烟粉虱味觉受体基因BtabGR1和BtabGR2的克隆与表达模式分析

【目的】烟粉虱（Bemisia tabaci）为世界性分布的重要农林入侵害虫,寄主植物种类众多,但对不同寄主植物存在嗜性差异,而味觉受体（gustatory receptor,GR）基因在其取食选择等行为中发挥重要作用。本研究通过克隆烟粉虱味觉受体GR1和GR2基因,明确其在烟粉虱不同发育期和成虫不同组织中的表达特性,为基因功能的深入研究提供依据。【方法】从烟粉虱MED隐种成虫头部转录组中筛选获得味觉受体基因序列,利用巢式PCR技术克隆获得两个味觉受体基因的完整开放阅读框（open reading frame,ORF）序列,两个基因分别命名为BtabGR1和BtabGR2,运用生物信息学软件对其编码氨基酸序列特征、结构域等信息进行预测,基于邻接法构建BtabGR1、BtabGR2与其他半翅目昆虫味觉受体基因的系统进化树,并利用实时荧光定量PCR方法分析两个基因在烟粉虱不同发育期（卵、1—4龄若虫和雌、雄成虫）和雌、雄成虫不同组织（头、胸、腹、足）中的表达情况。【结果】克隆获得BtabGR1和BtabGR2基因序列（GenBank登录号：OL845904和OL845905）,完整开放阅读框为1 287和1 344 bp,分别编码428和447个氨基酸,预测蛋白分子量为 48.54和51.50 kD,理论等电点为8.85和8.74,具有4个和6个跨膜结构域。氨基酸序列比对和系统进化分析结果显示,BtabGR1 和BtabGR2与其他半翅目昆虫GR28b和GR43a-like基因亲缘关系较近。发育期表达谱分析表明,BtabGR1和BtabGR2在烟粉虱的不同发育历期均有表达,其中BtabGR1在成虫中表达量高于其他发育期,而BtabGR2在卵中的表达量最高;组织表达谱结果表明,BtabGR1和BtabGR2在烟粉虱雌、雄成虫不同组织中均有表达,且均在成虫头部高表达。【结论】BtabGR1和BtabGR2具有昆虫味觉受体基因的典型特征,二者均在烟粉虱成虫头部高表达,推测两基因在烟粉虱寄主植物适应过程中发挥重要作用,可作为烟粉虱新型防控措施的潜在靶标。     

县域绿色发展与改革试点的集成探索及其对策研究——以广西乐业县为例

2021年乐业县被确定为广西绿色发展与改革试点县,全面探索实施绿色发展,促进县域发展高质量转型。本文在基层实地调研结果的基础上,针对乐业县绿色发展与改革实践问题进行分析,总结乐业县全面推动绿色发展思路,探索由政府主导,内环“绿色循环农业+康养旅游+低碳能源产业”、外环“基础设施建设+生态环境保护+有效监管”的乐业县绿色发展与改革的集成模式,以系统优化、集成思维破解经济社会发展的难点与堵点,推动改革综合措施有效落地,最大程度提升改革整体效应,以“生态+”为抓手,构建科技含量高、经济效益好、资源消耗低、环境污染少的产业结构和现代绿色产业体系,推动绿色发展。就发展对策而言,本文提出了贯彻绿色发展理念、强化政府综合管理职能、优化创新人才结构、保障资金投入和科技支撑、提高绿色转型升级质量、大力建设绿色工业项目、发展清洁能源、拓宽绿色产业发展渠道、建立“政社企民”共同参与的大格局等建议,并对未来县域高质量绿色发展提出了设想与展望。