够分泌蛋白酶及纤维素酶,并能产生相对表达量为51.78%的铁载体;采用酶联免疫吸附法检测到该菌株亦能产生植物激素吲哚乙酸、赤霉素和细胞分裂素;LPL-410.7在pH 3～10和盐质量浓度为0～15 g/L时均能存活;菌株自凝集性达到88.77%,且具有较强的自由基清除能力。全基因组分析结果与菌株解有机磷、产生促生抗病相关物质(铁载体、吲哚乙酸、纤维素酶和蛋白酶)的实际功能相符合。综合评定,贝莱斯芽孢杆菌LPL-410.7是一株优良的植物根际促生菌,具有很好的开发利用价...     

斑马鱼不同发育时期血管内皮生长因子受体2基因表达的实时定量PCR分析

[目的]探讨血管内皮生长因子受体2（VEGFR2-）基因在斑马鱼不同发育时期的表达。[方法]分别从12、24、48、72和96 h的斑马鱼胚胎和仔鱼中提取总RNA,用实时定量RT-PCR方法检测VEGFR2-基因表达,采用2^-△△Ct法进行数据分析。[结果]VEGFR2-基因表达量在12-72 h呈上升趋势,在96 h有所下降。12 h表达量最低,72 h表达量最高,与其他发育期均有显著差异。[结论]斑马鱼血管发育至72 h达成熟阶段。血管发育成熟前,VEGFR2-基因表达水平逐步增长;血管发育成熟后,VEGFR2-基因表达水平下降。     

怀玉山三叶青2个栽培种试管苗对干旱胁迫的生理响应及相关基因的表达

为了探究怀玉山三叶青2个栽培种试管苗对干旱胁迫的生理响应,为其高山大棚有效栽培提供理论依据。以怀玉山三叶青怀玉1号、怀玉2号试管苗为试验材料,进行PEG-6000模拟干旱胁迫处理,通过主成分分析和隶属函数法综合评价怀玉山三叶青2个栽培种试管苗抗旱性的强弱,并通过荧光定量PCR分析干旱胁迫下怀玉山三叶青2个栽培种试管苗相关基因的表达情况。结果表明,随着PEG-6000浓度的增加,怀玉1号、怀玉2号试管苗的株高和生物量整体上呈先稳后降的趋势,可溶性蛋白（SP）、可溶性糖（SS）、游离脯氨酸（Pro）和K⁺含量以及抗氧化酶[超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）]活性整体上呈先升后降的趋势,而相对电导率（RC）、丙二醛（MDA）含量和Na⁺含量则呈显著提高的态势,茎、根Ca²⁺含量无显著变化。根据隶属函数分析结果,怀玉山三叶青2个栽培种试管苗的耐旱性为怀玉2号>怀玉1号;主成分分析结果表明,第1个主成分中较大的指标有POD、CAT活性和Pro含量,第2个主成分中较大的指标有RC、SOD活性和...     

凤凰县农村土壤重金属污染调查与评价

本文调查了凤凰县农村土壤中镉、铅、铬、汞、砷5种重金属的含量状况,重金属限值参照我国《土壤环境质量标准》(GB 15618—1995)的Ⅱ级标准,土壤重金属污染程度指标参照单因子污染指数法和内梅罗综合污染指数法分析评价。结果表明,除了铅和铬之外,镉、汞、砷均有不同程度的重金属超标情况,单因子指数和内梅罗综合污染指数表明全县土壤无重金属污染。