烟草青枯病拮抗菌株X-60的分离鉴定及其表型组学分析

 为了探寻烟草青枯病的生防菌剂,本研究以烟草青枯病菌为指示菌,从烟草根围土壤中分离获得拮抗细菌X-60,其抑菌圈大小约为37 mm。经形态观察、Biolog鉴定及16S rDNA序列分析,该细菌为解淀粉芽孢杆菌。抗菌谱测定表明,它对烟草灰霉病菌、烟草炭疽病菌、烟草黑胫病菌和烟草赤星病菌均具有较强的拮抗作用,菌丝生长抑制率分别为51.28%、58.97%、60.53%和72.78%。温室盆栽试验表明,X-60菌液灌根对烟草青枯病发生具有良好的预防作用。表型芯片研究结果表明,解淀粉芽孢杆菌能代谢41%的碳源、77%的氮源、86%的磷源、69%的硫源,具有91种生物合成途径;72种碳源、45种氨基酸类氮源和190余种肽类氮源均能显著促进该菌的生长;其高效代谢的磷源有二硫代磷酸盐和半胱胺S-磷酸盐,高效代谢的硫源有硫代硫酸盐、S-甲基-L-半胱氨酸和硫辛酰胺。研究结果为解淀粉芽孢杆菌X-60生防菌剂的开发及将其应用于烟草青枯病的生物防治提供了理论基础。     

六种杀菌剂对烟草赤星病菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用

采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定了烟草赤星病菌Alternaria alternata对6种杀菌剂(氟硅唑、异菌脲、菌核净、嘧菌酯、醚菌酯及多菌灵)的敏感性。结果表明:6种杀菌剂对烟草赤星病菌菌丝生长和分生孢子萌发均表现出了不同程度的抑制活性。其中,对菌丝生长抑制活性最强的是氟硅唑,EC50平均值为(0.34±0.11)mg/L,其次为菌核净[(1.13±0.68)mg/L]和异菌脲[(2.08±0.24)mg/L];对分生孢子萌发抑制活性最强的是嘧菌酯协同100 mg/L水杨肟酸,EC50平均值为(0.28±0.09)mg/L,其次分别为单独处理的嘧菌酯[(5.79±2.76)mg/L]、醚菌酯[(11.93±3.93)mg/L]、菌核净[(19.95±15.94)mg/L]和异菌脲[(23.33±11.33)mg/L]。多菌灵对烟草赤星病菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制活性均最差,不宜用于烟草赤星病的防治,而异菌脲、氟硅唑、嘧菌酯和醚菌酯均有必要进一步针对烟草赤星病进行田间防效试验。     

烟叶米根霉检测、碳源代谢表型及其对7种杀菌剂的敏感性

采用组织分离法检测了烘烤烟叶霉烂病病原菌米根霉Rhizopus oryzae,采用Biolog FF代谢板分析了其碳源代谢表型特征,并测定了其对7种杀菌剂 (多菌灵、异菌脲、咪鲜胺、氟硅唑、丙环唑、苯醚甲环唑和嘧菌酯) 的敏感性。结果表明:米根霉在田间烟叶、编烟杆和编烟绳上的检出率均为100%。米根霉能代谢和产孢的碳源分别有66和30种,主要包括核糖醇、D-阿拉伯醇和?-环式糊精等;不能代谢和产孢的碳源分别有29和65种,包括α-环式糊精、L-海藻糖和D-半乳糖醛酸等。7种杀菌剂对烟草米根霉的菌丝生长均表现出不同的抑制作用,抑菌活性最强的是氟硅唑和苯醚甲环唑,其EC₅₀值分别为8.31和9.71 mg/L;其次为丙环唑、异菌脲和咪鲜胺,其EC₅₀值分别为14.24、32.84及 > 10 mg/L;最弱的为嘧菌酯和多菌灵,其EC₅₀值均 > 100 mg/L。研究结果可为烘烤烟叶霉烂病化学防治提供参考和依据。     

五种杀菌剂胁迫下灰葡萄孢产孢所需碳源种类分析

灰葡萄孢是引起作物灰霉病的病原菌,分生孢子是其传播的主要载体.本文采用代谢技术分析了灰葡萄孢对Biolog FF板碳源的利用及其产孢情况,并测定了在多菌灵、丙环唑、嘧霉胺、异菌脲和咪鲜胺5种杀菌剂胁迫下灰葡萄孢产孢所需碳源种类.结果表明:糖类、氨基酸类等92种碳源均能被灰葡萄孢代谢,其中,杏仁苷、L-阿拉伯糖等35种碳...     

