口蹄疫病毒株AF72 VP2的结构模拟与分析

为了分析FMDV AF72VP2蛋白结构和功能的关系.以口蹄疫病毒株AF72 RNA为模板,反转录并扩增目的基因,PCR纯化产物与pGEM-Teasy载体连接并转化JM109菌株,用凝胶电泳、PCR和SpeⅠ、SphⅠ双酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序.比对测序结果确定AF72 VP2的核苷酸序列,利用同源建模的方法建立AF72 VP2结构蛋白的3D结构,在此基础上,综合亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数预测AF72 VP2结构蛋白的B细胞抗原表位.分析表明,口蹄疫病毒VP1,VP2,VP3 和VP4在核苷酸水平上的变异率是无差异的(P>0.05);而他们在氨基酸水平上的变异率差异显著(P<0.05).该毒株与20株源于GenBank中的VP2氨基酸序列比对发现其保守区主要位于第1～23、37～51、66～76、85～101、124～142、165～199、205～219位.保守区氨基酸残基在维持VP2蛋白的空间构象和功能方面具有重要作用,其中1～10、129～140、165～176氨基酸区段是AF72 VP2结构蛋白可能的B细胞抗原表位区域,该结果将为进一步的FMDV多表位疫苗研究提供更有价值的参考信息.     

口蹄疫病毒A型AF/72株衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定

通过限制性酶切位点将P12A和3C基因插入到带有双启动子(Pp10和PPH)的杆状病毒表达载体p Fast BacTMDual,转化E.coli DH10感受态细胞进行蓝白斑筛选,将鉴定正确的重组杆状病毒质粒转染Sf9细胞后收获重组杆状病毒r Bac-Dual-P12A3C,通过间接免疫荧光(IFA)和蛋白质印迹(Western-blot)检测衣壳蛋白的表达。IFA结果表明表达产物能够被A型FMDV猪抗阳性血清所识别,鉴定正确并具有良好反应原性。Western-blot检测到81 k D(P12A)、57 k D(VP0+VP3)、47 k D(VP3+VP1)、33 k D(VP0)和24 k D(VP1/VP3)5条蛋白条带,与预期相符。该研究为进一步研究A型口蹄疫病毒空衣壳的体外组装提供了试验依据。     

口蹄疫转基因植物疫苗研究进展

口蹄疫是国际社会广泛关注的严重动物传染病之一,其控制措施主要是疫苗免疫。传统疫苗在该病的防控中起了重要的作用,但是其弊端也不容忽视,研制新型的口蹄疫疫苗是今后的发展方向。近几年来,随着生物技术的发展,可饲疫苗由于其具备的诸多优点而成为国内外研究的热点,口蹄疫转基因植物疫苗的研究在国内外也已经开始,并取得了一定的成果,期望易感动物食用此转基因植物后产生免疫力,达到预防口蹄疫的目的。文章综述了国内外口蹄疫转基因植物疫苗研究的成果。     

几种基因表达的真核载体系统与新型口蹄疫疫苗

1、口蹄疫及其防治现状:口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)感染引起的偶蹄动物共患的急性、热性、接触性传染病.其爆发流行时,由于动物生产力下降及贸易限制会带来极大的经济损失.FMD在世界上流行广且持久.在所有易感动物中使用灭活病毒作为免疫原构成了控制及消除本病的基础,然而,在流行地区用完整病毒粒子灭活苗控制FMD所引起的免疫保护具有血清型局限性,保护期短,因此需要多次重复免疫[1].……     

毛皮动物传染性病毒性肠炎的诊治

近年来,毛皮动物产业发展较快,毛皮动物的经济价值较高,一旦发生传染病,将会造成严重的经济损失。因此,笔者认为,毛皮动物饲养场(户),必须采取积极有效的综合性预防措施,杜绝传染病的发生和蔓延。1病因饲养管理不当,如吃腐败的饲料,饮水不洁,长期吃不上新鲜的肉类或粗纤维过多的谷物饲料,或外因传染。目前有很     

