斑节对虾PmML1和PmML2基因的鉴定及表达分析

为进一步了解ML家族基因在斑节对虾先天免疫中的作用，采用PCR和RACE方法克隆到斑节对虾(Penaeus monodon)2个ML家族基因PmML1和PmML2，并对其进行生物信息学分析，同时通过实时荧光定量PCR技术分析2个ML家族基因在斑节对虾各组织的表达分布。结果显示:PmML1的开放阅读框(Open Reading Frame, ORF)为462 bp，编码153个氨基酸；PmML2的ORF为471 bp，编码156个氨基酸。2个基因都具有1个典型的ML家族蛋白结构域。多重比对结果显示，2个基因的ML结构域与组成3对二硫键的半胱氨酸残基位置都相对保守。氨基酸序列对比结果显示，PmML1和PmML2之间的相似性仅为42.37%。PmML1与日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)的ML蛋白MjML4的相似性最高，比例高达91.5%，PmML2与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的ML蛋白相似性最高，比例高达88.46%。系统进化分析结果显示，PmML1和PmML2存在于2个不同的分支，说明2个基因的进化相对独立，证明本研究中鉴定到的是2个不同的基因。实时荧光定量PCR结果显示，PmML1在对虾眼柄中的表达量最高，其次为肠、胃、心、鳃、肌肉和肝胰腺，在血细胞的表达水平最低；PmML2在眼柄中表达量最高，其次为肠、鳃、胃、血细胞、心、肝胰腺和肌肉，在肌肉中的表达水平最低。眼柄是重要的神经内分泌调节器官，推测PmML1和PmML2可能在斑节对虾神经内分泌调控等过程中发挥重要作用。     

凡纳滨对虾LvML1基因克隆与表达分析

髓样分化蛋白2相关脂质识别(ML)蛋白是无脊椎动物先天免疫与脂质代谢方面具有重要功能的一类蛋白。克隆凡纳滨对虾1个新的ML基因cDNA全序列，命名为LvML1,包含254 bp的5′非编码区、913 bp的3′非编码区和462 bp的开放阅读框，开放阅读框共编码153个氨基酸。LvML1蛋白具有7个半胱氨酸残基，预测可形成3对二硫键，且具有1个典型ML家族结构域。多重序列对比发现，ML结构域和半胱氨酸残基位置均相对保守。系统进化显示，LvML1蛋白与斑节对虾、日本囊对虾、美洲螯龙虾等甲壳动物的ML蛋白聚为一支。实时荧光定量PCR结果显示，LvML1基因在所有检测组织中均有表达，在心脏中表达量最高。发育表达结果显示，LvML1基因自无节幼体期已有表达，在变态至溞状幼体期、糠虾幼体期及仔虾的每次转换均上调表达，表明其参与了对虾幼体的发育过程。十足目虹彩病毒1人工感染24 h后，LvML1基因在肝胰腺和鳃中表达量下降，差异极显著(P<0.01),说明其参与了对虾抗病毒的先天免疫过程。本试验结果可为了解凡纳滨对虾ML蛋白家族的结构功能及其在对虾先天免疫和幼体发育中的重要作用提供基础资料。     

黄羽肉鸡滑液支原体和鸡病毒性关节炎的鉴别诊断和防治

鸡滑液支原体（Mycoplasma synoviae,MS）病鸡冠髯苍白、跛行和发育迟缓，跗关节或爪垫肿胀，病鸡因疼痛不愿站立。禽呼肠孤病毒（Avian reovirus,ARV）引发的鸡病毒性关节炎，主要危害肉鸡，引起鸡的关节炎、腱鞘炎。2种疾病均引起黄羽肉鸡瘫痪临床不易区分，本文拟通过临床症状、剖检变化对2种疾病进行鉴别诊断，并提出相应的防治措施。