虹鳟IL-17多克隆抗体的制备及初步鉴定

为了解鲤白细胞介素17B基因 (IL-17B) 的功能,实验使用同源搜索和基因克隆技术在鲤基因组中挖掘到2个IL-17Bs基因（CcIL-17B1和CcIL-17B2）,均有3个外显子和2个内含子,编码198个氨基酸,内含IL-17家族特有的由4个半胱氨酸形成的2个二硫键,蛋白序列一致性高达91.92%。共线性分析显示,在硬骨鱼类染色体加倍过程中,IL-17B及其附近基因出现了丢失,大部分硬骨鱼类有1个IL-17B、斑马鱼2个IL-17Bs均丢失,而鲤特有的染色体加倍致使存在2个CcIL-17Bs。实时荧光定量PCR (qPCR)结果显示,CcIL-17Bs在鲤受精卵发育早期（0~12 h）和成鱼性腺中高表达。使用大肠杆菌表达系统,获得了可溶的重组蛋白NusA-17B。肛灌不同浓度的NusA-17B,结果显示,高浓度（500 μg/kg）组的1和3 d的鲤肠道组织肠绒毛缺损,出现大量的杯状细胞和炎性细胞,定量分析显示,炎症因子基因IL-1β、IFN-γ、IL-6、趋化因子CCL20和NF-κB的表达均显著上调;7 d时肠道组织结构和炎症相关基因的表达均得到恢复,与对照组无显著差异。低浓度（5 µg/kg）和中浓度（50 μg/kg）肛灌实验,除了中浓度1和3 d鲤肠道TRAF6的表达显著上调,其余被检测基因的表达均与对照组无显著差异。使用不同浓度（0.1、1.0、10.0和100.0 ng/mL）NusA-17B孵育鲤肾组织8 h,结果显示,IL-1β在0.1、1.0和100.0 ng/mL的NusA-17B刺激下显著上调,IFN-γ和NF-κB分别只在10.0和0.1 ng/mL的NusA-17B刺激下显著上调,IL-6及趋化因子CCL20能够在10.0和100.0 ng/mL的NusA-17B刺激下显著表达,TRAF6则在0.1、1.0和10.0 ng/mL的NusA-17B刺激下显著表达。体内和体外实验结果表明CcIL-17B参与了炎症反应。     

鲤鱼2种脂蛋白脂肪酶基因的cDNA克隆、表达及其酶活性

为研究鲤脂蛋白脂肪酶 (CcLPLs)的基因特征、时空表达分布及酶活性,实验利用基因组同源搜索获取鲤CcLPLs同源基因并分析其序列特征;通过荧光定量PCR(qPCR)方法对CcLPLs在不同组织的表达进行分析;采用原核表达系统获取CcLPLs重组蛋白,并使用对硝基苯酚法测定各重组蛋白的酶活性。结果显示,鲤基因组中挖掘到5个CcLPLs基因(CcLPLA1a、CcLPLA1b、CcLPLA2a、CcLPLA2b^*和CcLPLBa),经验证,CcLPLA2b^*是假基因,共线性分析显示,鱼类特有基因组加倍过程中出现基因丢失的现象,而鲤特有的基因组加倍致使鲤存在5个CcLPLs。CcLPLA1a和CcLPLA1b核苷酸序列和氨基酸序列相同,同源性分析显示,CcLPLBa与CcLPLA1s的同源性为64%,与CcLPLA2a同源性为50.8%。qPCR结果显示,CcLPLs的表达量在肝脏、心脏、脂肪、肌肉、脑、肠道和脾脏中依次降低,在各个组织中,各基因表达量从高到底依次为CcLPLA1s、CcLPLA2a和CcLPLBa。鲤正常投喂、饥饿及再投喂状态下CcLPLA1s和CcLPLA2a在肝脏、肌肉和脂肪组织中的表达结果显示,饥饿状态下,CcLPLA1s和CcLPLA2a在肝脏中的表达量高于正常投喂组,而在肌肉和脂肪中低于正常投喂组;再投喂后,CcLPLA1s和CcLPLA2a在肝脏中表达水平降至正常投喂组,而在肌肉和脂肪中表现为先升高后降低的趋势。通过构建具有促溶效果的原核表达载体,分别获得了原核表达重组蛋白Skp-CcLPLs和SlyD-CcLPLs,酶活性测定结果显示,重组蛋白其脂蛋白脂肪酶活性从高到低依次为CcLPLA1a、CcLPLBa和CcLPLA2a,最适pH均为8.0,发挥最大活性的NaCl浓度为0.6 mol/L。本研究探讨了鲤CcLPLs同源基因在进化中的表现,对CcLPLA1s、CcLPLA2a和CcLPLBa的时空表达进行了分析,测定了投喂和饥饿对CcLPLA1s、CcLPLA2a表达的影响,揭示鲤饥饿胁迫下脂质代谢及响应对策,为控制鲤脂肪含量提供靶点,成功进行重组蛋白的原核表达并测定了其酶活性,为鱼类脂蛋白脂肪酶研究提供参考。

     

规模化猪场猪瘟免疫超前免疫与非超前免疫效果的试验观察

猪瘟是威胁我国养猪业健康发展的重要疾病因素之一,国内对猪瘟的控制主要依靠疫苗的免疫接种,业内对猪瘟的免疫程序研究报道很多,但也存在分歧.     