北极狐自咬症的防治措施

自咬症是北极狐常见的疫病，在我国各地养殖场（户）均有发生，严重影响北极狐的生长发育和毛皮质量。病狐啃咬自己的尾巴、大腿内侧或躯体某个部位的被毛和肢体，造成皮张破损或病兽死亡。笔者经过多年实践，采用预防为主的综合防治措施，在控制自咬症的发生方面取得了较好的效果。     

地方品种皖南黄肉种鸡ALV-J与REV的共感染 及其分子变异分析

 【目的】探讨地方品种皖南黄肉种鸡群中禽白血病病毒（ALV）与禽网状内皮增生病病毒（REV）的感染状态,同时对J亚型ALV（ALV-J）分离株的囊膜糖蛋白基因（env）和非编码区3′UTR序列进行分子变异分析,并对近十年的分离株非保守序列区段进行统计比较,探讨ALV-J分子变异趋势。【方法】取7只300日龄皖南黄肿瘤病鸡分别进行病理组织学观察、IFA检测肝脏组织切片后激光共聚焦观察、细胞培养后的IFA以及PCR方法检测。【结果】7只皖南黄肉种鸡有6只同时感染ALV-J与REV,而且ALV-J和REV已经共感染同一个肝细胞。取2个ALV-J分离株进行env基因与非编码区3′UTR扩增与序列分析,两分离株的env全长均为1 704 bp,3′UTR全长均为400 bp,3′UTR区段rTM和E元件同发生双缺失;3′UTR-E元件与近十年国内来自白羽肉鸡的ALV-J分离株比较,基因缺失表现为共性,但3′UTR-rTM基因缺失呈现多样性;5′LTR作为保守序列较之前所有国内外毒株有11 bp缺失。【结论】研究发现,地方品种皖南黄肉种鸡群存在ALV-J与REV的共感染,且呈现普遍性（6/7）,表明地方品种鸡高肿瘤发生率与ALV-J、REV共感染密切相关;ALV-J的基因缺失主要集中于3′UTR-E与3′UTR-rTM, 3′UTR-E元件基因缺失显示,皖南黄肉种鸡群ALV-J分离株与近十年国内来自白羽肉鸡的ALV-J分离株有共同的来源。     

牛O—A型口蹄疫双价灭活苗研究：小白鼠接种疫苗后的细胞免疫应答

用牛Ｏ型和Ａ型口蹄疫（ＦＭＤ）双价灭活苗疫免小白鼠后，通过四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色分析法检测了其病毒特异性Ｔ细胞增殖应答，相应抗原对免疫组淋巴结细胞的刺激增生作用高于未免疫对照组；通过氨基黑－１０Ｂ比色分析法检测了其致敏淋巴细胞对靶细胞的杀伤率，免疫组为１４．３％￣１５．５％，未免疫组为３．２％；通过常规毛细管法检测了白细胞移动指数（ＭＩ），免疫组为０．７５和０．７０，未免疫组为１．１３。以上     

口蹄疫病毒vp1基因的克隆与植物双元表达载体的构建

通过RT．PCR法获得阿克苏（Akesu／O／58）FMDV结构蛋白基因vp1，将该基因克隆到pGEM．TEasy载体进行核苷酸序列测定。将vp1基因、Kozak序列等插入中间表达质粒pBin438，构建重组中间表达载体pBinVP1。采用三亲融合法构建植物双元表达载体pBinFMDV-vP1。结果表明：vp1基因为639bp。重组中间表达载体pBinVP1经BamHI／Sal I双酶切、PCR扩增和序列测定，表明vp1基因、Kozak序列等插入pBinVP1中。在含50mg／L卡那霉素、25mg／L链霉素和50mg／L利福平的YEB培养基上筛选及对融合农杆菌质粒进行vp1基因的PCR检测，证明植物双元表达载体pBinFMDV-vP1构建正确。     

喷雾给药的优点、特点及应用

1优点 通风和保温本身就是很矛盾的问题,尤其是在冬春季节养殖户常常为了保温而忽略通风,结果造成呼吸道疾病的多发。治疗呼吸道疾病是很棘手的问题,主要是因为呼吸道疾病会引起禽的气囊炎,而在饮水给药时,药物经过吸收进入血液,能够达到气囊的则很少。这是呼吸道疾病难以治疗的主要原因。