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表达H9亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒疫苗的遗传稳定性 总被引:4,自引:0,他引:4
将表达H9亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒疫苗连续传代至30代,取第10、20、30代重组病毒作为受检代次,进行外源基因片段的克隆与测序,以间接免疫荧光试验检验各代次的表达,并以第10、20、30代重组鸡痘病毒疫苗进行免疫保护效力试验。对各代次模板进行PCR反应,分别扩增出特异的1.7kb外源基因片段,酶切位点与原始代次相同;各代次外源基因序列与原始序列相比,仅有1个碱基发生变化,不涉及氨基酸的变化;免疫荧光试验显示各代次均有显著表达;各免疫组在免疫后第7、10、14、20天的HI抗体效价(log2)逐渐上升;攻毒后第5天各免疫组排毒率与对照组相比差异显著,各免疫组之间无显著差异。结果表明:此重组载体疫苗具有较好的遗传稳定性,经过30代的传代后外源插入基因及其表达未见变化,免疫保护效力亦与原代一致。 相似文献