烟草青枯病病圃土壤细菌组成的高通量测序分析

为了解烟草青枯病与土壤细菌群落结构的关系,采用454焦磷酸测序技术对烟草青枯病抗性鉴定圃中的土壤细菌组成进行了分析。结果表明,从病圃土壤中获得了1 963条高质量序列,归属于14个已知细菌门类、尚未培养出的细菌和分类地位未知的种类,其中变形菌门、绿弯菌门、酸杆菌门、浮霉菌门、放线菌门、芽单胞菌门为病圃土壤中的优势菌群,分别占总菌群数的29.91%、17.10%、13.73%、11.46%、7.08%、6.40%。烟草青枯病病圃土壤中的拟杆菌门和放线菌门细菌在总菌群中丰度较低,可能与烟草青枯病发生存在关联。     

贵州省烟青虫遗传多样性

【目的】探讨贵州省烟青虫（Helicoverpa assulta）不同地理种群间是否存在遗传分化及分化程度,揭示遗传分化产生的规律及机理,为指导虫情监测及制定合理的综合防治方案提供科学依据。【方法】以贵州省30个烟青虫地理种群为试验材料,从43对近缘种SSR引物中筛选出6对引物用于PCR扩增,PCR产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,常规银染法染色。用PopGene Version1.32对各种群进行遗传多样性分析。根据Nei’s遗传距离,利用MEGA5.0软件进行UPGMA聚类分析。采用Mantel检测法比较遗传一致度与海拔差距、遗传距离与地理距离的相关性。【结果】30个烟青虫地理种群在6个微卫星位点中观测等位基因数为3-8,平均为5,有效等位基因数为1.4498-2.2219,平均为1.8594。Shannon信息指数为0.5310-1.0609,平均为0.8423。观测杂合度为0.0260-0.2672,平均为0.1239;期望杂合度为0.3123-0.5520,平均为0.4539;期望杂合度均高于观测杂合度,说明各种群以纯合子为主。烟青虫地理种群在6个微卫星位点上,FIS为0.0798-0.7906,平均为0.2801,FIT为0.4842-0.9731,平均为0.7809,FIS、FIT均为正数,说明贵州省各烟区烟青虫种群存在近交现象。FST为0.3879-0.9256,基因流Nm﹤1,说明在这6个位点上各种群间极度分化,基因交流水平低。遗传距离（D）为0.0068-2.5193,遗传一致度（I）为0.1051-0.9933,松桃与印江种群之间的遗传距离最小,遗传一致度最大,道真种群与赫章种群之间的遗传距离最大,遗传一致度最小。UPGMA聚类分析表明,贵州省30个烟青虫地理种群大致分为3部分,聚类结果在自然地理分布方面没有呈现出明显的规律性,仅部分种群体现了地理距离和遗传分化的关系。Mantel检测表明,遗传距离与地理距离无显著相关性,遗传一致度与海拔差距无显著相关性。【结论】贵州省烟青虫种群具有较丰富的遗传多样性。各种群间极度分化,遗传变异主要来自种群间。地理隔离没有对种群遗传分化造成显著影响。     

贵州典型山地气候区烟草赤星病菌的致病力

为了解贵州典型山地气候区烟草赤星病菌的致病力分化情况,利用离体叶片悬滴接种法对2011年在贵州5个典型气候区代表性植烟县采集分离的25株烟草赤星病菌进行了致病力测定。结果表明:供试病原菌均具有致病力,根据接种后的病情指数大小可将致病力分为强、较强、中、弱4种类型,不同菌株对烤烟K326叶片的致病力差异明显,其中,强致病力2株,较强致病力2株,中等致病力10株,弱致病力8株,未发现无致病力菌株,大部分菌株致病力居中;不同山地气候区烟草赤星病菌致病力存在明显差异,同一区域致病力也存在一定差异。     

贵州烟草蚜传病毒病（PVY、CMV）发生规律及其预测模型的初步研究

通过2002-2011年对贵州代表性烟区烟草蚜传病毒病(PVY、CMV)的系统调查与普查,分析了烟草蚜传病毒病发生程度与有翅蚜迁飞量及主要气象因子间的关系,初步了解了该病害的发生流行规律。并以有翅蚜迁飞量和关键气象指标为预报因子,应用DPS统计软件进行逐步回归分析,初步建立了烟草蚜传病毒病发生程度短期预测模型Y=44.168 7+1.106 9 X1-1.352 2 X4-0.403 9 X6-0.142 6 X11+0.023 5 X19-0.289 2 X20(其中,X1=移栽初期10d内日平均诱蚜量;X4=上年12月均温;X6=上年12月平均相对湿度;X11=2月降水量;X19=5月降水量;X20=5月雨日数),经显著性检验和预报验证,回归方程达极显著水平,回测准确率平均达89.04%,实报验证误差率为11.57%～13.88%,说明入选预报因子比较切合贵州实际,预测模型具有较大的实用价值。     

不同诱源组合对绥阳烟草害虫的诱集效果研究

为进一步提高不同诱源对烟田害虫的诱集效果,筛选出对害虫诱集效果好且对天敌影响较小的诱源。将性诱剂和糖醋液结合,与单一诱源诱集效果进行比较,研究其对烟草夜蛾科害虫的诱虫效果,结果表明,糖醋液+性诱剂组合诱虫效果均显著好于糖醋液、性诱剂和食诱剂的诱集效果,且对烟田天敌的影响较小。建议将糖醋液和性诱剂组合的诱源方式开展烟田害虫防控。     

