知母悬浮培养下的体细胞胚胎发生(简报)

体细胞胚大量产生及高质量体细胞胚诱导是人工种子研制的关键.目前国内外对体细胞胚在液体悬浮培养体系中的诱导与分化已进行了大量的研究,其中在芹菜、防风等植物的悬浮培养中已获得了体细胞胚.     

羊源芽孢益生菌的筛选与Y5-39菌株的鉴定及其耐受性试验

为了筛选对羔羊腹泻有治疗作用的益生菌.采用琼脂平板扩散法,以大肠杆菌( Eacterium coli)菌株为病源指示菌,从健康小尾寒羊的新鲜粪便中分离得到一株具有较强抑菌活性的拮抗细菌Y5-39菌株.对该菌株进行形态特征的观察和生理生化试验,结合16 S rDNA序列分析,并与相应种、属的菌株进行对比,表明Y5-39与芽孢杆菌Bacillus相应性状相近.用BLAST软件在Genbank数据库中对Y5-39菌株的序列进行比对,经分析Y5-39菌株与地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的相似性水平达到99.92%,且二者在所构建的系统发育树上处于同一个分支.最终鉴定Y5-39菌株为地衣芽孢杆菌.通过测定菌株Y5-39在人工胃液、不同pH值和不同浓度胆盐环境中的存活率,结果表明,此菌株对酸性环境、人工胃液和胆盐有很强的耐受力.     

不同施肥处理对农田土壤微生物区系和功能的影响

本研究采用DGGE和Biolog两种方法, 研究了五种不同施肥处理对土壤微生物区系组成和功能的影响。采用UPGMA对DGGE试验结果进行聚类分析得出,小麦季中不施肥对照（T1）和常规氮磷钾肥（T2）聚为一类,相似性为41%,常规氮磷钾肥+秸秆还田（T4）和常规氮磷钾肥+秸秆还田+秸秆腐熟剂（T5）聚为一类,相似性为52%,而70%常规氮磷钾肥+有机肥（T3）单独聚为一类;玉米季也得到类似的结果,只是T1和T2的相似性为68%,T4和T5相似性达78%,而T3依然归为一类,这说明不同施肥处理间土壤微生物区系存在相似性。经过切胶测序及BLAST比对,发现大多为不可培养细菌,可培养细菌中多为芽孢杆菌属和类芽孢杆菌属。Biolog试验采用主成份分析得出,T1和T2土壤微生物功能类似,T4和T5土壤微生物也具有相似的功能,而T3则单独分为一类。其中,T5和T4的土壤细菌群落对底物碳源的代谢活性最强,T3处理次之,T2和T1最低。通过这两种不同试验方法的分析可以看出,不同施肥处理对土壤微生物区系和功能的影响存在关联性。     

外源lea3基因转化紫花苜蓿的研究

将来源于大麦的lea3基因通过基因枪法导入紫花苜蓿栽培品种“中苜一号”的胚性愈伤组织中,经过膦丝菌素类除草剂(PPT)的4次筛选获得抗性愈伤组织,诱导分化后共获得21株抗性再生植株。经叶片涂抹除草剂试验和lea3基因的PCR分子检测证明,lea3基因已整合到紫花苜蓿的基因组中。与对照植株相比,获得的转基因植株具有显著增强的耐盐能力,表明遗传转化lea3基因可用于苜蓿抗旱耐盐新品种的选育。     

棉花黄萎病拮抗细菌DS45-2菌株抗菌蛋白的分离纯化

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) DS45-2菌株产生的抗菌蛋白对棉花黄萎病有较强的抗性。用NB培养基摇床振荡培养DS45-2菌株(30℃,180r/min,48h),发酵液经硫酸铵盐析得到抗菌蛋白。经分析,抗菌蛋白对热稳定;对胃蛋白酶、胰蛋白酶均不敏感,对蛋白酶K部分敏感;在碱性条件下稳定,酸性条件下抑菌活性减弱。抗菌蛋白经DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和反相层析后,分离纯化出一个抗菌蛋白0组分,经SDS-PAGE检测分子.质量约为23 kDa。     