宏基因组解析溴氰虫酰胺对小菜蛾肠道菌群结构的影响

【目的】探究溴氰虫酰胺胁迫对小菜蛾肠道酶活、微生物菌群、相关功能基因及抗性基因的影响,为双酰胺类杀虫剂处理小菜蛾肠道微生物的结构和功能研究提供参考。【方法】采用宏基因组测序技术研究浓度为0.15 mg/L溴氰虫酰胺浸叶饲喂小菜蛾后其肠道微生物群落结构及其功能的变化情况。【结果】溴氰虫酰胺浸叶饲喂后小菜蛾肠道中羧酸酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性显著增高,而多功能氧化酶活性显著降低。溴氰虫酰胺未处理与处理小菜蛾肠道的微生物分别注释到34和35个门、66和64个纲、120和125个目、200和214个科、261和294个属、347和401个种,其中微孢子门(Microsporidia)、厚壁菌门(Firmicutes)为处理与对照组的共有优势菌门,小孢子虫属(Nosema)、肠球菌属(Enterococcus)为处理组与对照组的共有优势菌属,但溴氰虫酰胺处理后2种优势菌属的相对丰度均有降低。小菜蛾肠道微生物在eggNOG与KEGG数据库中分别注释到11 682和6437个功能基因,分布于水化合物转运与代谢、翻译后修饰、蛋白质翻转、遗传信息处理等功能类群;在CAZy和CARD数据库中分别注释到...     

4种杀菌剂对烟草靶斑病菌的抑菌活性

【目的】评价菌核净、苯醚甲环唑、嘧菌酯和代森锰锌对靶斑病菌的生物活性,为防治烟草靶斑病寻找新的高效替代药剂提供参考。【方法】采用菌丝生长速率法测定苯醚甲环唑、菌核净、嘧菌酯、代森锰锌4种杀菌剂对烟草靶斑病菌菌丝生长和菌核形成的抑菌活性,并评价其田间药效。【结果】10%苯醚甲环唑WP、25%嘧菌酯SC、40%菌核净WP和80%代森锰锌WP 4种杀菌剂对靶斑病菌菌丝生长和菌核形成均表现不同抑菌活性。其中,对菌丝生长抑制最强的是菌核净,其平均EC50值为1.72 mg/L,其次为嘧菌酯（15.71 mg/L）和苯醚甲环唑（16.80 mg/L）,最弱为代森锰锌。对菌核形成抑制最强的是菌核净,2.5 mg/L处理抑制率达100%,其次为嘧菌酯和苯醚甲环唑,代森锰锌最弱。40%菌核净WP 120 g/667m2、25%嘧菌酯SC 40 mL/667m2、10%苯醚甲环唑WG 60 g/667m2及80%代森锰锌WP 200 g/667m2处理,9 d后防效分别为90.59%、61.76%、52.12%和13.41%;对病斑抑制率分别为53.55%、75.10%、64.09%和7.31%。【结论】苯醚甲环唑、嘧菌酯可作为烟草靶斑病防控的优选药剂。     

温度对烟草赤星病菌生物学特性及代谢表型的影响

为了解温度对烟草赤星病菌致病力及代谢表型的影响, 本研究采用菌丝生长速率法和离体叶片法, 分别测定不同温度下烟草赤星病菌的生长速率和致病力, 同时采用Biolog代谢表型技术测定了其在22?25?30℃和35℃下不同碳源?渗透压和pH下的代谢表型?结果表明, 烟草赤星病菌在15~35℃下均可生长, 30℃时菌丝生长最快?致病力和产孢能力最强, 35℃时孢子萌发率最高?在22?25?30℃和35℃时, 赤星病菌均可代谢Biolog FF代谢板上的95种碳源, 且随着温度升高对碳源的代谢能力逐渐增强?22℃和25℃时烟草赤星病菌对渗透压的适应范围最广, 其次为30℃, 35℃时适应范围最窄?在22?25?30℃和35℃时, 赤星病菌在pH 3.5~10范围内均可正常代谢, 在22?25℃和30℃下, 赤星病菌表现出强脱羧酶活性和弱脱氨酶活性, 在35℃下, 其脱羧酶和脱氨酶活性均相对较弱?研究结果揭示了烟草赤星病菌在不同温度下的适应能力, 为赤星病菌与环境互作研究提供了参考?     

