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61.
利用PCR技术检测鸡肉产品中的空肠弯曲杆菌 总被引:7,自引:0,他引:7
根据空肠弯曲杆菌旋转酶基因(gyrAgene)的保守序列,设计1对引物,建立了快速检测鸡肉中空肠弯曲杆菌的PCR方法。采用该方法和生化试验对送检的100份鸡肉样品进行检测,结果表明:PCR方法能特异性地扩增出空肠弯曲杆菌192bp核苷酸片段,其它结肠弯曲杆菌、肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、副溶血性弧菌、产气荚膜梭菌、绿脓假单胞菌等均不能获得阳性扩增结果。检测限度为8cfu/mL。鸡肉肉水、增菌液和纯培养菌落的PCR鉴定结果,阳性率分别为16%、24%和20%,生化鉴定检出率为20%。 相似文献
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以鸡痘病毒(FPV)疫苗株为载体,将H5亚型AIV血凝素基因(HA)和鸡白细胞介素18(IL-18)基因分别插入到鸡痘病毒表达载体pUTA-16-LacZ复合启动子(ATI-P7.5×20)和单一启动子(P7.5)下游,构建了携带AIV HA基因和鸡IL-18基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-H5HA-IL18.将H5亚型AIV HA基因插入到鸡痘病毒表达载体pUTA2复合启动子(ATI-P7.5×20)下游构建了携带H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTA2-H5HA.应用脂质体转染法,将重组鸡痘病毒转移载体质粒与282E4株鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),在BrdU药物加压下进行3次蚀斑筛选.以不同代次细胞的mRNA为模板,利用H5亚型AIV HA基因和鸡IL-18基因特异引物进行RT-PCR和蛋白印迹检测,筛选出能共表达H5亚型AIV HA基因与鸡IL-18基因和单独表达H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒rFPV-H5HA-IL18和rFPV-H5HA,这些重组鸡痘病毒的构建为AIV活载体疫苗的研制奠定了基础. 相似文献
65.
O型口蹄疫病毒不同基因型联合RT-PCR检测方法的建立 总被引:7,自引:0,他引:7
在比较国内外口蹄疫病毒(FMDV)流行毒株序列的基础上,设计了检测FMDV的PCR引物及O型FMDV不同基因型即中国型(Cathay)与乏亚株(PanAsia)的二联PCR引物。在确定单项RT-PCR反应条件的基础上,建立、优化了二联RT-PCR反应体系和条件,并进行了相关病毒检测试验。结果表明,建立的检测O型FMDV不同基因型中国型与泛亚株的二联RT-PCR,有效、特异且敏感,为FMD的诊断、流行病学调查及疫苗应用奠定了基础。 相似文献
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(一)病因
乳房炎的发病原因主要是由于病原菌的侵入,以及造成感染的各种诱因,如外伤、挤奶技术不佳、环境卫生不良、饲养管理失宜、激素失调、乳房缺陷和其他疾病诱发等。 相似文献
70.
目前大型油罐泡沫液储备量主要根据《低倍数泡沫灭火系统设计规范》或依据浮顶油罐泡沫发生器保护周长来确定,而在扑救大型油罐火灾的实际过程中发现,两种计算方法都过于理想化,仅适用于油罐罐壁与泡沫堰板成矩型的设计,讨论了大型油罐泡沫液储备量的计算方法,并针对如何提高灭火效率提出了改进意见。 相似文献