紫花苜蓿MsNST的克隆及对木质素与纤维素合成的功能分析

【目的】木质素和纤维素是植物次生细胞壁的主要组成成分,是影响牧草消化率和品质的主要因素之一。紫花苜蓿作为高蛋白饲草,是奶牛等草食家畜优质饲草的主要来源。因此,苜蓿木质素和纤维素合成机制一直是受到关注的研究热点。模式植物拟南芥NAC家族的NST转录因子（NAC secondary wall thicking promoting factor）调控次生细胞壁的合成,但紫花苜蓿NST的功能与调控机制尚不明确。本研究通过分析紫花苜蓿NST的表达模式,及在拟南芥与苜蓿中过表达揭示其对木质素和纤维素合成的影响。【方法】通过同源克隆获得MsNST CDs序列,并对该基因进行生物信息学分析。利用qRT-PCR检测该基因受赤霉素（GA3）,水杨酸（SA）和多效唑（PCB）诱导后的表达模式。通过转基因植株中过表达MsNST,研究其对木质素和纤维素含量及其合成相关基因的影响。【结果】克隆MsNST 的CDs序列,最大开放阅读框为945bp,编码314个氨基酸。生物信息学分析表明,MsNST主要由无规则卷曲组成（60.83 %）;三级结构预测显示,MsNST以同源二聚体的形式有效的促进蛋白质间的相互作用。进化树分析表明,单子叶和双子叶分为两个分枝,暗示存在一定程度的进化,而MsNST与蒺藜苜蓿和大豆的NST属于双子叶植物分枝中的亚分枝,表明豆科植物间亲缘关系较近。MsNST与拟南芥NST1-3的氨基酸序列相似性较高（49%—55.9%）,并含有NAC转录因子的5个保守结构域。qRT-PCR分析表明,MsNST受GA3、SA和PCB的诱导表达,相对表达水平（12h）分别是对照的2.19、3.67和3.65倍。过表达MsNST导致拟南芥下胚轴缩短,转基因拟南芥半矮化,花序茎束间细胞壁纤维增厚,细胞壁结晶纤维素（13%）、总糖（7%）和木质素（11.7%）含量增加。通过分析木质素和纤维素合成相关基因表达水平发现,拟南芥和苜蓿中过表达MsNST均能激活木质素合成关键基因（PAL,4CL等）及纤维素合酶复合体亚基CesA家族基因的表达。【结论】MsNST受外源激素GA3、SA和PCB诱导表达。转基因植物中过表达MsNST可激活次生壁木质素和纤维素合成相关基因的表达,同时茎束间纤维细胞壁增厚,细胞壁结晶纤维素、总糖和木质素含量增加,暗示MsNST对次生细胞壁木质素和纤维素的合成有重要的调节作用。     

中美牧草种子生产比较

牧草种子在草原植被恢复和草牧业生产中发挥着重要作用。中美都是国土辽阔的大国，本文通过对比近十年内中美2国牧草种子生产的相关数据，分析中美草种业在牧草种子生产规模、专业化生产的地域性、新品种选育、产业化与机械化以及生产技术研究上的差异。结果表明：尽管我国在牧草种子专业化生产的地域性方面取得了长足进步，但是种植面积和单产仍然低于美国，每年仍需进口大量牧草种子来满足生态建设和草产业发展的迫切需求；与美国相比，我国牧草种子生产在育种、产业化、机械化和专业化等方面存在巨大的潜力，而且我国牧草种子产业亟需培育大型龙头企业。基于中美在牧草种子生产体系上的差异，本文比较分析了中美两国在牧草种子生产方面的差异和我国的发展潜力，并提出了当前我国牧草种子产业发展需要集中努力的方向和建议，希望能为推动我国草种业快速健康发展提供参考。     

盐碱胁迫条件下中苜3号紫花苜蓿高效共生根瘤菌筛选

以10株中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)菌株为研究材料,对"中苜3号"紫花苜蓿(Medicago sativa L.cv.‘Zhongmu No.3’)进行接种试验,分别在不同浓度NaCl(3‰和4‰)单盐溶液和NaHCO3∶Na2CO3=9∶1(pH=8和pH=9)混合碱溶液处理下筛选苗期增重明显的高效根瘤菌菌株。结果表明:在盐和碱处理下,不同根瘤菌菌株对中苜3号接种效果差异明显,增重效果均好于对照处理。3‰和4‰盐处理下,菌株17676接种效果最好,地上部干重、根干重和地上部含氮量分别比对照提高了165.88%和584.81%、142.96%和351.33%、114.46%和119.55%;pH=8碱处理下,菌株17581接种效果最好,而pH=9碱处理下,菌株17675接种效果最好,地上部干重、根干重和地上部含氮量分别比对照提高了118.88%和191.76%、168.23%和188.34%、124.00%和128.74%。此外,在盐和碱处理下菌株17544和菌株17537也都表现出一定的增重效果。     

