氯虫苯甲酰胺干扰桃小食心虫交配的转录组分析

【目的】探明氯虫苯甲酰胺处理后桃小食心虫(Carposina sasakii)成虫的转录组差异,了解该药剂影响桃小食心虫交配的基因在功能分类和代谢通路等方面的生物学特征,挖掘与交配相关的功能基因。【方法】通过生物学实验观察氯虫苯甲酰胺干扰桃小食心虫成虫交配及繁殖情况。采用Illumina Hi SeqTM2500高通量测序技术对刚羽化的桃小食心虫雌雄成虫、羽化后4—6 h进入交配高峰期的雌雄成虫和经氯虫苯甲酰胺处理4—6 h的雌雄成虫进行转录组测序,利用Trinity软件对所得序列进行de novo组装及评估,之后对获得的有效序列进行功能注释,并利用q RT-PCR技术分析氯虫苯甲酰胺处理后相关基因的时空表达变化。【结果】氯虫苯甲酰胺处理后,桃小食心虫的交配率显著降低,寿命缩短,产卵量减少。通过合并组装桃小食心虫转录组有效序列共获得102 831条unigene,其中34 526个有注释信息。根据筛选标准,氯虫苯甲酰胺处理过程中,雌雄虫中分别有122个和147个基因发生变化,其中相同差异基因31个。对所存在的234个差异基因进行GO功能注释和富集分析结果显示,分子功能过程中的催化活性和结合活性及生物学过程中与代谢过程、单一生物体过程和细胞过程相关的5类基因占主导地位。KEGG分类结果显示,富集到代谢通路的最多,有25个,包括昆虫激素合成、药物代谢等。通过比对分析,鉴定c64662.graph_c0为桃小食心虫鱼尼丁受体基因,其长度为15 637 bp,与已报道Cs Ry R的一致性为99.0%。此外,在234个差异基因中,鉴别羧酸酯酶unigene 3个、细胞色素P450 unigene 4个、肌钙蛋白unigene3个、气味结合蛋白unigene 1个和生物钟unigene 1个。细胞色素P450 c40709.graph_c0参与昆虫激素生物合成。根据转录组中基因表达分析,12个基因在雌雄虫中的表达均出现不同变化趋势。q RT-PCR结果显示,氯虫苯甲酰胺诱导羧酸酯酶c51998.graph_c0基因上调表达;药剂处理后,雌雄虫的c57480.graph_c0和c53794.graph_c0的表达分别呈现显著的上调和下调变化,而c40709.graph_c0基因仅在雄虫中显著下调,处理6 h后c53281.graph_c0只在雌虫中上调表达;氯虫苯甲酰胺处理后3个肌钙蛋白基因在整个试验阶段均表现明显的下调趋势;雄虫中的生物钟unigene c60883.graph_c0和气味结合蛋白unigene c45675.graph_c0的变化趋势较为一致,进入暗期后立即上调,但均受氯虫苯甲酰胺的抑制。雌虫体内Ry R的表达量显著上调,而雄虫初次到达求偶高峰期前Ry R的表达量与对照差异不显著,到第2个求偶高峰期时,Ry R表达显著下调。除细胞色素P450c57480.graph_c0、c40709.graph_c0和c53281.graph_c0外,其余基因在雄虫中的表达均高于雌虫。且触角酯酶基因c54944.graph_c0、生物钟基因c60883.graph_c0和气味结合蛋白基因c45675.graph_c0在黑暗光照交替变化时,表达发生明显地上调或下调。【结论】通过转录组测序发现氯虫苯甲酰胺干扰桃小交配的作用机制是由靶标基因、嗅觉相关基因、代谢基因、生物钟基因等相互作用引起的。     

20%吡·哒乳油防治苹果叶螨和黄蚜药效试验

苹果叶螨和苹果黄蚜是为害苹果叶片、新梢的主要害虫,苹果落花后是防治这2种害虫的关键时期,目前在生产中多用不同药剂分别进行防治,防治成本较高,为了达到1次施药同时防治2种害虫的目的,我们于2003—2005年结合农业部安排的田间药效试验,用20%吡.哒乳油对苹果叶螨和苹果黄蚜进行田间药效防治试验,取得了较好的防治效果,现将试验结果报道如下。1材料与方法1.1供试药剂供试药剂为20%吡.哒乳油(新沂中凯农用化工有限公司);对照药剂为2.5%高渗吡虫啉乳油(石家庄宝丰化工有限公司)、15%哒螨灵乳油(江苏克胜集团股份有限公司)。1.2试验地点及条件…     

5种杀蚜剂对苹果绵蚜田间防治效果

苹果绵蚜是重要的检疫性害虫,生产中急需高效安全的防治药剂.在2004和2005年期间对5种常用杀蚜剂防治苹果绵蚜的效果进行了田间试验.结果表明：目前生产上常用的毒死蜱和蚜灭磷在常规使用浓度下对苹果绵蚜的防效仍优于其它品种,吡虫啉、氯氰菊酯对苹果绵蚜有一定控制作用,啶虫脒效果欠佳.     

