红绒盖牛肝菌发酵培养基筛选及液体培养条件

在摇瓶液体培养条件下,研究了14种不同成分培养基对红绒盖牛肝菌菌丝体生长的影响及液体培养条件,结果表明,红绒盖牛肝菌最适发酵培养基为:蔗糖2%、玉米粉2%、黄豆粉1.5%、酵母膏0.5%、MgSO40.05%、KH2PO40.1%。培养基中添加有机硅类消泡剂对红绒盖牛肝菌菌丝体生长没有影响;液体发酵的适宜初始pH为5～6;液体培养周期为10 d,菌丝体生物量可达5.7 g/L。     

红绒盖牛肝菌发酵条件及对杨树溃疡病的防治效果

为探究外生菌根真菌的发酵条件,并进行杨树溃疡病的田间防治试验。以红绒盖牛肝菌[ Xerocomus chrysenteron (Bull.： Fr.) Quél]为实验材料,分析不同的接种量、溶解氧及pH值对其液体发酵的影响,发酵产物并用于杨树溃疡病的田间防治。结果表明：接种量7.2％,发酵中后期溶解氧浓度不低于33％,培养基pH保持5.5左右时可有效提高红绒盖牛肝菌菌丝生物量,且缩短了发酵周期;灌根法研究红绒盖牛肝菌对杨树溃疡病的田间防治效果,防治效果可达到54.5％。该实验所得出的红绒盖牛肝菌发酵条件和野外防治数据可为今后该菌株田间应用提供参考。     

应用特异引物组合检测松材线虫

采用特异引物组合对枯死松树内分离的松材线虫、拟松材线虫及其他线虫进行检测。结果表明,所有松材线虫株系均扩增出一条860 bp的清晰、明亮的条带,而拟松材线虫、其他线虫均无扩增产物。利用此特异引物组合构建了松材线虫检测试剂盒。采用本试剂盒可以在较短时间内对线虫进行鉴定。整个检测过程约需3 h,实现了对松材线虫的快速检测目标。检测结果便于判读,适合于生产上应用。     

松材线虫细胞色素cyp-13A11基因RNA干扰载体的构建及其功能分析

[目的]构建松材线虫cyp-13A11基因RNA干扰载体,研究cyp-13A11基因的功能,为松材线虫病的生物防治提供理论依据.[方法]本文通过设计特异性引物,扩增松材线虫cyp-13A11基因片段,构建至pEASY-T1干扰载体上并转入Trans1-T1大肠杆菌菌株.采用浸泡法对松材线虫进行RNA干扰,通过qRT-P...     

一种新型复配药剂2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺对松材线虫毒力药效

【目的】研究新型复配药剂2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺在防治松材线虫病方面的潜力,旨在探索一种可能替代阿维菌素和甲维盐的新药剂新配方。【方法】将复配药剂2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺与5%阿维菌素和5%氟吡菌酰胺进行毒力药效对比。通过浸虫法进行室内杀线效果试验,分析3种药剂对松材线虫的致死效果。分别用3种药剂LC₂₀(亚致死浓度)的药量均匀喷雾在灰葡萄孢上,观察在不同药剂处理下松材线虫在灰葡萄孢上的取食情况及松材线虫生长繁殖数量,计算亚致死浓度下松材线虫的繁殖速率。收集松材线虫卵于皿底,加入不同浓度药剂于培养皿,24 h后观察卵孵化情况,计算卵孵化率,并用蔡司荧光显微镜观察卵形态。将松材线虫与药剂混合置于梯度温度培养箱,分析不同温度条件下复配药剂2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺对松材线虫杀线效果。【结果】1) 3种药剂处理松材线虫24 h后,2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺、5%阿维菌素、5%氟吡菌酰胺的LC₅₀(致死中浓度)分别为2.020 8、51.153 6和21.607 1 mg·L^-1,LC₂₀分别为...     

