低温对鱼蛋白品质的影响及新型抗冻剂的保护作用

水产品种类繁多、营养丰富,但其独特的生物学特性使其在常温下很容易腐败变质。目前常用的储藏方法是低温冷冻储藏,但在冻藏过程中,蛋白质可能发生变性,导致其功能特性降低,从而影响水产品的风味和营养价值。添加抗冻剂可以有效防止水产品蛋白质冷冻变性,但传统抗冻剂不符合目前低糖低热的消费趋势。本文讨论了影响鱼蛋白变性的因素,总结了肌原纤维蛋白在冷藏下的变化,并阐述了新型抗冻剂对水产品品质的影响及其作用机理,旨在为今后开发多种新型的抗冻剂奠定基础。     

夏季产蛋鸡疾病的诊断和预防

正在夏季高湿高温的环境中,夏秋季节是中间宿主苍蝇和甲虫大量繁殖季节,是蛋鸡感染绦虫的重要阶段,5月与8月各预防驱虫一次。夏季产蛋鸡极易出现多种疾病问题,不仅会影响产蛋鸡的产蛋量,严重时还会对产蛋鸡的生命健康造成严重威胁,疾病的传播,导致大量生产经济损失。因此,加强夏季产蛋鸡疾病的诊断与预防十分必要。1中暑的诊断与预防中暑是夏季最为常见的疾病,是由于暴晒、环境温度过高等造成的一种急性病症,严重时可能会导致产蛋鸡猝死。当产     

鸡血浆纤维连接蛋白的提纯及酶联免疫吸附检测方法的建立

利用纤维连接蛋白（FN）与明胶特异结合的特点，用明胶亲和层析结合电泳裁胶的方法提纯鸡血浆FN并制备了兔抗鸡FN抗血清。纯化的FN经凝胶电泳鉴定为一条蛋白带与人FN在同一位置上，亚单位分子量约230KDa；经免疫鉴定，提纯鸡血浆FN与兔抗人FN抗体有交叉反应性。用兔抗鸡FN抗体包被捕捉抗原，建立了检测鸡血浆FN的双抗体酶联免疫吸附法（ELISA），此法具有操作简单、特异性强、灵敏度高的特点，适用于鸡血浆FN的检测。鸡血浆FN的提及其检测方法的建立，为FN的兽医领域的进一步研究和应用奠定了基础。     

新疆褐牛CD46基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

旨在克隆并表达新疆褐牛CD46基因,制备其多克隆抗体,为进一步研究牛CD46分子生物学功能奠定基础。采用RT-PCR方法从新疆褐牛脾脏中扩增CD46基因全长,进行测序,并对测序结果进行生物信息学分析,将CD46部分序列亚克隆于pET-28a(+)和pVAX1载体中。将阳性重组质粒pET-28a-△CD46转化于E.coli Rosetta-gamiB(DE3)感受态细胞,诱导表达截短CD46蛋白。用切胶纯化的His-△CD46融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体;采用ELISA测定多克隆抗体的效价;取无内毒素重组质粒pVAX1-△CD46转入BHK-21(仓鼠肾细胞)细胞,表达产物以制备的多克隆抗体为一抗,采用Western blot法检测该多克隆抗体的特异性。CD46基因的测序结果表明,部分基因蛋白表达、纯化条带大小与预期一致;制备的抗牛CD46多克隆抗体效价高于1∶128 000,并具有良好的特异性。     

247株猪源沙门菌对四环素类药物耐药性和耐药基因的检测分析

为探究猪源沙门菌分离株对四环素类抗菌药物耐药性及四环素耐药基因(tet)的流行与分布情况,从7省的合作猪场采集病死猪肝脏、肺脏、肠道作细菌分离,利用沙门菌属特异性侵袭基因(invA)和16S rDNA扩增、测序等方法进行鉴定,并用微量肉汤稀释法测定沙门菌分离株对四环素类抗菌药物的敏感性,PCR方法测定tet基因,以及ERIC-PCR方法分析猪源沙门菌之间的相关性和遗传关系。从823份病料中分离鉴定出247株猪源沙门菌,分离率为30.01%。药敏结果显示,对多西环素、土霉素的耐药率分别为87.45%和94.74%。PCR检测发现,分别有62,66,3株单独携带tetA、tetB、tetC基因;分别有38,8,4,7,1株菌同时携带两种不同的tet基因(tetA+B、tetA+C、tetA+D、tetB+C、tetC+D);分别有9,6,1,6,1,4,3株菌同时携带3种不同的tet基因(tetA+B+C、tetA+B+D、tetA+B+M、tetA+C+D、tetA+D+M、tetB+C+D、tetB+C+M);分别有6,2株菌同时携带4种不同的tet基因(tetA+B+C+D、tetA+C+D+M);没有检测到单独携带tetD、tetM以及同时携带5种tet基因的菌株。接合试验表明,tetM可与tetA或tetC共同在沙门菌与大肠杆菌间转移,导致菌株多西环素抗性水平转移。试验菌共分为A~δ共30个ERIC型,tet基因分布于不同ERIC型菌株中,表明其在试验菌株间水平扩散。本试验首次在猪源沙门菌中发现了编码核糖体保护蛋白的四环素类耐药基因tetM。猪源沙门菌对四环素类药物耐药严重,对多西环素、土霉素具有普遍耐药性,tetA、tetB基因在7省猪源沙门菌中流行最广泛,分离菌对四环素类药物的普遍耐药性与单个或多个tet基因的普遍存在密切相关。     

