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新疆加工番茄上番茄花叶病毒的分子鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从表现花叶、畸形的加工番茄病株上获得分离物xj124,用1 对ToMV CP 基因引物进行 RT-PCR ,扩增得到了689 bp 的特异性核苷酸片段.将PCR产物插入到克隆载体pMD1 8-T中再转化到大肠杆菌TOP10.经限制酶酶切鉴定,重组克隆中含有与PCR 产物大小相同的689 bp 的插入片段.cDNA全序列分析表明,所扩增出的689 bp ToMV CP基因,含1个480 bp开放阅读框架( ORF),编码160氨基酸组成的蛋白,所克隆的基因包含完整的ToMV CP基因.所测得的xj124分离物与国内外已报道的部分ToMV CP基因序列比较,核苷酸同源性高达84.4;~99.8;,氨基酸同源性高达98.7;~100;.因此将该分离物鉴定为番茄病毒病花叶病毒. 相似文献
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1990—1992年的调查表明,新疆露地栽培辣椒上的病毒病有5种,其症状表现分别为黄斑花叶型、花叶蕨叶型、花叶顶枯型、坏死落叶型、轻斑驳潜隐型,但随辣椒品种、生育期不同及季节变化,症状表现类型也有变化。 相似文献
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[目的]构建抗黄瓜花叶病毒RNAi载体,并将载体转入烟草。[方法]采用RT-PCR方法,扩增黄瓜花叶病毒NS04加工番茄分离物的RNA2基因组的序列。选取CMVRAN2基因组中的复制酶片段作为靶序列,构建pBi35SCR2真核表达载体,并对表达载体进行鉴定;通过农杆菌介导的方法将表达载体转入烟草,用PCR的方法检测载体是否转入。[结果]系统进化树分析结果表明,RNA2中编码CMV-2a的序列与中国浙江的DQ412731分离物有较高核苷酸及氨基酸同源性,分别达到98.0%和96.5%;PCR结果表明,试验成功构建了pBi35SCR2真核表达载体,并成功将表达载体转入烟草。[结论]试验获得的转基因烟草可作为后期攻毒试验的材料,并为研究加工番茄抗黄瓜花叶病毒奠定了基础。 相似文献
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新疆石河子南瓜和加工番茄CMV卫星RNA与RNA3序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
为探究石河子地区侵染南瓜和加工番茄的CMV卫星RNA及基因组RNA3的分子变异及株系分化,从石河子蔬菜研究所采集南瓜和加工番茄样品并提取dsRNA,利用RT-PCR方法克隆5个CMV卫星RNA序列和2个CMV RNA3序列,南瓜样品卫星RNA及RNA3分别命名为N-sate和N-R322,片段大小分别为335nt和2 214nt;加工番茄样品卫星RNA及RNA3分别命名为To-9-sate、S18-1、S9、S18-2和To-9-R322,片段大小分别为381nt、396nt、334nt、334nt和2 216nt。卫星RNA序列分析结果显示,卫星RNA的序列差异与地域有一定的相关性,与寄主类别无关。同时这5个卫星RNA序列都不含有CMVYSAT所具有的黄化区域。N-R322和To-9-R322序列分析结果显示,二者均属于CMV亚组ⅠB,且CMV分离物有一定的地域相关性,没有明显寄主相关性。 相似文献
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对来自新疆不同地区的 12个甜菜坏死黄脉病毒 (BNYVV)分离物的核酸组分进行RT PCR分析表明 ,不同地区的BNYVV分离物RNA组分有一定差异。塔城、奇台和石河子 14 5团的BNYVV分离物含有RNA1、RNA2、RNA3和RNA4 ;库尔勒地区的BNYVV分离物还含有RNA5 ;石河子甜菜研究所病圃的BNYVV分离物只含有RNA1和RNA2。对RNA1- 4的RT -PCR产物进行SSCP分析还表明 ,新疆的所有BNYVV分离物既不同于美国的BN TX ,也不同于我国黑龙江的He分离物 ,其内部也存在明显的遗传分化 ,将新疆的 12个BNYVV分离物初步归为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ共 4个类群。Ⅰ类群 :石河子分离物S1、S2 ;Ⅱ类群 :塔城T3、T6、T7和T8分离物 ;Ⅲ类群 :库尔勒K1、K2、K4、K5 ;Ⅳ类群 :奇台Q1、Q2分离物。而且这种遗传分化有明显的地域分布性。 相似文献
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