牛肌源性干细胞的培养和鉴定

探讨牛肌源性干细胞(MDSCs)的体外分离、培养、鉴定方法,旨在为牛体细胞核移植研究提供优质的供核细胞。使用胶原酶消化牛骨骼肌,然后采用差速贴壁分离技术纯化获得MDSCs。在倒置显微镜下观察细胞形态,测定生长曲线,分析MDSCs的增殖能力,采用结蛋白(Desmin)、CD34和CD45免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定。结果显示,已成功地从牛骨骼肌中分离培养出具有干细胞特征的细胞,该细胞呈Desmin和CD34阳性、CD45阴性。因此,可通过体外原代培养获得高纯度肌源性干细胞。     

加强蔬菜用药安全监管

通过对承德市蔬菜用农药安全监管工作的几点经验和做法的总结，以推动蔬菜用药安全监管工作更好的开展，确保蔬菜用药安全和产品质量安全。     

梨小在梨大虫果内生活和为害情况观察

梨小食心虫是我市梨树的主要害虫,直接影响梨果的产量和品质,成为当前生产上急待解决的问题。1980～1981年对该虫进行了观察研究,初步掌握其发生规律及防治方法。但是,防治效果总是不太理想。偶而发现梨大虫果内飞出梨小成虫,在饲养的梨大虫果纱罩里,羽化出许多梨小成虫,这一现象引起我们的注意,联系在实践中,没有桃     

传染性胃肠炎病毒(TGEV)双启动子真核表达载体pVAXD-N/S的构建与鉴定

猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的高度接触性传染病.TGEV的S、N基因具有重要的免疫学功能,构建S、N双基因疫苗将能提供更好的免疫效果.本研究用RT-PCR扩增S基因抗原区(2.1 kb,含A、B、C和D完整的抗原位点)和N基因编码区(1.2 kb),分别定向插入双启动子真核表达载体pVAXD的多克隆位点(MCS),构建了单价质粒pVAXD-N和pVAXD-S,然后将N基因插入pVAXD-S中,构建了双启动子真核表达质粒pVAXD-N/S.将pVAXD-N/S与对照组(pVAXD-N、pVAXD-S和pVAXD)转染COS-7细胞进行表达鉴定,用RT-PCR可从pVAXD-N/S转染细胞中扩增出s、N两个目的基因,IFA鉴定结果显示,pvAXD-N/S可同时表达S、N两种目的蛋白.初步的小鼠(Mus musculus)免疫试验结果显示,pVAXD-N/S免疫小鼠后第14天即可检测到抗TGEV的IgG抗体,第35天抗体达最高峰,pVAXD-N/S诱导的抗体水平显著高于单基因质粒组pVAXD-N和pVAXD-S的抗体水平(P＞0.5),与混合质粒(pVAXD-N+pVAXD-S)诱导的抗体水平相当.本研究结果表明,构建的双启动子表达载体pV AXD-N/S具有S、N基因的双重免疫功能,为TGEV新型双基因疫苗研究提供了基础材料.