昆虫化学感受蛋白研究进展

为了研究昆虫嗅觉系统中化学感受蛋白(CSPs)在昆虫体内所发挥的作用,综述了国内外30年来对CSPs蛋白的研究。发现CSPs蛋白不仅存在于昆虫的嗅觉器官触角中,而且在非嗅觉器官中也被鉴定出来,如在小地老虎的性腺中。CSPs蛋白除了行使嗅觉功能外,还具有抗药性、视觉色素载体、营养吸收、再生和发育等功能。在一些昆虫中,同一种CSPs蛋白在性腺和触角中同时表达,因此具有接受信号和释放信号的双重功能。然而,研究还存在不足,今后还需要研究CSPs参与嗅觉识别的具体过程和发挥的作用,以及CSPs参与提高昆虫抗药性的功能。     

短时高温胁迫对桃小食心虫成虫存活和生殖的影响

在短期高温频发的大背景下,研究了短时高温胁迫对桃小食心虫(Carposina sasakii Matsmur)成虫存活和生殖的影响。结果表明,高温胁迫会导致成虫的寿命的缩短,43℃处理3h后桃小食心虫的存活率为0%;随着温度的升高,成虫的产卵量呈现下降的趋势。而不同胁迫时间的结果表明,29℃的处理下3h较1h的产卵量下降29.2%;高于32℃时,随着温度胁迫时间的延长,产卵量有明显的上升;卵的孵化率方面,38℃胁迫1h及35℃以下的高温处理下,F1代卵孵化率均在85%以上,在经过38℃3h、41℃3h和43℃1h的温度处理后,卵的孵化率下降到75%以下。特定年龄存活率(lx)随着胁迫温度的升高时间的延长,平台期逐渐缩短,高于35℃后,平台期消失。特定年龄生殖力(mx)曲线分析表明,随着高温胁迫时间延长,产卵高峰期推迟。本研究结果表明,夏季的35℃以上的高温对桃小食心虫种群有极其不利的影响。     

苹果园二斑叶螨的经济为害水平

二斑叶螨是为害苹果的重要害螨。为经济有效地控制其为害,通过田间调查二斑叶螨种群动态,利用螨日（MD）和苹果的产量损失率建模,研究了苹果树上二斑叶螨的经济为害水平（EIL）。结果显示,苹果的产量损失率与二斑叶螨的螨日具有显著相关性,并据此建立了螨日与产量损失率的回归方程：Q=0．0157＋0．00016MD,R2=0．9567。在经济允许损失率为4．57％时,若以虫口密度作为经济允许为害水平的评价方法,则7月3日之前的EIL≤7．70头／叶,7月25日之前的EIL≤8．70头／叶;当以累计螨日评价时,7月3日之前累计螨日≤29．93,7月25日之前累计螨日≤122．95,在整个生长季的累计螨日需低于188．70。     

渤海湾苹果产区主要病虫害发生动态及综合防治策略

全面分析了渤海湾苹果产区主要病虫害的发生动态及防治现状,对造成苹果树主要病虫害动态变化的原因进行了分析,并提出病虫害综合防治策略。     

辽宁苹果主要害虫、用药现状与发展趋势

文章概述了目前辽宁省苹果树主要害虫的发生趋势,常用杀虫剂的使用情况及新型杀虫剂的特点。随着国家农药减量政策的实施,生态友好的新型杀虫剂将不断推出并应用于生产。     

新型杀螨剂螺螨酯防治苹果全爪螨药效试验

2006—2007年,对240g/L螺螨酯悬浮剂防治苹果全爪螨的效果进行了田间试验。结果表明,240g/L螺螨酯悬浮剂4000～6000倍液是防治苹果全爪螨的高效药剂,持效期可达49天,优于目前生产常规药剂15%哒螨灵乳油3000倍液。     

苹果主要病虫害的预测预报、防治适期及药剂选择

病虫害的预测可分为长期、中期和短期预测。在果树病虫害防治中,最常用的主要是中、短期预测。根据预测,在病虫害达到防治指标时及时进行药剂防治,可以减少喷药次数,提高防治效果。选择农药品种的原则是对目标病虫高效,而对人、畜安全,尽量不伤害天敌,不污染环境。根据我们正在进行的科研项目和多年承担全国农药登记田间药效试验过程中积累的数据和经验,以辽宁省西部地区为例,就苹果主要的病虫害在预测预报、防治适期、药剂选择等3个方面做一介绍。1桃小食心虫1.1预测预报1)性诱剂诱捕法。从5月中、下旬开始在果园内设置桃小食心虫性外激素…