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62.
薄皮甜瓜果实ACC合成酶cDNA克隆及反义表达载体的构建 总被引:3,自引:0,他引:3
从成熟的薄皮甜瓜(Cucumis melo cv.Qitian I)果肉组织中分离总RNA,经RT-PCR扩增得到0.7 kb的cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy。测序表明,该基因为777 bp,编码258个氨基酸,与Gen-Bank中甜瓜1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase,ACS)基因比对,核苷酸同源性为99%,氨基酸同源性为98%。克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pCAM2301的E8启动子和NOS终止子之间,构建成E8调控下ACS基因反义表达载体。通过冻融法将携带反义cDNA的植物表达载体质粒转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统。 相似文献
63.
鸡IgG几种不同纯化方法的比较研究 总被引:3,自引:0,他引:3
试用三种不同的方法纯化鸡免疫球蛋白G(IgG),其中硫酸葡聚糖钠法虽好,但因其价格昂贵,不易推广;氯仿法是一种简便、快速而又经济的好方法,它的产率高,且不影响IgG的活性。 相似文献
64.
沙门氏菌简便的核酸检测技术 总被引:1,自引:0,他引:1
利用聚合酶链反应技术,特异性扩增沙工菌H1基因的269bp片段。8株标准一菌和3株阳性菌检测结果完全相符,并对30株分离的疑似沙门氏菌进行了检测。采用50μl体系,引物为自行设计各206割寡聚苷酸,各1μM;dNTPs各100μM,Taq本科U。二温段水浴扩增35循环,条件为预变性97℃7min,变性94℃60s,复性和延伸60℃60s,终延伸72℃7min。 相似文献
65.
电池废液主要来源于废旧电池的内容物,有关报道曾指出电池废液对染色体有一定影响,文章对此做进一步的研究和讨论。利用遗传毒理学原理,采用“小鼠骨髓细胞染色体畸变分析”方法,探讨电池废液对小鼠骨髓细胞染色体畸变率的影响。实验结果表明,0.4,0.6实验组的小鼠与阴性对照组的小鼠细胞染色体畸变率存在极显著差异(P<0.01)。从而证明了电池废液对染色体有畸变作用,并且发现雌雄小鼠对电池废液的反应程度不同,两者间的差异显著(P<0.05),由此证明雌雄个体在对药物的耐受上存在差异。 相似文献
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李景鹏 《东北农业大学学报》1985,(2)
从成年鸡血清中用硫酸铵三次沉淀粗提r球蛋白。然后,用G200凝胶柱过滤,洗脱液含O.14M NaCl,0.01M PB,流速6—8滴/分。取第二峰,用DE52纤维素柱层析,洗脱液是0.1M PH7.0 PBS。洗脱蛋白用免疫电泳等技术鉴定为纯化IgG。以此抗原1毫克加福氏完全佐剂首次免疫家兔后,再用同种抗原2—3次加强免疫,总蛋白用量3—5毫克。兔抗鸡IgG抗血清效价在1:16—1:32以上。以单向免疫扩散试验,测出不同周龄鸡血清中IgG的含量: 2周龄:2.9117±0.0779(n=20); 4周龄:3.8748±O.0591 (n=20); 10—13周龄:8.2243±O.4000 (n=59); 18—21周龄:13.3107±0.7434(n=44); 相似文献
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本文对人工感染传染性法氏囊病病毒(IBDV)雏鸡接种新城疫(ND)疫苗后的红细胞凝集抑制(Hi)抗体滴度和免疫保护力进行了检测。结果表明,人工感染IBDV雏鸡一次接种ND疫苗后的Hi抗体滴度和免疫保护力,明显低于未感染IBDV的对照雏鸡;人工感染IBDV雏鸡二次接种ND疫苗后的Hi抗体滴度和免疫保护力,比一次接种ND疫苗时明显升高。 相似文献
69.
IPTG诱导浓度、时间及温度对重组促性腺激素释放激素基因表达的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
以人工合成的促性腺激素释放激素(gonadotropinreleasinghormone,GnRH)/转运肽(TRS)基因与表达载体pGEX-6p-1相连的重组子(pGE-G)作为研究对象,转化大肠杆菌BL21(ED3)plyS。利用IPTG作为诱导剂,分析比较不同IPTG诱导条件对于表达产物的影响,以确定最佳IPTG诱导条件。结果表明:融合蛋白大部分以包涵体的形式存在,诱导温度为30℃;IPTG浓度为0.2mmol/L时,可溶性融合蛋白GST-GnRH/TRS表达量最大。光密度扫描对表达产物进行初步定量,表明表达产物约占菌体总蛋白的33.3%。 相似文献
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