鸡胚小肠上皮细胞的分离培养及其热应激效应

【目的】比较不同消化酶对鸡胚小肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IECs)的分离和培养效果及细胞的热应激能力,为后续研究提供依据。【方法】以15日龄鸡胚为研究对象,分别使用0.5 g/L胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ与透明质酸酶联合及中性蛋白酶Ⅱ消化分离其小肠上皮细胞。培养不同时间后,观察IECs的生长状态,测定细胞生长活性;通过免疫荧光染色和免疫组化对所得IECs进行鉴定,确定最佳的消化酶。对优化所得鸡胚IECs于42℃分别进行2,3,4 h热应激处理,以37℃处理的IECs为对照,MTT法和流式细胞测定IECs的相对活力和凋亡率。【结果】细胞形态学观察发现,用胶原酶Ⅰ与透明质酸酶联合消化分离得到了大量小肠绒毛隐窝团块,易贴壁,细胞生长快;用0.5 g/L胰蛋白酶和中性蛋白酶Ⅱ消化分离得到的细胞数量少,贴壁慢。用3种酶消化方法分离的细胞生长曲线均呈"S"形,但用胶原酶Ⅰ与透明质酸酶联合消化分离的细胞生长曲线峰值较高,细胞活性强;联合消化所得IECs特异性标记抗原均为阳性,免疫荧光阳性率达(92.7±7.9)%,细胞膜质呈棕黄色,而对照组细胞膜质无着色。42℃下热应激3 h后细胞活力极显著下降,凋亡率为(35.96±1.57)%,极显著高于对照组的(0.67±0.02)%,可进行后续试验。【结论】采用胶原酶Ⅰ与透明质酸酶联合消化可得到IECs;42℃下处理3 h是构建IECs热应激模型的条件。     

黄鳝对蚕蛹的利用率好于泥鳅

以鱼粉为对照，评价黄鳝和泥鳅对蚕蛹的消化利用能力。结果表明，黄鳝和泥鳅对蚕蛹干物质、粗脂肪消化率均显著低于鱼粉．泥鳅对蚕蛹的粗蛋白消化率与干物质、粗脂肪消化率类似．黄鳝对蚕蛹的粗蛋白消化率极显著高于鱼粉：黄鳝对蚕蛹的利用率好于泥鳅。     

日本大耳白兔干扰素-γ基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

提取经ConA 刺激后的日本大耳白兔外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR技术对其IFN-γ基因进行扩增和测序。将去除信号肽的IFN-γ基因片段插入原核表达载体pET-30a并在大肠杆菌中进行表达。结果显示,克隆的IFN-γ基因长为504个核苷酸,具有一个完整的开放阅读框,编码168个氨基酸,所测序列与GenBank中已登录的安哥拉兔、中国白兔、欧洲兔、新西兰兔IFN-γ同源性为100%,与獭兔同源性高达99.8%。构建的重组菌经过IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳证实,IFN-γ基因片段在大肠杆菌中得到了融合表达,分子质量约为18 ku,表达量为菌体总蛋白的35%左右。以上结果为下一阶段兔IFN-γ重组蛋白生物学特性及其应用的研究奠定了基础。     

基于连续小波变换和RF算法的夏玉米氮素估算模型

及时、准确和无损的作物氮素水平监测对作物的增产、合理施肥以及减少环境污染等具有重要意义。利用夏玉米2个品种和2个氮肥梯度的完全随机试验数据和高光谱数据,基于随机森林(RF)算法和耦合连续小波变换,构建氮素反演模型。结果表明:连续小波变换可以有效地提取高光谱数据中的弱信息,并且可作为模型的特征参数;构建的氮素估算模型可以较为精准地反演叶片氮素浓度(LND),实测值与估测值的R2和nRMSE分别为0.832、0.112,预测结果可以被接受。本研究构建的夏玉米氮素估算模型初步实现了氮素模型的遥感预测,为大面积的氮素监测提供了一定的理论基础。     

基于反向传播神经网络的区域水资源需求量预测——以金华市为例

为推广反向传播(BP)神经网络在区域水资源需求量预测方面的实际应用,以金华市为例,通过主成分分析法得到金华市水资源需求量的3类主要影响因子--经济发展因素、水资源开发利用因素和水环境破坏因素;运用BP神经网络预报模型对该区域水资源总需求量进行预测,得出金华市2010年总需水量为21.935 280×108m3,其结果可为与水资源相协调区域的发展规划提供参考.     

