大肠杆菌属16S rDNA实时荧光定量PCR方法的建立及应用

根据GenBank大肠杆菌属16S rDNA基因序列设计并合成PCR引物及针对大肠杆菌属的特异Taqman探针,以大肠杆菌标准菌株的PCR扩增产物作为阳性模板制定标准曲线,建立大肠杆菌属实时荧光定量PCR检测方法。该法Mg2＋最佳工作浓度5 mmol/L,探针最佳工作浓度0.12μmol/L,标准曲线相关系数为0.998,能够定量和特异性检测大肠杆菌而与肠道优势菌群的代表种葡萄球菌、双歧杆菌和芽孢杆菌呈阴性反应,检测大肠杆菌16S rDNA基因的灵敏度达40.8 copies/μL。应用建立的方法对20、26、324、1、47、56日龄樱桃谷鸭的气管、食道、十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠进行检测结果表明（以每个细菌含1个16S rDNA基因拷贝数计）,大肠杆菌属细菌总量,气管内为7.06×10^7～3.01×10^8个;食道内为1.73×10^8～3.23×10^8个;十二指肠内为2.29×10^8～2.39×10^9个;空肠内为1.28×10^8～1.69×10^9个;回肠内为1.86×10^8～1.90×10^10个;盲肠内为6.01×10^8～1.38×10^9个;直肠内为1.07×10^8～4.67×10^10个。樱桃谷鸭从食道到直肠的大肠杆菌属细菌的数量呈现上升趋势,盲肠和直肠分布量较多。     

抗病毒药物在兽医临床上的应用及存在的问题

由病毒引起的疾病在动物传染病中占有很大的比例 ,由其引起的动物死亡率在所有病例中居第 2位 ,仅次于细菌 ,占 3 6 8% [1 ] ,且有上升趋势。应用抗病毒药物是防治病毒病的主要手段之一 ,近几年来 ,发展迅速。由于病毒独特生物学特性及不同于细菌的生活和繁殖方式 ,使在病原抑杀和疾病防治上造成困难 ,给畜牧业生产造成了巨大的损失。1　抗病毒药物作用的机制( 1 )直接抑制或杀死体内病毒 ;( 2 )抑制病毒的生物合成 ;( 3 )阻止病毒穿入细胞或抑制病毒释放 ;( 4 )增强宿主抗病毒能力。2　抗病毒药物[1,2 ,3,4 ,5 ]2 .1　抗病毒细胞因子病毒感…     

应用TaqMan-MGB探针FQ-PCR探讨鸭瘟弱毒苗在鸭体内的分布及排泄规律

用鸭瘟病毒(DPV)Cha株弱毒苗皮下注射免疫20日龄樱桃谷鸭,应用TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对免疫后10、30、609、0 min及12、24 h和6、9、12、21、366、0 d鸭的心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、法氏囊、哈德氏腺、回盲处、血液、气管、气管分泌液、食管及其分泌液、十二指肠、空肠、回肠、肓肠、直肠及各肠段分泌液中DPV-DNA的拷贝数(以对数值表示)进行了检测。结果显示,免疫后10 min即可在胸腺和血液中检测到DPV-DNA;60 min肾脏中DPV-DNA拷贝数最高(9.349);脾(9.932)、脑(9.791)、胸腺(9.736)、法氏囊(9.598)及哈德氏腺(8.135)中DPV-DNA拷贝数于90 min分别达到最高;12 h后所有受检样品中都能检测到DPV-DNA,其中心脏中DPV-DNA拷贝数最高(9.818);肠道中DPV-DNA拷贝数在免疫后6~12 d明显高于其他组织,其中盲肠是DPV-DNA拷贝数(10.591)最高的受检样品,直肠分泌液中DPV-DNA最早于90 min检测到。研究表明,免疫鸭于免疫早期在包括主要免疫器官在内的各实质...     

