二斑叶螨内参基因的筛选及解毒酶基因的表达水平

【目的】筛选二斑叶螨（Tetranychus urticae）敏感（SS）和抗甲氰菊酯品系（Fe-R）中合适的内参基因,并通过基因相对表达定量PCR研究二斑叶螨抗性品系解毒酶基因表达水平的变化。【方法】采用实时荧光定量PCR（quantitative real time PCR,RT-qPCR）技术,分析二斑叶螨5.8S rRNA、α-tubulin、β-actin、ELF、GAPDH、RPL13a、SDHA和TBP共8个候选内参基因mRNA表达水平的稳定性,并分析二斑叶螨酯酶（Carboxyl/cholinesterases,CCEs）、谷胱甘肽转移酶（Glutathione s-transferase,GSTs）及细胞色素P450单加氧酶（Cytocheome P450 monooxygenases,P450s）等主要解毒酶基因相对表达量。用GeNorm和NormFinder软件进行内参基因稳定性评估,通过比较Ct值的方法进行基因相对表达量计算。【结果】8个内参基因中稳定性最高的为α-tubulin;以α-tubulin为内参基因,二斑叶螨Fe-R品系GSTs 基因TuGSTo1、TuGSTd1及P450s 基因CYP3D2相对表达量均显著高于SS品系,而CCEs 基因TuCCE1的表达量有所降低。【结论】在二斑叶螨SS和Fe-R品系中α-tubulin为理想的内参基因,RT-qPCR研究表明TuGSTo1、TuGSTd1和CYP3D2相对表达量的升高可能是二斑叶螨对甲氰菊酯产生高抗性的分子机理。     

4种花椒提取物对玉米象成虫熏蒸活性的研究

在30℃下采用广口瓶密闭熏蒸法熏蒸48 h和72 h,测定青椒精油、红椒精油、一级麻素及二级麻素对玉米象Sitophilus zeamais Motschulsky成虫的熏蒸致死作用及LC50值.结果表明LC50值大小顺序为一级麻素＞二级麻素＞红椒精油＞青椒精油.进一步研究熏蒸时间和温度对青椒精油及红椒精油熏蒸活性的影响,结果表明熏蒸时间越长,LC50值越小;温度越高,校正死亡率越大,表明2种花椒精油的持效期较长,在高温下能更好地发挥药效.     

氮肥施用方式对玉米产量和肥效的影响

对氮肥不同施用方式下玉米产量和氮肥效率进行研究,结果表明:在试验条件下氮肥基施和追施中,各施氮处理均较对照增产,但以施用尿素150kg／hm2产量最佳,且两施氮时期间产量差异不显著;氮肥基施和追施中,玉米籽粒产量氮反应指数、生物产量氮反应指数和氮肥农业效率均随施氮量增加呈下降趋势,但与前两者不同的是氮肥农业效率在各施氮量间的差异显著。因此,为达到较好增产效果应控制氮肥施用量,同时可以将氮肥以基施形式施入,从而减小玉米生产中工作量。     

甜菜夜蛾成虫生物学特性研究

为明确甜菜夜蛾的生物学特性,在人工气候室(26±1)℃恒温条件下,以专用人工饲料饲喂甜菜夜蛾,研究了甜菜夜蛾成虫的羽化、交配及产卵等生物学特性.结果表明甜菜夜蛾蛹的性比为11.0430,羽化之后的成虫性比为11.0154;甜菜夜蛾羽化集中在化蛹后4～8 d,且化蛹具有显著的昼夜分布特点.夜间羽化数占总数的80%左右,其中000～800之间羽化数达一半以上;成虫单次交配持续时间为40～100min的发生概率占70.44%,85%以上的交配集中发生在夜间200～700;成虫主要在夜间产卵,其中在000～500时辰占65%以上.由上述结果可以看出甜菜夜蛾羽化、交配和产卵具有明显的生物节律,均表现出夜间特点,尤其是交配、产卵以000～600活动最为频繁.     

储粮环境中书虱猖獗发生的因子分析

近年来书虱逐渐成为储藏物环境中的优势害虫种群，严重危害储粮的品质．已引起粮食储运、植物检疫和卫生部门的高度重视。本文介绍了书虱的主要类群及生物学特性，指出其大量发生的危害性，系统讨论了在储粮环境中书虱猖獗发生的因子，指出书虱的生殖潜力及高温和高温等是有利于书虱种群发展的生态因子，而在储粮过程中采用的不恰当的熏蒸和气调处理措施则是导致书虱暴发的主要原因。     