谈谈种子加工、贮藏技术人员的素质建设

种子加工贮藏的目的是应用科学、标准的方法，先进的种子加工机械，良好的贮藏设施对种子进行细致精选、包衣、包装、保管，以满足耕种要求。它需要专业的种子加工、贮藏技术人员来具体执行。因此，种子加工贮藏人员素质的高低与耕种所需良种的质量有直接的关系。     

速生桉的需肥规律与营养丰缺症状及科学施肥技术

桉树已成为广西三大造林树种之一，具有适应性强、速生丰产、用途广泛的特点，近年来得到快速发展。但部分经营者对桉树的技术不够了解，致使林分质量较差，达不到速生丰产的目的。本文根据速生桉树的需肥规律，对桉树各营养元素的需求和丰缺症状作简要介绍，并提出科学选肥与施肥的建议，供从事桉树经营者参考。     

利用毒环毒绳防治杜仲夜蛾（摘要）

杜仲夜蛾（Ｎｏｃｔｕｉｇａｎｕｓｕｌｍｏｉｄｅｓｓｐ．）严重危害杜仲叶子，喷药防治，易污染叶子，污染环境，杀伤天敌，且难度大，成本高，防治效果不够理想。根据杜仲夜蛾三龄以后的幼虫，黎明前下树潜伏在杂草或松土内，傍晚上树取食，老熟幼虫下树入土化蛹的习性，在树干上涂刷毒环或绑毒绳，阻杀上、下树幼虫。试验农药为：２０％速灭菊酯乳油、２５％氯氰菊酯乳油，２．５％溴氰菊酯乳油，５％氰苯醚菊酯乳油，２５％菊乐合酯乳油，５％来福宁，２０％灭扫利，５０％辛硫磷乳油等。稀释剂为机油或废机油；浓度按１：１０与农药：机油混合。毒绳为纸绳、草绳、麻绳、线绳、旧布条均可。将成捆的绳材浸入配制好的药液中浸泡３０ｍｉｎ，取出控干，装入塑料袋中备用，随制随用。在幼虫进入三龄阶段，选择晴天，在树干上绑扎１～２道毒绳或用毛笔、漆刷涂刷１～２４毒环。试验结果调查，防治效果均达到９８％以上，这种方法成本低，为喷药防治成本的３０％，不污染杜仲叶片，不会杀伤天敌、省工、省力，安全可靠，更适用于远山、高山和水源缺乏及林木高大，缺少喷药机械的地方。     

杜仲夜蛾的生物学特性初探

本文描述了杜仲夜蛾的形态特征，研究了其生活史和生态习性，并就该虫的防治提出了一些建议。     

奥利亚罗非鱼SOX9基因cDNA全长的克隆及分析

SOX9基因是重要的转录调控因子,与性别分化形成密切相关.以奥利亚罗非鱼(Oreochromis aurea)为研究材料,使用RT-PCR和RACE法分离和克隆了奥利亚罗非鱼卵巢中SOX9基因cDNA的全长序列.序列全长1 582 bp,其中5'端非翻译区长71 bp,3'端非翻译区长75 bp,开放性阅读框长1 437 bp,编码478个氨基酸.其中第98位开始共81个氨基酸为HMG保守盒.将奥利亚罗非鱼SOX9基因与虹鳟等八种动物的氨基酸序列相比较发现,它们同源性达75%左右,表明SOX9基因在进化中较保守.     

幼龄枣树整形修剪

幼龄枣树整形修剪应以增枝扩冠为目的,采取拉、刻、截等措施,坚持“四留”、“五疏除”的修剪原则。“四留”即:留骨干枝上向外扩展的延长枝及外围枣头枝,以扩大树冠和结果部位;留着生在骨干枝上生长充实且有发展前途的枣头作为更新枝;留着生在多年生骨干枝上侧生的枣头枝为背侧枝、边侧枝;留着生有大量的二次枝和枣股的枣头。“五疏除”是:疏除下垂枝、衰弱枝;疏     

罗非鱼胰蛋白酶Ⅱ cDNA克隆与序列分析

应用3‘-RACE方法对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)和奥利亚罗非鱼(Oreochromis aureus)胰蛋白酶Ⅱ cDNA进行了克隆并进行序列测定和分析.结果表明,胰蛋白酶Ⅱ序列中均具有催化活性必需的高度保守的催化三联体氨基酸残基(His、Asp、Ser)和构成二硫键的10个半胱氨酸残基,以及决定底物特异性的保守性氨基酸残基--天冬氨酸残基和S1结合袋.奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼胰蛋白酶Ⅱ mRNA序列以及氨基酸序列同源性分别为96.4%和97.5%.