7.2亿CFU/g嘧泰多抗复合微生物菌剂对烟草靶斑病和野火病的防效研究

为研究新生防制剂7.2亿CFU/g嘧泰多抗复合微生物菌剂对烟草靶斑病和野火病的防效，开展了不同药剂室内抑菌试验和田间药效试验。结果表明，7.2亿CFU/g嘧泰多抗复合微生物菌剂300倍液对烟草靶斑病病原菌和野火病病原菌的室内抑菌率均在60%以上；第3次药后，7.2亿CFU/g嘧泰多抗复合微生物菌剂300倍液对烟草靶斑病和野火病的田间防效均在65%以上，持效期长。7.2亿CFU/g嘧泰多抗复合微生物菌剂可作为兼防烟草靶斑病和野火病的推荐生防药剂。     

五种药剂对烟草青枯病菌的抑制活性及碳代谢的影响

由茄科劳尔氏菌Ralstonia solanacearum引起的烟草青枯病是烟叶生产上的重要病害之一，严重影响烟叶的产量和品质。为筛选高效防治烟草青枯病的药剂，本研究采用平板菌落计数法测定了中生菌素、土霉素、噻霉酮、春雷霉素和氯溴异氰尿酸对茄科劳尔氏菌的抑制活性，并通过Biolog GEN Ⅲ微平板法分析了上述5种药剂胁迫下茄科劳尔氏菌的碳代谢情况和对化学物质的敏感性差异。结果表明：5种药剂均能抑制茄科劳尔氏菌的生长，抑制活性从强到弱依次为中生菌素>土霉素>噻霉酮>春雷霉素>氯溴异氰尿酸，对应的EC50值分别为0.24、0.74、2.84、7.95和273.99 mg/L。Biolog GEN Ⅲ碳代谢测定结果显示：茄科劳尔氏菌能利用Biolog GEN Ⅲ微平板中糖类及氨基酸类等71种碳源，但在药剂胁迫下，该菌对碳源的代谢受到了不同程度的抑制，其中抑制程度最显著的是氨基酸、己糖酸、羧酸、酯和脂肪酸类碳水化合物；随着5种药剂质量浓度增加，在6 mg/L中生菌素、8 mg/L土霉素、30 mg/L春雷霉素和5738 mg/L氯溴异氰尿酸胁迫下，茄科劳尔氏菌对Bio...     

菌核净对烟草靶斑病菌的抑制作用及对烟叶叶际微生物群落结构的影响

烟草靶斑病是烟叶生产上一种主要真菌性病害，为评价菌核净防控烟草靶斑病的潜力，并从微生态层面揭示菌核净施用后对烟叶叶际微生物群落结构的影响，本研究采用菌丝生长速率法，测定了菌核净对烟草靶斑病菌的抑制活性，并利用Illumina Hiseq高通量测序技术，分析了菌核净处理后不同持效期内，健康与感病组织中叶际真菌及细菌群落结构和多样性的变化规律。结果表明：菌核净对靶斑病菌菌丝生长有较强的抑制活性，其EC₅₀值为1.20μg/mL，在6.47μg/mL下即可完全抑制菌丝生长。40%菌核净可湿性粉剂按有效成分4200 g/hm²剂量施用后0～18 d，健康与感病组织的叶际微生物群落结构间均存在显著性差异，其中叶际真菌优势菌属为亡革菌属、链格孢属和镰刀菌属，叶际细菌优势菌属为假单胞菌属、葡萄球菌属和鞘氨醇单胞菌属。施药后3 d，健康与感病组织中亡革菌属相对丰度分别下降12.41%和51.62%，链格孢属相对丰度分别上升0.54%和0.42%，假单胞菌属相对丰度分别下降13.48%和19.17%；施药后9 d，亡革菌属相对丰度分别上升1.38%和47.42...