北京平谷区苹果锈果类病毒检测初报

采集北京市平谷区‘中秋王’、‘寒富’苹果叶片样品共12份,以Northern杂交、RT-PCR方法检测苹果锈果类病毒(Apple scar skin viroid,ASSVd)带毒情况。结果表明,表现明显锈果症状的‘中秋王’样品均检出ASSVd,无明显症状的‘中秋王’样品没有检出ASSVd,而无明显症状的‘寒富’样品全部携带ASSVd。测序发现,所得序列与NCBI中已报道的ASSVd基因组序列相似性为91%~99%,且两品种中ASSVd主流序列完全相同。结果说明‘中秋王’对ASSVd较为敏感,感病后易于表现出明显的锈果症状;‘寒富’对ASSVd耐性较强,感病后不表现出明显症状。     

苹果锈果类病毒的几种提取方法及RT-PCR检测灵敏度的比较

以感染苹果锈果类病毒的苹果枝条为材料,利用不同的方法抽提,进行RT-PCR检测。比较了6种RNA的提取方法,结果发现:LiCl法、RNeasy plant mini kit和NA-PEX法检测效果较佳。RNeasy plant mini kit可检测到10-2,NA-PEX可检测到10-1;RNeasy plant mini kit检测效果好于NA-PEX,但价格比较贵,需要研磨;NA-PEX法组织无需液氮研磨,试剂便宜,耗时短,适合检测大批量的样品。     

啤酒花矮化类病毒属属级寡核苷酸芯片筛查方法的建立

啤酒花矮化类病毒属是重要的植物类病毒属,目前尚无有效的筛查方法。通过对该属类病毒的核苷酸序列进行分析筛选,设计了8条用于该属类病毒筛查的属级特异性探针并制备了寡核苷酸芯片。应用啤酒花矮化类病毒标准样品对该芯片进行验证,结果表明所建立的属级芯片可以特异性检测啤酒花矮化类病毒,可检测到2ng/μL的总RNA。该芯片可用于啤酒花矮化类病毒属类病毒的筛查,为该属类病毒的检疫与防控提供技术支撑。     

北京、天津地区锦紫苏类病毒疫情调查与检测

从购自北京和天津市的花卉市场的27株锦紫苏的叶片中抽提低分子量的RNA,进行Return-PAGE和Dot-blothybridization检测,与从北京丰台区新发地种业市场芳萱苑花卉种子公司和北京大森林花卉种子市场购买的锦紫苏种子所生长的实生苗对比,结果发现,从北京和天津花卉生产基地购买的27株锦紫苏成品苗中带毒苗高达25株,而利用种子所得的实生苗无一株带毒。     

我国河南和甘肃地区梨树根癌病病原菌鉴定

近年来, 我国梨树根癌病多有发生, 危害严重, 但病原尚不明确?本研究采集了河南商丘和甘肃庆阳梨树根瘤, 共分离得到13个分离物, 对其进行形态特征观察?序列分析和特异性PCR检测?生理生化测定和致病性测定?结果表明, 这13个分离物在NA平板上的菌落呈白色?圆形, 单菌落中间凸起?边缘整齐?它们均能在New Kerr培养基上良好生长?其16S rRNA基因序列与GenBank中已登录的Agrobacterium tumefaciens和A.rhizogenes序列相似性大于98%?将分离物人工接种向日葵后能使接种部位产生癌瘤?鉴定结果表明, 梨树根瘤中分离出的13个分离物均为生物Ⅱ型土壤杆菌?     

马铃薯Y病毒科分子进化研究进展

马铃薯Y病毒科Potyviridae包括许多重要的植物病毒。本文综述了近年来该科马铃薯Y病毒属Potyvirus、甘薯病毒属Ipomovirus和禾草病毒属Poacevirus内20余种病毒的分子进化研究现状,从突变、重组、漂移、选择和迁移5个方面探讨了影响该科一些病毒分子进化的因素,并展望了未来的研究方向,以期为该科病毒的有效防控提供理论依据。     

梨疱状溃疡类病毒研究进展

梨疱状溃疡类病毒(Pear blister canker viroid,PBCVd)危害仁果、核果类果树,是我国进境植物检疫性有害生物。伴随近年来梨树种植业逐渐趋于产业化和规模化的发展,PBCVd成为梨树种植业健康发展的重要威胁。由于产业发展的需要,梨树繁殖材料的引入也日益频繁,进一步增加了PBCVd传播和扩散的风险。提高对PBCVd的认识,有助于有效防控PBCVd引起的灾害。本文详细介绍了PBCVd的发现及鉴定、生物学及分子生物学特征,对PBCVd的检测方法进行综述,针对今后PBCVd的防控提出建议,展望了今后的相关研究。     

杏和李树啤酒花矮化类病毒的检测与序列分析

 从无明显症状表现的24个杏样品, 37个李样品的1年生枝条表皮中抽提低分子RNA进行DIG-cDNA斑点杂交、RT-PCR、正反向聚丙烯酰胺凝胶电泳(Return-PAGE) 和生物学检测。结果表明: 杏有3个样品, 李有6个样品带有啤酒花矮化类病毒(Hop stunt viroid, HSVd) 。从这9个样品中选a5、a17、p6、p16 进行克隆和测序分析。所得序列与GenBank中已报道的HSVd序列同源性达99.0% ～99.7% , 且序列变异与地域、寄主等无明显相关性, 说明HSVd的序列是比较保守的。     

苹果茎痘病毒在山楂中的首次鉴定与序列分析

山楂是我国重要的果树,但山楂病毒的相关研究较少.本研究通过高通量测序及生物信息学分析首次在山楂样品中发现苹果茎痘病毒(apple stem pitting virus,ASPV).利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术对ASPV山楂分离物全长序列进行扩增,结果表明,ASPV山楂分离物基因组全长由9 290个核苷酸组...