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建立了茶叶中蔗糖的测定方法,茶叶经热水浸泡后,亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀除蛋白质等干扰物,盐酸水解,经3,5-二硝基水杨酸(DNS)显色,分光光度计比色测定。结果表明,取5 g左右茶叶,加入50mL的去离子水,置于45℃水浴锅中,振荡浸提1 h,取茶汤,3 000 r/min离心3 min,过滤茶汤,定容至100mL,DNS法分别测总糖和还原糖,能实现茶叶中蔗糖的定量检测。在5 g茶叶中,分别添加10和50 mg蔗糖,回收率分别为117.60%和91.22%,取5份相同茶叶样品测得相对标准偏差为2.47%,方法检出限为2 mg/g。在20份茶叶样品检测中,可以明显区分人工添加蔗糖与正常茶叶样品。该方法灵敏度和重现性好,操作要求不高,有实际应用价值。 相似文献
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使用包埋玻璃化法对杏离体胚进行超低温保存研究,探讨适宜培养基、蔗糖预处理的时间及浓度、玻璃化保护液的选择及时间对超低温保存后胚成活率的影响。结果表明,胚在0.8 mol/L的蔗糖溶液中预培养24 h后,转入玻璃化保护液B中继续培养30 min ,投入液氮24 h后用40℃水浴快速化冻5 min ,转入MS培养基中在22℃条件下进行暗养,1 d后转移光照培养,最高成活率达80%。 相似文献
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介绍了用离子交换法制作铊型自聚焦透镜及其干涉片工艺,通过对经过不同交换时间的自聚焦透镜的折射率分布的测试及成像特点的分析,得出透镜离子交换时间与交换深度、折射率分布的关系,由此确定用离子交换法制作自聚焦透镜的最佳离子交换时间. 相似文献
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木薯(Manihot esculenta Crantz)为大戟科植物,其块根富含淀粉,主要用于食用、饲用,同时木薯淀粉还可广泛应用于工业生产中。木薯块根淀粉的合成需要蔗糖提供碳水化合物和能量,碱性/中性转化酶在木薯块根蔗糖分解利用时起关键作用。前期已从木薯基因组中克隆获得了11个碱性/中性转化酶基因,其中Me NINV4主要在茎中表达。本研究主要利用转化酶酵母突变菌株SEY2102进行酵母功能互补实验,鉴定Me NINV4是否具有催化蔗糖分解的功能。结果发现,转了p DR196-Me NINV4的SEY2102酵母可以在以蔗糖为唯一碳源的培养基中生长,表明Me NINV4能催化分解蔗糖。提取含有p DR196-Me NINV4质粒的SEY2102酵母粗酶液,进行碱性/中性转化酶活性检测,发现其能催化蔗糖分解成还原糖。这些结果为进一步研究Me NINV4的酶学特性及生理功能提供参考。 相似文献
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液泡转化酶(vacuolar invertase, VINV)是参与植物蔗糖代谢、器官发育的关键酶之一。木薯MeVINV1在块根发育及淀粉积累阶段的表达活跃,对该基因进行编辑敲除,将有助于解析MeVINV1在木薯块根淀粉积累过程中的作用。本研究构建了MeVINV1的CRISPR/Cas9基因编辑载体,转化木薯脆性胚性愈伤组织以验证载体的编辑效果。结果发现:转化后的样品中,MeVINV1基因靶点位置出现测序多峰,而未转化样品中没有多峰出现,表明本研究构建的基因编辑载体可对MeVINV1基因进行编辑;检测分析潜在脱靶位点的序列,发现未出现脱靶现象。该研究为获得MeVINV1基因的突变体,明确其在木薯块根发育及淀粉积累过程中的功能奠定了基础。 相似文献
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建立肌型糖原磷酸化酶基因pygma和pygmb突变体斑马鱼疾病模型,对人类PYGM基因突变导致的糖原贮积症Ⅴ型(glycogen storage disease typeⅤ,GSDⅤ)的研究具有重要意义。利用CRISPR/Cas9技术成功敲除了斑马鱼pygma和pygmb基因,分别获得pygma(-11bp-/-)和pygma(+14bp-/-)两种纯合突变体,以及pygmb(+1bp-/-)和pygmb(-2bp-/-)两种纯合突变体。过碘酸希夫糖原染色(periodic acid Schiff stain)实验显示pygma-/-和pygmb-/-纯合突变体心脏和肌肉组织出现明显的糖原累积。对野生型斑马鱼15个早期发育时间点以及12个成鱼组织中pygma和pygmb基因表达分析显示,pygma和pygmb早期发育阶段表达模式相似,从24 hpf到125 hpf,两基因表达量总体呈上升趋势,且pygmb的上升幅度大于pygma的上升幅度。在检测的12个组织中,pygma和pygmb只在少数几个组织中有明显表达。pygma在肌肉组织中表达最高,其次为心脏和皮肤组织;pygmb在心脏、脑、眼睛3个组织中高表达,在肌肉组织中也有表达,但表达量相对较低。斑马鱼pygma-/-和pygmb-/-突变体具有GSDⅤ病肌肉糖原累积的典型特征,该疾病模型的建立为进一步研究糖原贮积症的发病进程、详细机制和药物筛选等治疗策略提供基础数据。 相似文献
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