家蚕微孢子虫海藻糖合成酶基因Nbtps1的克隆与原核表达

海藻糖在保护细胞质膜和生物大分子空间结构,维持胞内渗透压增大的过程中发挥重要作用,海藻糖合成酶是海藻糖合成途径中的一个关键酶。通过检索微孢子虫基因组数据库发现,家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)基因组中含有4个海藻糖合成酶基因,其中Nbtps1基因的开放阅读框长1 386 bp,为单外显子结构,编码461个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量53.7 k D,等电点5.19。Nb TPS1蛋白序列含有1个糖基转移酶结构域和4个潜在的N-糖基化位点,亚细胞定位预测该蛋白质位于细胞质中。多重序列比对分析结果表明,Nb TPS1与东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)、兔脑炎微孢子虫(Encephalitozoon cuniculi)海藻糖合成酶的氨基酸序列相似度分别为59.0%、54.7%,系统发育进化树显示三者的亲缘关系与之相符。构建重组表达载体Nbtps1/p ET-28a(+)并转化大肠埃希菌Rosetta(DE3)菌株,经IPTG诱导表达及亲和纯化后获得最终质量浓度为1.18 mg/m L的重组融合蛋白His-Nb TPS1。用纯化后的融合蛋白制备兔多克隆抗体Anti-Nb TPS1,利用间接ELISA法测定多克隆抗体的效价达1∶25 600,并通过Western blotting检测验证了该多克隆抗体的特异性,为研究Nb TPS1的生物学功能以及家蚕微孢子虫的间接免疫检测奠定了实验基础。     

急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征大鼠肾素-血管紧张素系统的变化及其干预的实验研究

目的:观察油酸诱导的急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)中肾素-血管紧张素系统(RAS)的变化,探索ALI/ARDS治疗新途径。方法:①建立ALI/ARDS动物模型,并利用症状、动脉血气分析、肺湿/干重比(W/D)和肺组织病理等指标评估;采用紫外分光光度法和放射免疫法分别测定RAS关键酶:血管紧张素转换酶(ACE)、ACE2和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),并研究其变化规律。②分别给模型鼠腹腔注射卡托普利、重组大鼠ACE2(rmACE2)和氯沙坦,观察干预效果。结果:①模型评判及RAS变化:模型复制成功,油酸组大鼠肺水含量较正常组明显增多(W/D:6.71±0.64 vs 4.02±0.10,P0.01),氧合指数明显下降(PaO_2/FiO_2:267±19 vs 450±15,P0.01),且病理显示明显的肺损伤改变;油酸组血浆中ACE2表达下降,而ACE表达明显升高,氯沙坦组ACE表达降低,对应ACE2表达升高;油酸组大鼠血浆AngⅡ水平明显增高,而氯沙坦组水平降低(76.50±29.21 vs 118.92±45.48,P0.05,单位:Pg/ml)。②RAS药物对ALI/ARDS的影响:与油酸组比较,卡托普利组W/D明显降低(5.35±0.25 vs 6.06±0.22,P0.05),而rmACE2组也出现下降趋势(6.33±0.32 vs 6.71±0.64,单位:U),但无明显统计学差异(P=0.542)。氯沙坦组降低最显著(5.35±0.25,P0.01,单位:U);氯沙坦可提高ALI/ARDS大鼠7d生存率。结论:①RAS存在激活,表现为关键酶发生显著变化:ACE、AngⅡ的升高和ACE2的降低。②干预RAS能部分改善ALI/ARDS肺损伤。其中以氨沙坦作用最为显著,且能最终提高7d生存率。③RAS可能开辟ALI/ARDS药物治疗的新时代,有望降低ALI/ARDS病死率。     

赣北地区油茶主要病虫害及其防治措施

近年来,随着国家对油茶产业发展的高度重视,江西赣北地区发展油茶产业的积极性空前高涨,部分林农、大户和民营企业纷纷参与到油茶造林和开发的热潮中,油茶种植面积连年递增。但随之而来的油茶病虫害问题成了制约油茶发展的瓶颈。本文对赣北地区地理、气候条件和油茶主要病虫害及防治方法进行初步探析,旨在提高该地区油茶病虫害防治水平,对该地区发展油茶有一定的指导意义。     

酸性土壤固磷机理研究进展

随着酸性土壤固磷机理研究的不断深入,已经有一些研究开始重视土壤中Mn对P的固定作用.本文以Mn-P的提出为出发点,论述了近10年来对酸性土壤固磷机理研究的新进展,突破了常规P素形态分级研究中分为Fe-P,Al-P,O-P和Ca-P等无机磷测定的经典分级,认为玄武岩母质砖红壤中的Mn-P是P素固定的主要形式之一,进而比较了Fe、Al、Mn对P固定作用,并从P的化学有效性与生物有效性差异等方面进行了比较全面的论述,提出了减少P素固定提高磷肥利用率的措施及今后的重点研究方向.     

