鸡肿瘤坏死因子α基因片段的分子克隆及序列测定

应用LPS诱生的鸡培养白细胞提取总RNA,参考几种动物的TNFα保守序列设计一对引物,以提取的培养白细胞总RNA为模板,通过RT-PCR扩增目的基因片段,将PCR产物与PUC19连接,转化到大肠杆菌DH52进行分子克隆,对提取的重组质粒经PCR鉴定和酶切鉴定,表明重组的基因片段是目的基因片段,其长度为576bp。     

烟草病毒病预测模型的初步研究

据１９８０～１９９５年间的有关数据资料，以月均温和降雨量为预测因子，以６月下旬烟草花叶病病情指数为预报量，对山东青州烟区花叶病的发生流行初步建立预测模型，通过验证该模型准确度高，可适用于黄淮烟区的烟草花叶病流行中期预测     

反向遗传学技术的应用

反向遗传学是直接从遗传物质入手研究生命现象与规律,其相应的操作技术已在生命科学研究的各个领域显示出了广泛的应用前景。作者对反向遗传学技术的应用进行了评述。     

牛源致病性大肠埃希菌K99对小鼠肠绒毛生长和肠三叶因子mRNA表达的影响

通过研究大肠埃希菌对小鼠肠绒毛生长和肠三叶因子mRNA表达的影响,探讨牛源致病性大肠埃希菌感染与肠黏膜上皮细胞再生的相互关系。选取Balb/c小鼠,分成空白对照组、Brdu组(Brdu)和E.coli感染组(Brdu+E.coli),并于不同时间点(6、12、24、30、36、48、60h)采集小鼠十二指肠、空肠和回肠组织。用HE染色观察病理组织学变化,并测量肠绒毛长度和隐窝深度;用免疫组化染色检测肠黏膜上皮细胞中Brdu阳性信号;用PAS染色检测杯状细胞数;用real-time PCR检测肠黏膜组织中ITF mRNA表达水平。结果显示,空白对照组和Brdu组肠组织结构无明显变化。E.coli感染小鼠肠组织6h^36h后,十二指肠、空肠绒毛萎缩或崩解成碎片脱落,隐窝变深;其他时间未见明显变化。E.coli感染小鼠后6h^36h,Brdu阳性信号在上皮细胞中的移动距离极显著高于Brdu组(P<0.01)。E.coli感染小鼠后6h^60h,十二指肠、空肠、回肠中的杯状细胞数均显著低于空白对照组和Brdu组(P<0.01)。E.coli感染小鼠后6h^36h,小肠组织中ITF mRNA表达极显著低于空白对照组和Brdu组(P<0.01)。牛源致病性E.coli感染小鼠后,既可引起小肠黏膜上皮细胞的损伤和抑制ITF mRNA表达,也能够促进小肠绒毛上皮细胞的生长。     

绵羊肺腺瘤病毒内蒙古株的分离与观察

以内蒙古某羊场自然感染绵羊肺腺瘤病的病肺组织4例和3月龄绵羊胎肺2例作为材料，对胎肺细胞进行了原代培养并接种绵羊肺腺瘤病毒悬液，进行了绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的分离，同时采用电镜负染色技术和超薄切片透射电镜技术对上述样品进行了观察。结果表明，自然感染绵羊肺腺瘤病的4例病肺组织中都有散在的病毒粒子，其直径为100～125nm，接种病毒悬液的胎肺细胞从第2代到第9代均出现细胞病变，但对绵羊胎肺培养的病毒悬液电镜负染色观察未发现典型的病毒粒子，而超薄切片透射电镜观察发现了病毒样粒子。     

烟草病毒病的综合防治

近年来,由于农业产业结构调整、种植品种的变化,以及气候变化等诸多因素影响,烟草病毒病已上升为制约烟草生产的主要病害。烟草病毒病种类多,分布广,株系复杂,复合侵染普遍,田间症状识别困难,防治更加困难。防治烟草病毒病,目前还没有1种治疗效果较理想的药剂,必须采用以选育抗病良种,改进农事操作,优化耕作制度为主,以少量低毒、低残留农药的化学防治为辅的综合防治措施。1选育和推广应用抗病良种实践证明,抗性品种的利用是控制有害生物的最经济、有效的手段。目前还没有能抗一切病毒病的烟草品种。要充分挖掘对某些病毒病抗(耐)性较强的烟…     

预防肉牛疫病的技术要点

肉牛的疾病防治应坚持"预防为主,防重于治"的方针,实行科学的饲养管理,坚持防疫卫生制度,采取综合防治措施,是控制和消灭牛病的关键.     

J亚群禽白血病病毒人工感染肉鸡病理学及组织嗜性研究

本试验从内蒙古某地养鸡场分离出一株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),命名为ALV-J IMC10200株.通过人工感染试验建立发病模型,对诱发的肉鸡典型禽骨髓细胞瘤病的病理学变化和病毒的组织嗜性进行研究,为进一步探索本病发病机理、病毒的生物学特性奠定基础.     

LA-PCR技术及其优势

上世纪90年代发展起来的LA-PCR(Long and accurate polymerase chain reaction)技术,以其扩增片段长,保真性(Fidelity)高的独特优势,被广泛地用于基因组测序、遗传多态性分析、病毒的遗传变异分析、病毒拯救、病理诊断等多个方面。本文将对LA-PCR技术的基本原理和其独特的优势作一综述。