基于MaxEnt模型预测青杨脊虎天牛在中国的适生区

青杨脊虎天牛(Xylotrechus rusticus Linnaeus)是我国进境植物检疫性有害生物和林业检疫性有害生物.青杨脊虎天牛极易随木质包装、木制品等调运进行传播,具有较大的入侵风险.本文通过MaxEnt模型对青杨脊虎天牛在我国的适生区进行预测分析,结果为:青杨脊虎天牛在我国的适生区面积占比达到62.94％,...     

混合接菌对马尾松苗木生长的影响

许多研究证明,菌根菌混合接种对宿主植物生长具有正效应。本试验中发现,504、EG、HX和Pt2四种菌根菌混合接种能显著促进幼苗生长,与单一接种相比有显著性提高。在促进幼苗生物量的积累上,四种菌根菌混合接种分别比504、EG、HX和Pt2单一接种增加了379.68%、184.84%、126.21%和38.21%,比对照增加了467.79%。     

蜡样芽孢杆菌NJSZ-13中蛋白酶ATP-α与ClpX的杀线虫活性研究

【目的】阐明蜡样芽孢杆菌NJSZ-13中杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的杀线分子机制,构建杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的原核表达载体。【方法】克隆杀线蛋白酶编码基因atpA与clpX,利用基因工程手段对杀线蛋白酶编码基因进行PCR扩增,并与载体pET-21b连接构建重组载体,提取重组质粒转入蛋白表达载体大肠杆菌BL21(DE3)。利用菌落PCR和测序验证转化效果。加入IPTG诱导蛋白表达,使用Ni-NTA柱进行重组蛋白的纯化,利用SDS-PAGE与Western blot验证ATP-α与ClpX纯化效果并进行杀线活性测定。【结果】菌落PCR验证和测序表明,重组载体中含有蛋白酶编码基因atpA与clpX,且基因序列与参考序列一致,证明目的基因已经成功插入BL21(DE3)表达载体中。SDSPAGE与Western blot验证表明,重组蛋白得到正确诱导与纯化,成功构建杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的原核表达载体。杀线活性测定结果表明ATP-α与ClpX均具有较强的杀线效果。ATP-α在72 h达到66.75%的杀线率,ClpX在72 h达到75.46%的杀线率。同时,两个蛋白酶共同作用...     

松树脂溃疡病菌及其近缘种AFLP分析

利用AFLP分子标记技术对松树脂溃疡病菌及其近缘种进行DNA指纹分析,筛选出10对多态性较高的引物.上述引物在供试的9种17个菌株中共扩增出298条带,其中有多态性带283条,多态性位点百分率为94.97%.每对引物产生的多态性位点百分率在89.29%-100%之间,表明松树脂溃疡病菌及其近缘种间在DNA水平上存在广泛变异.根据AFLP标记结果计算松树脂溃疡病菌及其近缘种间的相似系数,对它们的亲缘关系进行定量描述.聚类分析结果表明,菌株间的聚类与生物学种分类的结果一致.分析引物E-AT/M-CAA绘制的镰刀菌AFLP指纹图谱遗传多样性,确定李瑟组镰刀菌各交配群的特异带、差异带,区分供试的7个交配群.     

保水剂对干旱胁迫下湿地松种子出苗的影响

比较分析了几种保水剂不同质量浓度处理对湿地松(Pinus ellioti)种子萌发及出苗后高生长的影响。结果表明,保水剂处理对湿地松种子萌发均有一定促进作用,但不同种类保水剂间差异显著,正常浇水(W)、K、KD、SZ处理后种子萌发率要显著高于H和不施保水剂的干旱胁迫处理(NW)(P=0.03<5%);保水剂使用质量浓度间也存在极显著差异,W(1 000 g/L)、150 g/L、100 g/L、50 g/L处理显著高于10 g/L、NW(0)(P=0.003<1%)。此外,不同保水剂对种子出苗后高生长也有着明显促进作用,各处理间差异达极显著水平(P=0.000<1%),其中以W、K处理作用效果最好;不同的保水剂使用质量浓度间差异达极显著水平(P=0.002<1%),W(1 000 g/L)、150 g/L、100 g/L质量浓度处理后的苗高显著大于50 g/L、10 g/L和NW(0)。