马鞍型焊缝空间轨迹规划研究

弧焊机器人在进行马鞍型焊缝焊接过程中,不仅要保证运动轨迹而且要保证焊枪姿态和各点焊接参数的合理性以保证焊接质量。本文以马鞍型焊缝为研究对象,利用机器人仿真软件进行弧焊机器人系统进行仿真,对马鞍型焊缝焊接路径的规划和焊枪位姿的优化调整进行探索和研究,生成离线编程数据,仅供参考。     

基于stm32微控制器的高位水箱供水自动控制与质检装置的设计

本设计基于stm32微控制器,提出了高位水箱供水自动控制与质检装置的设计方案,给出了该系统的硬件结构框架与软件设计流程。本设计在高性能MCU的基础上,具有成本低、控制精度高、安全可靠等特点。     

H2O2对葡萄离体叶片白藜芦醇的诱导作用

[目的]葡萄叶片白藜芦醇含量较虎杖根含量低,难以作为药用提取用途,研究采用诱导剂升高葡萄离体叶片中白藜芦醇的含量.[方法]实验采用H2O2对离体红地球葡萄叶片进行诱导,采用薄层及高效液相色谱法分析白藜芦醇的含量变化,并使用RT - PCR方法分析茋合酶基因(STS)的表达量变化.[结果]H2O2对离体叶片茋类物质具有显著的诱导作用,诱导白藜芦醇的积累呈现显著的量时依赖性;5;H2O2处理48 h后叶片白藜芦醇含量可提高15倍以上,鲜重达到263 μg/g.[结论]H2O2可以作为葡萄离体叶片白藜芦醇的有效诱导剂.     

超声波提取杜仲叶的工艺研究

运用超声波技术提取杜仲叶,具有防止提取物在长时间高温下氧化褐变,并有省时,节能,提取率高等优点,其最佳提取工艺参数为１３－２６ｋＨｚ,低频超声处理４５ｍｉｎ,温度５０℃左右,另外,还就超声波在提取中的作用机理进行了讨论。     

林权登记发证工作要把握好六个关键环节

林权登记发证是一项政策性很强的工作,直接涉及到林农的切身利益。本文介绍了潞城市林权登记发证的主要经验,对于目前正在进行的集体林权制度改革具有借鉴作用。     

孵育时间对UV-C辐射处理离体葡萄叶片茋类物质含量和种类的影响

[目的]茋类物质是一类重要的次生代谢产物,其在葡萄属植物中承担了重要的病理及生理作用.以往研究发现UV-C照射会引起茋类物质白藜芦醇含量升高,研究UV-C照射后离体叶茋类物质含量与时间的变化关系及与叶龄的关系.[方法]采用不同叶龄的红地球葡萄离体叶片为材料,应用HPLC检测UV-C处理后的不同孵育时间叶片茋类物质的变化规律,以及叶龄对诱导效果的影响特征,同时利用RT-PCR技术对其生物合成途径限速酶基因表达规律进行研究.[结果]UV-C处理后随暗孵育时间的增加,老叶中的茋类物质比率及种类变化较大.诱导后24h时白藜芦醇苷达到376 μg/g,白藜芦醇高达258 μg/g,紫檀茋515μg/g,ε-viniferin达到22μg/g,分别是空白组的1.6、50、100以及62倍.[结论]在UV-C处理离体葡萄叶后,叶龄和暗孵育时间对叶片的茋类物质的积累有重要的影响.老叶在UV-C辐射后24 h茋类物质的种类最多,总含量较高.     

尿素与液态脲甲醛缓释氮肥配施对棉花生长与氮素吸收利用的影响

研究不同施氮水平下,尿素与液态脲甲醛缓释氮肥不同比例配施对棉花生长发育、干物质积累量、棉花各器官氮素积累量、氮肥利用率以及产量的影响,为新疆滴灌棉田高产施氮管理提供理论依据。试验选用棉花品种新陆早64号,设置2种施氮方式,分别为常规全施尿素(T2)和尿素与缓释氮肥不同比例配施(US);配施处理按照施氮量设3个水平,分别为不减氮U_0.8S_0.2(T3)和U_0.6S_0.4(T4)、减氮20%U_0.6S_0.2(T5)和U_0.4S_0.4(T6)、减氮40%U_0.4S_0.2(T7)和U_0.2S_0.4(T8),不施氮肥(T1)为对照,共8个处理。分别在苗期、蕾期、花期、铃期、吐絮期对棉花株高、SPAD值、干物质累积量进行测定,并分析植株氮素积累量、氮肥利用率和单株产量。结果表明：尿素与缓释氮肥配施可以促进棉花的生长发育和产量,不减氮水平下...