重组鸡IL-12在接种重组新城疫病毒HN蛋白鸡中的免疫佐剂活性

本研究构建并鉴定了表达新城疫病毒HN基因的重组鸡痘病毒rFPV/HN和共表达鸡IL-12(chIL-12)与HN(rHN/chIL-12)基因的重组鸡痘病毒rFPV/HN/chIL-12。将chIL-12重组鸡痘病毒表达的rHN/chIL-12或rchIL-12与rHN联合给药,以评估chIL-12的免疫佐剂活性。用不同剂量的rHN/chIL-12与矿物油混合,对试验鸡进行肌内注射。结果表明,血细胞凝集抑制反应(HI)抗体水平与rHN或rHN/chIL-12的注射剂量有关。试验组rHN/chIL-12/7～rHN/chIL-12/9(分别肌注60ng rHN/8ng chIL-12矿物油混合物、30ng rHN/4ng chIL-12矿物油混合物、15ng rHN/2ng chIL-12矿物油混合物)的HI抗体滴度低于仅肌注rHN与矿物油混合物的试验组rHN/7～rHN/9。但是,试验组rHN/chIL-12/7或rHN/chIL-12/8与rHN矿物油组的试验鸡表现出了相同的保护效果,试验组rHN/chIL-12/9甚至表现出比rHN/9组更好的保护作用。当rchIL-12与15ng rHN和矿物油共同注射...     

液态地膜对土壤物理性状的影响及增产效果

利用室内模拟试验和田间试验对抚顺研制的两种液态地膜试样品“F1”和“F2”对土壤物理性状的影响和在冬小麦的应用效果研究。结果表明:液态地膜可增加水稳性团粒和土壤稳定性熵(QS),降低土壤容重,增加土壤孔隙度,饱和导水率成倍增加,有利土壤蓄水保墒;可提高冬小麦的产量,产量随着用量的增加而增加,最高可达6.5%;产量的提高主要通过增加亩穗数和穗粒数实现的;当用量相同时,F2增产效果好于F1。     

一株猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的分离与鉴定

试验旨在分离并鉴定从发病猪场分离的一株疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株。从某疫情猪场病猪体内分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株,经细胞传代培育成功增殖性能稳定的新毒株,命名为PRRSV-CHD。该毒株接种细胞后能够产生细胞病变(CPE),病毒滴度达10^-6 TCID50/0.1 mL,在Vero与BHK-21细胞上不出现细胞病变。采用间接免疫荧光法(IFA)检测病毒抗原分布在细胞浆中。与VR2332、CH-1a、HUN4序列比对及系统进化树分析结果表明,该分离株属于美洲型PRRSV;与PRRSV VR2332、CH-1a等比对,Nsp2基因序列在2780—2782 nt有3个核苷酸小缺失和2933—3019 nt的87个核苷酸大缺失,属PRRSV变异株。     

实时定量PCR检测转基因绵羊拷贝数

[目的]利用高通量、快速、灵敏的实时荧光定量PCR法,检测转类胰岛素样生长因子1-红色荧光蛋白基因(insulin-like growth factor 1-red fluorescent protein,IGF1-RFP)绵羊中外源基因的拷贝数.[方法]以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)作为绵羊的内源参照基因,梯度稀释法.[结果]分别获得RFP和GAPDH基因的Q值与起始模板数的相关性标准曲线,R2分别为0.999和0.999,相关性高.通过比较目的基因RFP和GAPDH起始模板数,得到外源基因在转基因绵羊中的拷贝数.编号0152、0216、0217、0218的转基因绵羊拷贝数分别为3、1、1、1.[结论]以IGF-Ⅰ转基因细毛羊为研究对象,针对外源基因序列和内源参照基因序列设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR法对IGF-Ⅰ转基因细毛羊外源基因的拷贝数进行检测,并且准确检测外源基因的拷贝数.     

针叶树种体细胞胚胎发生影响因素浅析

本文综述了针叶树体胚发生的影响因素,并提出了展望,以期为今后针叶树体细胞胚胎发生体系研究及应用提供参考.     

中国梦视域下长征精神新探

长征精神是中华民族传统美德,这种不屈不挠的精神是我们发展和成长、从渺小到巨大转变的重要动力。中国梦内涵丰富,对社会主义发展意义重大,中国梦推进下我们把长征精神理解为中国特色社会主义精神主旨的发展和深化。重新探讨中国梦推动下长征精神的时代意义,能够更好地发展自己、发展中国,从而实现中国梦。     

青海云杉成熟胚胚性组织诱导研究

以青海云杉4个种源成熟胚为外植体,在4种基本培养基和含有不同激素组合的改良1/2LV培养基中进行体胚诱导,结果表明:改良1/2LV培养基为最适宜基本培养基,以此培养基为基础附加6-BA 2.25 mg·L~(-1)+2,4-D 6.60 mg·L~(-1)对1#、2#、4#种源诱导率均超过30%,分别达到38.9%、33.4%、35.4%,对3#种源诱导率也达到29.6%。在同一水平激素组合处理中,1#、4#种源诱导率高于2#、3#种源,原生种源外植体易于启动并完成脱分化过程,而人工次生种源外植体则不易被诱导。     

2株重组犬冠状病毒株的分离、组织分布与分子特征分析

犬冠状病毒(CCoV)是一种有包膜的RNA病毒,引起犬胃肠道的感染。迄今,CCoV已鉴定出两种不同的基因型,CCoVⅠ型和CCoVⅡ型。近年来,已检测到与传播性胃肠炎病毒有潜在重组起源的CCoVⅡ型毒株(CCoV-Ⅱb),并鉴定为新亚型,以区别于"经典"CCoVⅡ型株(CCoV-Ⅱa)。本研究在两只出现胃肠道症状后死亡的幼犬体内检测出两株CCoV-Ⅱb型病毒。在粪便中检测到两种亚型(CCoV-Ⅱa/Ⅱb)的混合感染,但在脏器中只检测出了CCoV-Ⅱb。同时,检测到幼犬被犬细小病毒2型(CPV2)感染。两株CCoV-Ⅱb毒株均在细胞培养物中分离出,并进行了序列分析和系统发育分析,通过RT-PCR和实时定量PCR的方法,进行了组织分布和病毒载量分析。本研究首次描述了CCoV-Ⅱb毒株在脏器中的组织分布并进行了定量。CCoV-Ⅱa毒株仅在粪便中检测到,提示了在CPV2共感染的犬类动物中,CCoV-Ⅱb毒株与常见的肠道CCoV-Ⅱa型毒株相比,可能在散播上更具优势。     

电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化

[目的]采用实验室配制的电转液L,优化绵羊成纤维细胞的转染效率.[方法]利用Lonza 4D-Nucleofector设备,针对实验室配制的电转液L,将P max绿色荧光蛋白表达质粒导入绵羊成纤维细胞中,通过流式细胞仪测定和荧光显微镜观测细胞转染效率.[结果]通过测定细胞转染效率,得到较佳电转方案:L电转液100μL悬浮绵羊成纤维细胞,采用CZ-167电转程序,质粒浓度4 g,2×106个细胞,电击一次,电转后37℃放置10 min可获得理想的转染效率.