大黄中大黄素提取条件的优化

为确立大黄素的最佳提取工艺,本研究采用紫外分光光度法测定大黄素的纯度,并以大黄素的产量为指标,通过单因素试验从4种常规溶剂中确定出1种对大黄素提取效果最佳的溶剂,再采用正交试验对影响大黄素提取工艺的因素——提取溶剂的用量、所加入的酸水量、提取温度及时间4个水平进行了研究。结果表明:最佳提取条件为:大黄粉∶苯∶20%硫酸=1∶6∶1(m∶v∶v),提取3次,每次3 h,提取温度为65℃。     

W-15菌株产生的纤溶酶蛋白的提取与纯化

为从微生物中获取溶栓药物,从土壤、豆豉中获得产纤溶酶活性高的1株菌株,命名为W-15。经检测,发酵上清液中纤溶活性的蛋白酶分子质量约为36 kDa,酶的比活为1 571 UK/mg。     

中药制剂“病毒宁”抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的活性

本试验研究了中药制剂“病毒宁”在体外对单纯疱疹病毒(HSV-1)增殖的抑制作用。结果显示:“病毒宁”在1.500~0.188 g/L稀释浓度下,对HSV-1有直接杀灭作用(P<0.05);“病毒宁”在1.500~0.375 g/L稀释浓度时,能显著阻断HSV-1对BKH-21细胞的感染(P<0.05),并显著抑制病毒在细胞内的增殖(P<0.05);中药制剂“病毒宁”在体外具有明显的抗HSV-1作用,其最大无毒浓度为1.500 g/L。     

Bacillus subtilis Z-27制剂对仔猪肠道酶活及消化性能的影响

试验目的在于研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Z-27制剂对断奶仔猪肠道消化酶活力、常规营养成分、生长性能的影响,为该菌剂的益生机理的研究提供参考。将供试仔猪分为试验组和对照组,试验组饲喂添加0.1%Z-27菌剂的T2饲料,对照组饲喂T2饲料。采用GB/T 23527—2009、GB/T8275—2009等方法测定仔猪粪便中蛋白酶、α-淀粉酶等消化酶活力;利用GB/T 6435—2006、GB/T6432—94等方法测定粪便中水分、粗蛋白质等常规养分的含量;记录采食量并称取始重和末重。试验表明,与对照组相比,试验组仔猪的粪便中蛋白酶、α-淀粉酶、纤维素酶的平均活力和脂肪酶水解液酸价分别提高了62.99%、34.56%、133.10%和66.57%;粪便中残留的粗蛋白质、淀粉、粗脂肪和粗纤维等有机成分含量分别下降了30.51%、52.13%、18.44%和26.73%,而无机成分的含量基本无变化;平均日增重提高了9.38%,料重比降低了4.94%。研究表明,枯草芽孢杆菌Z-27制剂具有提高仔猪肠道消化酶活力、提高饲料转化率、改善仔猪生长性能的作用。     

芽孢杆菌发酵棉粕粉脱酚及其饲喂肉鸡的效果

对前期工作中筛选得到的枯草芽孢杆菌M-9菌株发酵棉粕粉进行脱酚处理,将其作为蛋白源添加于饲料中用于肉鸡养殖并对应用效果进行初探。棉粕粉脱酚采用固体发酵法,棉粕粉中棉酚含量测定采用国标法,粗蛋白含量测定采用凯氏定氮法。结果表明,经枯草芽孢杆菌M-9菌株发酵后棉粕粉的棉酚残存量为9.82 mg/kg;蛋白质未因发酵而流失,其含量较原始棉粕约增加1百分点。发酵棉粕粉质地松软,无霉变、无硬块、无异臭,符合我国国家安全标准。以之代替全价饲料中的豆粕对肉鸡进行饲喂,经相关指标测定发现,试验组肉鸡的血液生化指标正常,生长发育指标、屠宰性能指标、脏器发育指标及营养物质利用率与对照组均无显著差异,即试验组肉鸡未发现棉酚中毒症状,说明制备的发酵棉粕粉脱酚效果较好,具备代替豆粕作为饲料蛋白源应用于肉鸡养殖的可能。