吉林省靖宇县林业局林地保护利用规划的调查与编制

针对靖宇县林业局林地资源现状,分析了该林区林地保护利用存在的问题,按照《全国林地保护利用规划纲要(2010—2020年)》编制了靖宇县林业局林地保护利用规划的总体目标,提出了林地保护利用措施。     

紫花苜蓿MsHSP17.7基因的克隆及功能分析

热激蛋白是一类普遍参与抗逆的保护性蛋白,在植物生长发育及逆境调控中起重要作用。为了解紫花苜蓿(Medicago sativaL.)热激蛋白基因特性及功能,本研究通过同源克隆法获得热激蛋白基因MsHSP17.7,该基因包含477bp开放阅读框,编码158个氨基酸,蛋白分子量为17.67kDa。序列比对发现MsHSP17.7与截形苜蓿(Medicago truncatula)和豌豆(Pisum sativum)中的2个小分子热激蛋白同源性较高,相似度分别是93.38%,83.13%。组织差异性表达显示,MsHSP17.7在茎中表达最多,叶和花次之,在根中最少;实时定量PCR分析显示,MsHSP17.7受高温、高盐诱导表达,在过氧化诱导下表达量变化不明显。对T3代转基因拟南芥(Arabidopsis thaliana)实时定量PCR分析显示,该基因在高盐和过氧化胁迫下均能大量表达,结果表明MsHSP17.7基因可能参与了高盐与过氧化逆境下的胁迫应激调控。     

流式细胞术比较研究三种对虾血细胞的分群

应用流式细胞术对墨吉对虾(Penaeus merguiensis)、南美白对虾(Penaeus vannamei)、斑节对虾(Penaeus monodon)三种对虾的血细胞类型进行了比较研究。根据其血细胞的前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)特征的不同将血细胞分群,FSC和SSC二维图分析表明三种对虾的血细胞都可分为三个亚群:透明细胞、小颗粒细胞、大颗粒细胞。同时还对各种类型血细胞所占比例进行了比较研究,发现各个亚群血细胞所占组成比例在三种对虾之间具有相似性。其比例均为:小颗粒细胞最多,约为45%~49%;透明细胞次之,约为26%~28%;大颗粒细胞最少,约为10%~12%。     

免割保水膜立袋式栽培香菇生产技术

免割保水膜立式香菇生产技术，是最近两年我市食用菌研究机构结合全国各地多种香菇栽培模式的特点，扬长避短，并根据本地区的气候和环境优势，综合而成的一种全新的香菇生产方法，从目前看应为国内较为先进的一种生产模式，相信今后在各地科技人员和广大菇农的努力下技术一定会更加完善和成熟。我市于2011年中夏开始对此技术进行考察和引进，并根据北方地区的实际情况，从气候、品种、市场需求趋势、劳动力成本、老场区重茬问题和水资源问题等多方面与其他地区进行优劣势比较，进行了多种尝试和改进。2012年在承德市所辖食用菌生产县区栽培，又投资30余万元在不同环境条件下进行了试验和示范，达到了理想的的效果。此项技术的成功预示着北方地区香菇产业可持续发展，对香菇增产农民增收具有重要意义。     

塑料大棚和发酵床应用于养鸡时对其设置与维护的要求

发酵床首先应用于猪的饲养中，经技术创新运用于鸡的饲养中[1]。此技术不仅制作简单，还能创建出环境良好的鸡舍，为鸡的成长提供有利条件。在建立发酵床时，将稻壳、锯末等混合物按照一定的比例进行填入，同时将酵母菌等多种有益菌种添入其中，从而产生了发酵有机垫料。鸡具有啄食、刨食的习惯，使粪便能充分与垫料进行混合，同时迅速的进行转化、分解等工作，能在真正意义上实现清洁生产。而塑料大棚的使用，具有较好的移动性和投资小等特点。两者结合能将更多更好的优势充分的展现出来，深受广大养殖户的喜爱。     

选购旋耕机要注意哪些问题

旋耕机是与拖拉机配套完成耕、耙作业的耕耘机械。旋耕机因其碎土能力强、耕后地表平坦,一次作业可达到土碎地平的目的,水旱田兼用,而倍受青睐。目前,国内大中拖配套旋耕机保有量约15万台,手拖和小四轮配套旋耕机200万台。旋耕机在南方水稻生产机械中占80％比例,北方的水稻生产、蔬菜种植和旱地灭茬整地也广泛采用了旋耕机械。