利用28S rDNA D1/D2区和ITS rDNA序列鉴定甜瓜白粉病病原菌

为了明确宁夏干旱带压砂甜瓜白粉病病原菌,从病原菌分生孢子中提取DNA,PCR扩增ITSrDNA和28S rDNA D1/D2区段,测序后进行BLAST比对.结果表明,病原菌的ITS rDNA和28SrDNA D1/D2序列与菜豆叉丝单囊壳白粉菌Podosphaera phaseoli、凤仙花又丝单囊壳白粉菌P.bal-saminae、菊科叉丝单囊壳白粉菌P.fwca、苍耳单囊壳白粉菌P.xanthii、瓜类单囊壳白粉菌P.fuligi-nea等叉丝单囊壳属Podosphaera的多个种的ITS rDNA和28S rDNA D1/D2序列之间相似度均大于99%,鉴定甜瓜白粉病病原菌为叉丝单囊壳属Podosphaera.     

乌拉尔甘草不同外植体来源愈伤组织生长状况和含糖量的研究

以野生乌拉尔甘草的不同营养器官为外植体，探讨了不同培养条件下不同外植体愈伤组织生长动态、相对生长量、糖分含量的变化情况。结果表明，不同外植体愈伤组织生长动态均呈S形曲线，最佳继代培养时间为24d左右。在黑暗条件下，根段愈伤组织相对生长量最高，达577．29％，在光照条件下根茎芽愈伤组织还原糖和总糖含量最高，分别为0．74％和1．553％。     

西瓜立枯病和猝倒病的识别与防治

立枯病和猝倒病是西瓜苗期的主要病害，若防治不及时易造成瓜苗大片死亡。这两种病害症状十分相似，容易混淆，瓜农常因不能区分而误防误治，造成损失。     

甘草组培快繁技术优化的研究

以野生乌拉尔甘草根茎芽为外植体，对乌拉尔甘草根茎芽的组培快繁程序的优化问题进行了研究，试验结果表明：乌拉尔甘草无需生根培养，便可移栽。无菌苗繁育周期为60d，炼苗成活率达90％以上。     

不同采收方式对烤烟上部叶片生长及烟碱含量的影响

2005年在长沙以K326为材料研究了一次性采收和分次采收方式对烤烟上部叶生长和烟碱含量的影响，结果表明：不同采收处理对烤烟上部烟叶的生物学特性有一定的影响，同时对烟碱在不同叶位上的积累也有着一定的调控作用。上部烟叶采收次数的增加和留叶数的减少不利于对上部烟叶烟碱的控制，而烤烟上部6叶整体一次性采收，能有效地控制上部烟叶尤其是顶叶烟碱含量过高的问题。     

牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

用基因工程表达的牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白免疫Balb／C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA方法筛选,获得3株稳定分泌抗BVDVNS3蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株（1A9、2C3和5D5）,其细胞培养上清液ELISA效价分别为1：256、1：128和1：256,腹水ELISA效价分别为1：128000、1：64000和1：128000。亚型鉴定表明,1A9、2C3和5D5分别为IgG1、IgG2a和IgG1、ELISA结果显示,3株单克隆抗体仅与BVDVNS3蛋白和BVDV反应,不与其它相关病毒反应,表明3株单克隆抗体特异性良好。这3株单克隆抗体的获得为建立BVDV免疫学检测方法奠定了基础。     

甲型H1N1(2009)流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价

自甲型H1N1(2009)流感病毒于2009年在世界多个国家暴发流行后,许多国家的猪群中检测到该病毒的存在,因此建立快速准确的甲型H1N1流感病毒的检测方法成为迫切需求。本研究针对甲型H1N1(2009)流感病毒NA基因设计特异性引物和探针,建立甲型H1N1(2009)流感病毒特异性实时荧光RT-PCR快速检测方法。并将该方法与WHO推荐美国CDC建立的检测方法和美国农业部推荐的检测方法进行比较。通过田间试验验证该方法在实际应用中的效果。结果表明:本研究建立的方法对检测甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的灵敏度达到10-6,与WHO推荐的A型流感病毒实时荧光PCR检测方法的灵敏度一致,并且高于美国农业部推荐方法的检测灵敏度(10-5);该方法特异性强,与经典型H1N1和其他亚型流感病毒株无任何交叉反应。与香港兽医化验所进行了检测比对,检测灵敏度和特异性完全一致。近3 800份的田间试验表明,所建立的方法准确可靠。本研究所建立检测方法快速灵敏,检测结果准确可靠,适合用于甲型H1N1(2009)流感病毒的分子生物学检测和监测。     

干旱胁迫下油菜素内酯对文冠果苗木抗氧化酶活性和抗氧化剂含量的影响

用蘸根和叶面喷施不同浓度油菜素内酯(BRs)的方法,在人工控制土壤水分条件下,对黄土高原重要造林树种文冠果苗木重要的抗氧化酶活性和抗氧化剂含量变化进行研究。结果表明,用0.05~0.4 mg/L BRs处理文冠果苗木,超氧化物歧化酶(SOD)活性在中度干旱胁迫下较清水对照增加,但差异不显著,重度胁迫下增加显著;在中度和重度胁迫下,各处理文冠果苗木过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性均较清水对照升高,且差异显著;在中度和重度胁迫下,5个浓度BRs处理对抗坏血酸(ASA)和还原型谷光甘肽(GSH)含量均具显著的增加效应。轻度和重度胁迫下,0.2 mg/L BRs处理对文冠果苗木抗氧化酶活性和抗氧化剂含量的增加效应均最为显著。     

宁夏枸杞雄性不育育性标准研究

1材料与方法1．1材料材料为宁夏枸杞“YX-1”雄性不育植株和“宁杞1号”植株的新鲜花蕾,均采于银川市西夏区育新枸杞种业有限公司枸杞种植园新区。     

百脉根农杆菌快速高效遗传转化体系的建立

以百脉根品种“里奥”作为受体材料,以GUS基因为报告基因,研究了影响农杆菌介导的百脉根遗传转化的几种因素及表面活性剂(PEG 4000)、真空处理和乙酰丁香酮对提高转化效率的影响,建立了农杆菌介导的百脉根快速高效遗传转化体系,并获得了转基因抗性苗。结果表明,以子叶(带叶柄)为外植体,在OD600为0.5的菌液中,加入150 mg/L的PEG 4000,真空度6×10-2Pa,抽真空12 min,共培养3 d,转入含卡那霉素50 mg/L和羧苄青霉素300 mg/L的分化培养基中,约20 d后,50%的外植体分化不定芽,生根成苗。PCR初步检测表明有83%的植株为GUS阳性,转化率约为42%。