松褐天牛生物学特性的研究

通过室外调查和室内试验,对重庆地区松褐天牛的食性、产卵寄主、产卵选择等生物学特性进行了研究。结果表明:松褐天牛成虫喜欢在马尾松、雪松、湿地松上栖息、取食和产卵,对罗汉松、园柏和柳杉取食相对较少,对怪柳和水杉几乎不取食;室内观察显示,成虫产卵前期为(5.74 0.27)d,产卵高峰期持续时间较长(约1.5个月),而产卵始期和末期时间较短,雄虫寿命(65.11 13.37)d,雌虫寿命(75.78 15.41)d;成虫一生的产卵量(155.89 67.22)粒。对有效控制松褐天牛的发生危害和松材线虫病在西南地区的传播蔓延提供一定的理论指导。     

玉米田节肢动物群落特征的时序动态

通过对玉米整个生长季节内的节肢动物群落调查，共发现节肢动物12目、39科、123种，主要为蜘蛛类、蚜虫类和瓢虫类。玉米田节肢动物群落的相对多度、丰富度、多样性指数和均匀度等群落特征表现出明显的季节动态；不同类型田的节肢动物群落组成、群落多样性明显不同。重庆地区小麦-玉米-红茹间套作类型田丰富的节肢动物群落和较大比例的天敌类群，成为控制其害虫的有效因子。     

赤拟谷盗乙酰胆碱酯酶生化及毒理学特性研究

为了阐明赤拟谷盗[Triboliumcastaneum(Herbst)]体内乙酰胆碱酯酶(AChE)在其各虫态间的变化关系,以期为该虫的综合治理提供一定的理论依据,本试验采用微量滴度酶标板法,分别对其10d龄和20d龄幼虫、蛹及成虫体内AChE的生化及毒理学特性进行了较为系统的研究。结果表明,赤拟谷盗各虫态AChE酶源蛋白含量、酶活力和比活力差异显著,酶源蛋白含量从低到高依次为:10d龄幼虫<20d龄幼虫<成虫<蛹;AChE活力和比活力依次为:成虫<蛹<10d龄幼虫<20d龄幼虫。酶动力学分析发现,AChE米氏常数Km值大小依次为:蛹<成虫<10d龄幼虫<20d龄幼虫,但成虫和蛹之间的差异不显著。此外,幼虫AChE的最大反应速度Vmax亦显著高于成虫和蛹。通过对幼虫AChE离体抑制作用测定表明,毒扁豆碱、马拉氧磷和西维因对20d龄幼虫的抑制中浓度I50均高于10d龄幼虫,说明20d龄幼虫体内的AChE对3种抑制剂的抑制作用更不敏感。     

高温和阿维菌素对朱砂叶螨的胁迫效应及热休克蛋白研究

在实验室内研究了高温和阿维菌素对朱砂叶满的胁迫效应及胁迫后热休克蛋白的表达。结果表明,朱砂叶螨在34℃下,持续高温饲养1年后对阿维菌素的LC50为26℃下饲养的敏感品系的2.1396倍;抗阿维菌素品系连续用药24代,抗性倍数达4.1494倍。抗阿维菌素品系与敏感品系在高温48℃下胁迫1h后死亡率差异不显著,但均显著高于耐高温品系;采用SDS-PAGE电泳检测各品系43℃热处理前后的蛋白表达情况,结果发现,朱砂叶螨耐高温品系与敏感和阿维菌素抗性品系相比,热急前后,97.2kDa条带都特异表达;阿维菌素抗性品系与敏感品系相比,28.5、26.8kDa条带表达增强,抗性品系43℃热激1.5h后,98.6 kDa条带表达明显强于其它条带;43℃热激1.5h后,各品系分子量为54.9kDa的主条带表达减弱,75.9kDa条带表达增强,其中以耐高温品系的75.9kDa条带表达最强。研究结果推测这些蛋白表达的变化可能与其耐热性及抗药性有关。     

环境因素对紫茎泽兰种子萌发的影响

紫茎泽兰是一种入侵性极强的外来杂草,其种子对环境条件的适应能力是其成功入侵的关键。本研究采用实验生态学的方法,在室内外系统研究了储藏条件、地面覆盖物、pH值及温度对紫茎泽兰种子萌发的影响。结果表明,紫茎泽兰种子萌发需要适合的环境条件。地面覆盖可以有效控制紫茎泽兰种子的萌发,5mm的覆盖物就可以显著降低种子发芽数量,在枯枝落叶厚度超过20mm时紫茎泽兰种子几乎不能萌发。室温条件下储藏一年,种子萌发率不低于60%,而在低温干藏（5℃）和低温沙藏（5℃）的条件下,可以有效延长种子寿命。紫茎泽兰种子对pH和温度均有一个很宽的适应范围,pH值在3.5~9.5和温度梯度在低温10℃到高温50℃/20℃之间种子均可以萌发。本研究结果对于揭示紫茎泽兰的入侵机理以及探讨生态系统对于紫茎泽兰入侵的抵御机制具有重要的参考价值。