苯并噻二唑对漂浮育苗烟草白粉病的诱导抗性及其对烟苗安全性研究

测定了苯并噻二唑对烟草白粉病菌的毒力、防治烟草白粉病的持效期以及对烟苗的安全性。结果表明,苯并噻二唑对烟草白粉病具有很高的诱导活性,随着药剂浓度的增加,烟草白粉病的发病率和病情指数均显著降低,它对烟草白粉病菌的EC50和EC90分别为3.30μg/mL和10.49μg/mL;苯并噻二唑对烟草白粉病具有较长的持效期,50%苯并噻二唑水分散粒剂23g/hm2 2次喷雾处理4叶期烟苗,30d后的防效仍然达到100%,它对烟草新生烟叶具有良好的保护作用;此外,50%苯并噻二唑水分散粒剂>95g/hm2喷雾烟苗会给烟苗造成严重药害,主要表现为烟苗生长滞缓,叶片坏死和黄化。     

烟草青枯病拮抗菌株X-60的分离鉴定及其表型组学分析

 为了探寻烟草青枯病的生防菌剂,本研究以烟草青枯病菌为指示菌,从烟草根围土壤中分离获得拮抗细菌X-60,其抑菌圈大小约为37 mm。经形态观察、Biolog鉴定及16S rDNA序列分析,该细菌为解淀粉芽孢杆菌。抗菌谱测定表明,它对烟草灰霉病菌、烟草炭疽病菌、烟草黑胫病菌和烟草赤星病菌均具有较强的拮抗作用,菌丝生长抑制率分别为51.28%、58.97%、60.53%和72.78%。温室盆栽试验表明,X-60菌液灌根对烟草青枯病发生具有良好的预防作用。表型芯片研究结果表明,解淀粉芽孢杆菌能代谢41%的碳源、77%的氮源、86%的磷源、69%的硫源,具有91种生物合成途径;72种碳源、45种氨基酸类氮源和190余种肽类氮源均能显著促进该菌的生长;其高效代谢的磷源有二硫代磷酸盐和半胱胺S-磷酸盐,高效代谢的硫源有硫代硫酸盐、S-甲基-L-半胱氨酸和硫辛酰胺。研究结果为解淀粉芽孢杆菌X-60生防菌剂的开发及将其应用于烟草青枯病的生物防治提供了理论基础。     

虫害诱导烟草抗性对斜纹夜蛾取食及解毒酶的影响

为探究不同虫害诱导抗性烟草(Nicotiana tabacum L.)对斜纹夜蛾(Spodoptera litura Fabricius)取食和解毒生理的影响,本研究以烤烟品种雄性不育K326为供试材料,观察斜纹夜蛾幼虫对棉铃虫[Helicoverpa armigera(Hübner)]诱导烟草、斜纹夜蛾诱导烟草、烟蚜[Myzus persicae(Sulzer)]诱导烟草的取食选择,以机械处理(打孔、针刺)和未作任何处理的烟草作为阳性和阴性对照,检测分析了取食各虫害处理烟草后斜纹夜蛾体内乙酰胆碱酯酶(AchE)、羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、多功能氧化酶(MFO)等酶活性的变化。结果表明,斜纹夜蛾初孵幼虫喜食阳性对照打孔和烟蚜诱导处理后的烟叶,而相对避免取食同种昆虫诱导后的烟叶,3龄幼虫亦喜食阳性对照打孔诱导烟叶。取食各虫害处理烟叶后斜纹夜蛾体内的AchE活性均被诱导升高,其中烟蚜处理的AchE活性最高,在48 h时较CK升高了65.17%。棉铃虫、斜纹夜蛾和烟蚜处理在48、48和4 h时分别诱导CarE、MFO、GST活性较CK升高14.38%、72.22%和47.47%,而三种处理对应的MFO和GST,CarE、MFO分别在12和48,48、4 h时升高后与CK没有显著差异(P>0.05),斜纹夜蛾处理的GST活性和烟蚜处理的CarE活性均在48 h时被明显抑制,仅为CK的55.67%和81.05%。说明斜纹夜蛾对不同抗性烟草存在取食差异,取食抗性烟草均可激活斜纹夜蛾AchE活性,不同抗性处理下其他酶活性随着时间呈现特异性变化。本研究可为斜纹夜蛾在烟田中的综合防治研究提供思路和研究基础。     

烟草苗床期杂草药剂防效试验

对斯美地水剂等4种药剂防除烟草苗床期杂草的试验结果表明，32．7％斯美地水剂，35％适每地水剂，98％必速灭颗粒剂，棉隆等4种药剂对烟草苗床期杂草均有较好的防除效果，能有效地防除禾本科，蓼科，苋科，鸭跖草科，菊科等烟草苗期主要杂草，对苗床期次要杂草石竹科，茜草科，豆科等的防效高达100％，有的次要杂草（如莎草科的香附子）则表现出很强的耐药性。     

烟叶重金属关键影响因子及其含量预测

为烟叶重金属的合理调控提供依据,针对土壤、灌溉水、降水和烤烟专用基肥4个关键因子,采用人工模拟试验法及相关分析数理统计法,研究各因子对烟叶重金属的污染常数,以污染常数为基础参数,分析烟叶重金属的来源及预测其含量。结果表明:各因子对烟叶中Cd、Hg、As、Pb、Cr的贡献率(污染常数)存在明显差异,在相同重金属浓度下,烟叶中各重金属含量的贡献率为降水灌溉水土壤烤烟专用基肥;贵州烟区烟叶中重金属主要来自土壤和烤烟专用基肥,其中,来自土壤的Cd、As、Pb、Cr各占66.82%、63.98%、92.90%和96.91%,烤烟专用基肥的各占33.01%、35.76%、7.05%和3.06%,Hg元素则有99.64%的来自烤烟专用基肥;初步构建烟叶重金属含量预测模型,经实测验证,各元素预测值平均偏差率在30%左右,预测准确率达60%以上,应用于烟叶重金属含量的粗略估测基本可行。