灰皮支黑豆抗大豆胞囊线虫3号生理小种的生理机制

以抗感大豆胞囊线虫3号生理小种品种灰皮支黑豆(ZDD2315)和辽豆15为材料,室内人工接种大豆胞囊线虫,接种后5、10、15、20、25、30 d取样,测定抗感品种接种与未接种根内丙二醛(MDA)、可溶性糖和可溶性蛋白含量的动态变化,初步明确灰皮支黑豆抗大豆胞囊线虫3号生理小种的生理机制.结果表明:大豆受大豆胞囊线虫侵染后,抗病品种灰皮支黑豆根内丙二醛(MDA)、可溶性糖含量低于感病品种辽豆15,而可溶性蛋白含量高于感病品种辽豆15.     

苹果渣对鲤生长性能和血清生化指标的影响

选取均重为(20.72±2.68)g的鲤(Cyrinus carpio)270尾,随机分为3个处理,在基础日粮中分别添加0(对照组)、4%、8%的苹果渣,在半封闭的循环水养殖系统饲养51 d,分析比较苹果渣对鲤生长性能、血清生化指标和肝胰脏超氧化物歧化酶活性的影响.结果显示,日粮添加苹果渣对鲤生长性能、体成分无显著影响(P＞0.05);各组饲料干物质表观消化率分别为70.41%、69.78%、74.13%.组问无显著差异(P＞0.05);8%苹果渣组血清谷丙转氨酶活性显著高于对照组和4%苹果渣组(P＜0.05),8%和4%苹果渣组血清谷草转氨酶活性和高密度脂蛋白胆固醇浓度均显著高于对照组,各组间血清总蛋白、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和血糖浓度无显著差异(P＞0.05);添加苹果渣对鲤肝胰脏超氧化物歧化酶活性无影响.研究表明,在鲤鱼饲料中添加4%、8%苹果渣对生长性能无影响,且能够强化脂质代谢,但较高水平添加可能对肝胰脏造成损伤.建议鲤饲料中苹果渣添加量在4%以下.     

酸类化合物对大豆胞囊线虫防效及寄主生长的影响

以辽豆15为材料,采用人工接种的方法,分别测定了不同酸类化合物对大豆胞囊线虫的温室防治效果和对大豆植株生长情况的影响。结果表明:供试化合物中,甲酸和丙酸对大豆胞囊线虫的抑制率相对较高,对线虫的温室防治效果最好;乙酸和乙二酸次之;柠檬酸和苹果酸对线虫的防效较低。乙二酸、柠檬酸和苹果酸对大豆植株的生长抑制作用较小。综合试验结果,确定乙二酸是较为理想的线虫防治药剂。     

基于分簇数据融合的农产品冷链温度监控方法

针对现有基于无线传感网络的农产品冷链物流监测系统,传感器节点数据传输量大,带宽利用率低、能耗高,网络生命周期短的问题,提出了一种基于算术平均值与分批估计的簇内数据融合及自适应加权的簇间数据融合冷链温度监测方法。首先利用疏失误差对采集数据进行预处理,然后利用平均值与分批估计方法对簇成员节点发送的数据进行融合处理,最后簇头节点利用自适应加权算法对接收到的成员节点数据进行进一步的融合处理。实验证明,基于该数据融合方法的冷链监测系统网络生存周期相比传统方法提高了34.2%,稳定周期相比于传统低功耗自适应集簇分层型协议提高了11.4%,数据融合精度高于传统算术平均值法7.6%,系统能耗每轮降低约32.5%。能够有效降低冗余和可信度较差的数据对测量结果带来的影响,减少不必要数据传输损耗,降低了冷链物流成本,提高了农产品冷链物流信息化程度。     

刈割次数对紫花苜蓿根系中保护酶活性的影响

在哈尔滨地区对当年种植的紫花苜蓿进行不同刈割次数处理,越冬期间取样测定其根系中过氧化物酶(POD)和超氧化物岐化酶(SOD)活性.结果表明:不同刈割次数对越冬期间紫花苜蓿的POD和SOD活性具有显著的影响,超过1次的刈割会显著降低紫花苜蓿的POD和SOD活性及抗寒能力,并且随着刈割次数的增加紫花苜蓿的POD和SOD活性及抗寒能力随之下降.