小尾寒羊SP1基因克隆及其对前体脂肪细胞分化的影响

试验旨在对小尾寒羊特异性蛋白1（specificity protein 1,SP1）基因进行克隆和序列分析,并研究SP1基因对前体脂肪细胞分化的影响。选取1月龄小尾寒羊尾部脂肪组织进行前体脂肪细胞的分离、培养和诱导分化;用重叠PCR法克隆SP1基因编码区（coding DNA sequence,CDS）;用生物信息学软件分析SP1基因CDS,并对其编码蛋白的结构、功能结构域、亚细胞定位、翻译后修饰进行预测;用慢病毒包装SP1基因过表达、干扰及对照质粒转染293T细胞后,收取病毒液感染小尾寒羊前体脂肪细胞;用油红O染色检测脂滴沉积能力;用实时荧光定量PCR检测SP1基因和成脂标志基因的mRNA表达量。结果表明,小尾寒羊SP1基因CDS全长2 340 bp,编码779个氨基酸;序列相似性分析显示,小尾寒羊SP1基因CDS及其编码序列与绵羊、山羊的相似性最高,其次是牛、马、猪、人、小鼠、大鼠,与鸡的相似性最低,系统进化分析结果与之相符;SP1蛋白定位于细胞核,有109个磷酸化位点,其二级结构由α-螺旋、β-转角、无规则卷曲和延伸链4种结构组成,所占比例分别为16.94%、8.60%、54.17%和20.28%,二级结构和三级结构均存在3个锌指结构域;过表达、干扰及对照质粒转染293T细胞,每组细胞皆出现较强绿色荧光,载体成功转染至293T细胞;病毒液感染小尾寒羊前体脂肪细胞并分化12 d后,过表达组SP1基因表达量极显著高于对照组（P<0.01）,干扰组SP1基因表达量极显著低于对照组（P<0.01）;过表达SP1基因极显著上调成脂标志基因mRNA的表达量（P<0.01）,产生更多脂滴;干扰SP1基因则结果相反。因此,SP1基因对小尾寒羊尾部前体脂肪细胞分化具有正向调控的作用。     

降低离心泵轴承运行温度的实践

针对某造纸厂反渗透水处理系统中的高压供水泵运行过程轴承运行温度偏高的问题,根据离心泵内部流动规律和泵的结构分析了轴承受力状况以及造成轴承运行温度偏高的原因,提出了在原有泵结构的基础上改变轴承组合方式的解决方案,并对方案进行试验验证,切实降低了轴承的运行温度,达到了预期目标,该方案为泵类设备运行维护提供参考方法。     

长沙地区蔬菜主要土传病害及其综合治理

经3a调查，发现长沙地区主要土传病害有疫病型，枯萎型，黄萎型，立枯型，猝倒病，青枯型等6种，在其综合治理方面，提出选用抗病，耐病蔬菜品种，实行轮作，选用无病种子或进行种子消毒，播种或定植前对土壤进行灭菌处理等是较经济，有效的方法，另外可选用木霉产品，绿粘帚菌产品和青枯散等生物农药进行生物防治，或选用氧氯化铜，胶氯鲷，杀青矾，乙磷铝，多菌灵，百菌清等农药进行药剂防治。     

苦母慈爱心 孝儿成栋梁

日前,嘉祥县评选“十佳母亲”,吕垓村的阎改真名列其中。 故事说来不禁令人感慨,这位懿德可范的母亲却从未见过自己的母亲。阎改真出生那天,母亲就去世了。俗话说,没妈的孩子像根草,更何况是旧社会的女孩子！阎改真曾被两次送人。 也许是一种命运的补偿,生于那个年月的阎改真竟幸运地留下了一双“天足”,而后来,当她独立地支撑起一个九口之家时,她所依仗的唯一资本或许正是这双大脚,她庆幸自己不必像其他女人那样,终日里挪着一对“三寸金莲”,却下不得地,干不得力气活。