实时荧光定量PCR技术及其在水产上的应用

摘要：实时荧光定量PCR技术是在PCR技术基础上结合荧光染料发展起来的一种核酸定量技术,能快速、灵敏,并有效地对核酸进行定量检测,已被广泛应用于生命科学的各领域。本文就实时荧光定量PCR的检测原理、荧光染料,管家基因以及其在水产上的应用作一阐述。     

建鲤IGFBP1基因的克隆及与增重相关的SNP位点分析

旨为查找建鲤(Cyprinus carpio var.jian)胰岛素样生长因子结合蛋白1(Insulin-like growth factor binding pro-teins 1,IGFBP1)基因上与增重相关的SNP位点。利用基因克隆,Clustal W比较8个个体的DNA序列,筛选SNP位点。并采用PCR-RFLP方法检测了其中2个位点(1b-E1-A210G,1b-E3-C108T)在913尾建鲤(♂469,♀444)中的基因型分布。成功分离得到了建鲤IGFBP1的2条DNA序列,并在1a、1b上分别找到7个和24个SNPs位点,其中,1a外显子上有2个,1b外显子上有4个。检测的2个位点与增重的相关性分析表明:2位点均与雄鱼增重呈极显著相关(P<0.01),其中,增重快的基因型在鱼种阶段分别为GG型和CC型,在成鱼阶段分别为AG型和CC型。与雌鱼鱼种阶段增重相关的位点为A210G,其AG型增重极显著快于AA型(P<0.01),与雌鱼成鱼阶段增重相关的位点为C108T,其CC型、CT型增重极显著快于TT型(P<0.01)。对组合成的9种双倍型与增重的相关性分析表明:雌雄鱼中双倍型D4、D5、D7个体生长显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)快于双倍型D6、D9个体,D4、D5、D7双倍型个体在整个样品中占60%,还存在改良空间。试验检测的2个位点A210G、C108T可作为建鲤增重相关的分子标记应用于育种实践。     

黄颡鱼Sox9基因的分离及分析

Sox9基因是号陛别分化形成有关的重要基因之一。以黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）为研究材料，使用RT-PCR在脑、精巢和卵巢分离和克隆到了黄颡鱼Sox9基因，序列比对分析表明，脑和精巢Sox9基因序列一致，称Sox9al（GenBank accession No．AY684328），卵巢的则与其有差异称Sox9a2（GenBank accession No．AY684329）。Sox9al与Sox9a2的核苷酸相似性为77％，氨基酸的相似性为84％，可以认定是由两个基因表达的。和其它动物Sox9氨基酸序列的同源性分析表明：黄颡鱼Soxga1与其它动物Sox9的相似性在8l％，89％之间，平均在86％左右；黄颡鱼Sox9a2的相似性在76％～86％，平均在83％左右。系统树分析揭示了Sox9为单起源，遗传距离远近也与传统分类结果一致。使用RT-PCR对Sox9a1与Sox9a2在雌雄黄颡鱼前脑和性腺组织的表达检测结果显示，Sox9a1在雌雄鱼的前脑和性腺均有表达，但Sox9a2只在卵巢表达，说明该基因可能与雌性性别形成及卵巢发育具有调控作用。     

西瓜设施栽培土壤连作障碍及配套防治技术

发病类型调查苗床数(个)发病苗床数(个)苗床发病率(%)调查株数发病株数株发病率(%)猝倒病立枯病炭疽病枯萎病606060605035173483.358.328.36.78714871487148714621752487467.18.65.60.5西瓜是上海市金山区主要经济作物,总产值占到经济作物总产值的34.5%。但西瓜连作引起的土传病害、土壤次生盐渍化等障碍问题,已严重制约了西瓜产业的健康发展。笔者从2001年开始,对本区设施栽培条件下西瓜连作障碍危害程度进行了调查,同时为解决该生产问题查阅了大量的资料,并针对本区生产情况进行了10个之多的试验研究,同时在土壤盐渍化和土传病害皆重的西…     

对当前中小型农田水利工程管理工作的几点建议

广大农村联产承包责任制日趋稳定完善,怎样管好用好水利工程,为农业生产服务,是当前值得研究的新课题。建国30多年,广西梧州各级人民政府注重水利建设,取得很大成绩,到1984年底,全地区建成大、中、小水库429座,总库容15.60亿米~3,引水工程12269座,安装水轮泵1783台,机电排灌设各1977台,4439匹马力,共灌溉面积176万亩,占总水田面积的99.9％,为夺取农业丰收创造了有利条件。梧州地区在全面推行联产承包责任制后,农田受旱的情况不断出现,给水利工程     

崇信县水保世行二期贷款项目成效与做法

水土保持世行二期贷款项目的实施,改善了崇信县的生态环境和农业生产条件,带动了农村产业的大发展。项目区农民人均纯收入由1998年的686元增加到2005年的1 991元,比全县人均纯收入高出111元;项目共完成水土流失综合治理面积13 530.7 hm2,新增蓄水能力399.6万m3,年减少入黄泥沙70.11万t;植被及生物群落状况明显好转;土地利用结构趋于合理,草畜产业迅猛发展;农业生产和群众生活条件极大改善。介绍了具体的工作经验。     

复方高氯消毒剂——消毒王Ⅱ的试验报告

消毒王Ⅱ新蚕药由于先进的复配技术，而具有优良的综合性能，能有效抑制家蚕病毒病、细菌病、真菌病等主要传染性病原；使用方便，杀菌力强，腐蚀性小，稳定性强。     

用RAPD及mtDNA D-loop区序列揭示长江下游长春鳊遗传多样性

应用RAPD和mtDNA D-loop区序列对长江下游长春鳊群体的遗传多样性进行分析.从40个随机引物中筛选出扩增条带清晰的28个引物,对24尾采自长江下游常熟江段长春鳊的基因组DNA进行扩增,共检测到178个位点,扩增片段大小在0.2～2 kb之间,其中多态位点有83个,占46.63%;个体间最大的遗传距离为0.132 6,最小的遗传距离为0.047 6,平均遗传距离为0.088 5;群体的Shannon多样性指值为0.098 6.RAPD结果表明该长春鳊群体的遗传多样性处于中等水平.对其中8尾长春鳊mtDNA D-loop区序列(938 bp)进行了分析,发现了8种单倍型,检测出17个多态性核苷酸变异位点,多态位点比例为1.81%,变异位点为15个转换,2个颠换;单倍型多态性(h)为1.000,核苷酸多态性(pi)为0.006 2,平均核苷酸差异数(K)为5.821,单倍型间平均遗传距离为0.006 3.结果说明长春鳊mtDNA D-loop区在个体间的遗传差异较小.     

阴茎背深静脉结扎治疗静脉漏性阳萎25例

阴茎海绵体静脉引流异常导致静脉漏性阳萎，用结扎阴茎背深静脉治疗阳萎有一定效果。国内报告成功率为75％。我院从1989年4月～2005年12月用此法治疗静脉漏性阳萎25例，现报道如下。     

靖西大果山楂生产及加工现状的调查研究

通过对靖西大果山楂原产地靖西县及其周边地区的调查 ,基本了解其生产和加工现状。集约经营水平低 ,单产不高 ,隔年结果明显 ,爆皮病危害严重的现象相当普遍 ;产品开发缺乏科技含量和创新 ,品牌培植意识不强 ,市场观念淡薄。针对当前的状况 ,提出了相应对策 ,广泛推广山楂复壮技术 ,加强良种选育工作 ,同时重视地方品牌培植 ,拓宽销售渠道。