伐区调查设计中计算机绘图与求积的研究

本文在分析伐区调查设计中绘图、求积的数据结构和坐标变换的基础上,确定了伐区领域信息的检索模式,并提出一套使用计算机一绘图机绘制伐区平面图、交互式图形、求算伐区总面积、采伐小号面积及集材道长度的算法,可编制相应的应用软件,在IBM-PC/XT微机及SR 6602绘图机上实现。该方法不仅可用于林业局的伐区调查设计,使绘图与求积等工作计算机自动化,还可解决其它土地利用工作方面的类似问题。     

用大型车改装防治病虫害车

病虫害防治是抚育管理的重要组成部分,平原人工林病虫害防治工作离不开车,而车型直接影响防治效果、速度及成本。乌鲁木齐县安宁渠区林管站,经过六年的探索摸索出以改装解放、东风等大型车辆为林木病虫害防治车,改装车防治效果好,车的利用率高。现国产定型北京130型森防车,受车型限制,防治速度慢、效果差、车辆利用率低。现就改装车优点及改装应用介绍如下:     

陈至立:大幅度提高妇女进入村委会的比例

最近,民政部和全国妇联在河北省石家庄市联合举行全国推动农村妇女参与村民自治实践经验交流会.全国人大常委会副委员长、全国妇联主席陈至立出席会议并强调,要大幅度提高农村妇女进入村委会的比例,充分发挥广大妇女在农村基层民主建设中的重要作用,为推进社会主义新农村建设作贡献.……     

工作要求-资源视角下基层公务员工作倦怠研究:自我效能感的中介、调节作用

基层公务员的身心健康始终是人力资源管理部门研究的重点议题,而一直以来工作倦怠却普遍存在于基层公务员群体。为了缓解该群体的工作倦怠,推动基层公务员队伍的可持续和健康发展,基于工作要求-资源模型,构建了基层公务员工作倦怠理论模型。通过对504个基层公务员样本的回归分析,研究发现,工作要求上,角色压力正向影响基层公务员工作倦怠;工作资源上,工作社会支持和职业发展机会负向影响基层公务员工作倦怠;自我效能感在角色压力与基层公务员工作倦怠之间具有调节作用,并加强了二者之间的关系;自我效能感分别在工作社会支持、职业发展机会与基层公务员工作倦怠之间起到了部分中介作用。     

小杆线虫Oscheius tipulae JL1的鉴定及生物学特性

利用大蜡螟Galleria mellonella L.诱集法,从采自吉林省的土样中分离到小杆类昆虫病原线虫1种。经形态学、ITS及28S rDNA序列分析鉴定,明确了该线虫为Oscheius tipulae JL1。室内生物测定结果表明:24 h时,线虫JL1浓度为120 IJs/larva及以上时,大蜡螟的死亡率达90%以上;48 h时,浓度40 IJs/larva时,大蜡螟死亡率达93%以上;60 h时,浓度高于20 IJs/larva时,大蜡螟死亡率100%。耐热性方面,在38℃下处理8 h,线虫死亡率快速增加,35℃处理16 h,线虫死亡率开始快速增加。线虫JL1在35和38℃条件下,分别至少可耐16和8h的高温,死亡率分别在3.2%和15.3%以下。结果表明该线虫具有较好的耐热力、侵染力和致死力,未来有望用于害虫防治。     

水稻纹枯病生防细菌筛选及其与病原菌侵染垫形成的关系

为筛选对立枯丝核菌Rhizoctonia solani具有拮抗作用的生防细菌,利用稀释涂布平板法,从吉林省水稻纹枯病样中分离筛选出对立枯丝核菌AG-1A具有高拮抗活性的生防菌株,通过gyrB基因序列分析鉴定其分类地位,并采用离体侵染试验和温室防治试验测定筛选生防菌株对水稻纹枯病的防效,在显微镜下观察生防菌株预处理后接种...