猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR检测方法的建立及临床应用

根据Gen Bank登录的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的N基因,针对其保守序列,设计并合成1对引物,可特异性扩增长度为590 bp目的条带,成功建立了检测TGEV的RT-PCR方法。以等量同一浓度的同一TGEV阳性病毒液进行重复性试验,其3次扩增特异性条带大小均为590 bp。以猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV),猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(RV)进行特异性试验,其结果显示仅TGEV扩增得到预期特异性目的条带。以TGEV阳性病毒液提取的c DNA用紫外分析仪确定核酸质量浓度为1 g/L后,用dd H2O按10倍稀释,稀释度为10-1~10-5,其均能扩增出590 bp特异性条带。在猪传染性胃肠炎高发季节的2013年9月至2014年1月对四川成都、德阳、绵阳、遂宁、南充各地猪场送检的疑似猪传染性胃肠炎感染病猪的临床样品15份,进行检测,其猪传染性胃肠炎阳性率为100%。并且对四川成都、德阳、绵阳、遂宁、南充各地猪场保育舍随机采集的1~10周龄仔猪临床样品500份,进行检测,其1~2周龄仔猪传染性胃肠炎阳性率为17%,病死率为100%,3~4周龄仔猪传染性胃肠炎阳性率为14%,病死率为78.6%,5~6周龄仔猪传染性胃肠炎阳性率为9%,病死率为44.4%,7~8周龄仔猪传染性胃肠炎阳性率为4%,病死率为25%,9~10周龄仔猪传染性胃肠炎阳性率为1%,病死率为0%。从地区来看,在这500份样品中,成都、德阳、绵阳、遂宁、南充地区此病的阳性率分别为15%,6%,10%,6%,8%。以上结果显示所建立的TGEV RT-PCR检测方法,重复性好,特异性强,敏感性高,可用于该病的临床诊断。     

青岛市小麦生产影响因素分析与发展对策

本文总结了进入21世纪以来青岛市小麦生产的发展现状,从竞争力、发展潜力、制约因素3个方面分析了小麦生产面临的新形势,提出了巩固高产田、提升中产田等发展对策,对促进小麦产业科学发展、保障粮食安全具有重要意义。     

鸡球虫病的综合防治

鸡球虫病广泛分布于世界各地，是目前危害养鸡业的主要疫病之一。从经济观点看，因球虫病发病所致鸡群增重及饲料转化率下降造成的损失比因其所致鸡只死亡造成的损失要大得多。因此，如何控制球虫病也就成为发展养鸡业的关键之一。     

石榴皮鞣花酸类色素的提取和性能测定

从石榴皮中提取得到了一种鞣花酸类色素,并对该色素的理化性质进行了研究,分析测试了光、热、酸、碱、氧化剂、还原剂、食品添加剂对其性能的影响。结果表明:该色素呈酸性,在λm ax=365nm存在最大吸收,其颜色随着碱性的增大而加深,对热、氧化剂、还原剂、食品添加剂以及Na+、K+稳定性好。     

脱毒甘薯高产栽培技术

脱毒甘薯(红苕)具有生长势强,结薯早、膨大快、产量高、品质好等特点.遵义市2004年开始大面积推广脱毒甘薯甘薯一号,2005年推广面积达到0.33万hm2,平均单产2500kg/667m2以上,增产显著,深受广大农户欢迎.但部分地区,由于技术指导不到位,农户按常规种植,使品种增产优势未能发挥.为了搞好脱毒甘薯的推广,现根据各县脱毒甘薯高产栽培经验,将脱毒甘薯高产栽培的关键技术介绍如下:     

大豆过氧化物酶基因随机突变文库的构建

为提高大豆过氧化物酶(soybean peroxidase,SBP)的活性及研究该酶一级结构与酶活性间的关系,采用连续易错PCR方法对大豆过氧化物酶基因(sbp)进行了2轮随机突变,将第二轮易错PCR产物与质粒载体pPICZα-A分别进行双酶切,经T4DNA连接酶催化连接后,CaCl2法转化重组质粒pPICZα-A-s...     

巨型艾美耳球虫裂殖子的分离和纯化

[目的]为了获得纯净的巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)裂殖子.[方法]对25日龄白羽肉鸡口服接种 3×105巨型艾美耳球虫卵囊,在其感染后48～124 h取十二指肠末端到卵黄蒂后5 cm处肠段,收集裂殖子并计数,确定分离裂殖子的最佳时间;将所取肠段均分为5段,分别对裂殖子进行计数,筛选分离裂殖子的最佳肠段;通过DEAE-52纤维素柱层析对裂殖子进行纯化并分管收集,确定收集较高纯度裂殖子的最佳时间.[结果]在感染后84 h所收集的裂殖子最多;此外,从空肠中后段及空肠末端肠段中分离出较多数量的裂殖子,占总数的62％以上;通过DEAE-52纤维素柱层析获得44 mL纯度较高的裂殖子.[结论]分离巨型艾美耳球虫裂殖子的最佳时间为感染后84 h,最佳肠段为空肠后段,收集1～44 mL洗脱液能够获得纯度较高的裂殖子.     

泔水发酵饲料不同添加量对肉鸡生长性能的影响

将105羽60日龄广西青脚麻公鸡随机分为7个组,试验组分别添加自行发酵的城市餐饮泔水饲料10%、20%、30%、40%、50%和100%于饲料中,与对照组(不添加泔水发酵饲料,完全采用昆明正大788型通用鸡饲料)进行比较,通过测定肉用土鸡的采食量、日增重、料肉比、屠宰性能等指标,分析城市餐饮泔水发酵饲料对肉用土鸡生长性能的影响,经过24d饲养试验。结果表明:泔水发酵饲料的添加量从0增加到50%时,各试验组肉鸡的体重均相应增加;完全饲喂泔水发酵饲料的情况下,肉鸡在整个饲养试验期间几乎停止生长;泔水发酵饲料添加量小于50%的情况下,对肉用土鸡的全、半净膛率,胸、腿肌率,腹脂率的影响不明显;各试验组之间鸡肉的pH值、剪切力、失水率、蒸煮损失率的变化无规律;泔水发酵饲料能用于肉鸡生产,其中10%～20%的添加量较为理想。     

鸡柔嫩艾美耳球虫对宿主细胞凋亡的影响

为了研究柔嫩艾美耳球虫入侵与宿主细胞之间的相互关系,用纯化的柔嫩艾美耳球虫子孢子与MDBK细胞共培养,使球虫子孢子入侵MDBK（Madin-Darby bovine kidney）细胞,用终浓度6%乙醇进行凋亡诱导,通过Annex-in V/PI双荧光染色法和流式细胞术（FCM）对MDBK细胞凋亡水平进行检测。试验结果证明子孢子入侵细胞后,有子孢子入侵的细胞凋亡诱导显著被抑制（P〈0.05）,而未有子孢子入侵的细胞相继被凋亡诱导剂诱导凋亡。进一步揭示柔嫩艾美耳球虫子孢子具有独特的机制来延长宿主细胞的存活时间来确保它们能在细胞中存活并发育。